| 摘要 | 第6-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 缩略词 | 第17-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-37页 |
| 1.1 抑癌基因p53的结构与功能 | 第18-22页 |
| 1.2 突变p53的结构和功能 | 第22-25页 |
| 1.3 Ras的激活与肿瘤发生发展的进程 | 第25-28页 |
| 1.4 原癌基因和抑癌基因突变协同作用促进肿瘤的发生 | 第28-29页 |
| 1.5 MAPK与耐药研究进展 | 第29-33页 |
| 1.6 阿霉素耐药的研究进展 | 第33-34页 |
| 1.7 顺铂耐药的研究进展 | 第34-36页 |
| 1.8 本研究的主要内容及意义 | 第36-37页 |
| 第二章 p53~(N236S)与Ras协同促进阿霉素诱导的细胞抗凋亡机制 | 第37-72页 |
| 2.1 材料与方法 | 第37-59页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第37页 |
| 2.1.2 小鼠成纤维细胞(MEF)细胞的制备 | 第37-38页 |
| 2.1.3 基因型鉴定 | 第38-43页 |
| 2.1.3.1 提取DNA | 第38-40页 |
| 2.1.3.2 p53~(SS)基因型鉴定 | 第40-43页 |
| 2.1.4 细胞转染 | 第43-44页 |
| 2.1.5 细胞培养 | 第44-47页 |
| 2.1.5.1 细胞复苏 | 第45页 |
| 2.1.5.2 细胞传代 | 第45-46页 |
| 2.1.5.3 细胞收集 | 第46页 |
| 2.1.5.4 细胞冻存 | 第46-47页 |
| 2.1.6 药物处理细胞 | 第47-48页 |
| 2.1.6.1 阿霉素处理细胞 | 第47页 |
| 2.1.6.2 抑制剂处理细胞 | 第47-48页 |
| 2.1.7 Western Blot实验 | 第48-53页 |
| 2.1.7.1 细胞总蛋白的提取 | 第48-49页 |
| 2.1.7.2 考马斯亮蓝法蛋白定量 | 第49页 |
| 2.1.7.3 聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第49-53页 |
| 2.1.8 Annexin V-FITC/PI双染流式细胞法检测细胞凋亡 | 第53-54页 |
| 2.1.9 免疫荧光 | 第54-55页 |
| 2.1.10 脉冲场实验 | 第55-58页 |
| 2.1.11 核质蛋白提取 | 第58-59页 |
| 2.2 实验仪器 | 第59页 |
| 2.3 结果与分析 | 第59-70页 |
| 2.3.1 Ras协同p53S耐受阿霉素诱导的细胞凋亡 | 第59-62页 |
| 2.3.2 Ras-MAPK途径在协同p53S抵抗阿霉素诱导凋亡的机制 | 第62-69页 |
| 2.3.3 Ras协同p53S增强DNA损伤修复能力 | 第69-70页 |
| 2.4 讨论 | 第70-72页 |
| 第三章 不同作用机制的抗肿瘤药物对p53S的作用 | 第72-86页 |
| 3.1 材料与方法 | 第72-74页 |
| 3.1.1 抗肿瘤药物的配制 | 第72-73页 |
| 3.1.2 MTT比色法 | 第73页 |
| 3.1.3 Western Blot实验 | 第73-74页 |
| 3.2 结果分析 | 第74-85页 |
| 3.2.1 顺铂对p53S突变细胞的杀伤作用 | 第74-75页 |
| 3.2.2 顺铂通过诱导细胞凋亡抑制p53S细胞的增殖 | 第75-77页 |
| 3.2.3 不同作用机制抗肿瘤药物对p53S细胞的杀伤作用 | 第77-82页 |
| 3.2.4 顺铂敏感机制的研究 | 第82-83页 |
| 3.2.5 抗肿瘤药物对含有不同突变的p53肿瘤细胞的杀伤作用 | 第83-85页 |
| 3.3 讨论 | 第85-86页 |
| 第四章 总结与展望 | 第86-88页 |
| 致谢 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-103页 |
| 附录A 硕士期间论文发表 | 第103页 |
