| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 文献综述 | 第11-19页 |
| 1. 盐胁迫对植物的影响 | 第11-14页 |
| 1.1 盐胁迫对植物种子萌发的影响 | 第11-12页 |
| 1.2 盐胁迫对植物生长发育及生物量的影响 | 第12页 |
| 1.3 盐胁迫对植物光合作用的影响 | 第12-14页 |
| 1.3.1 盐胁迫对叶绿体超微结构的影响 | 第12-13页 |
| 1.3.2 盐胁迫对叶绿素的影响 | 第13-14页 |
| 1.3.3 盐胁迫对叶绿素荧光的影响 | 第14页 |
| 2. 苹果酸与植物耐盐性 | 第14-15页 |
| 3. NADP-ME基因的研究进展 | 第15-16页 |
| 3.1 NADP-ME基因的调控途径 | 第15-16页 |
| 3.2 NADP-ME基因与植物的抗盐性 | 第16页 |
| 4. 转录组测序 | 第16-17页 |
| 5. 本论文的目的和意义 | 第17-19页 |
| 第一章 盐胁迫下甜高粱幼苗叶片转录组测序结果及分析 | 第19-27页 |
| 1. 试验材料 | 第19页 |
| 1.1 植物材料 | 第19页 |
| 1.2 材料处理 | 第19页 |
| 2. 试验方法 | 第19-21页 |
| 2.1 甜高粱幼苗转录组测序 | 第19页 |
| 2.2 提取RNA | 第19-20页 |
| 2.3 cDNA的合成 | 第20-21页 |
| 2.4 实时定量荧光PCR | 第21页 |
| 3. 试验结果 | 第21-26页 |
| 3.1 盐胁迫的DEGs结果统计 | 第21-22页 |
| 3.2 GO数据库注释结果统计 | 第22-23页 |
| 3.3 KEGG通路注释结果统计 | 第23-25页 |
| 3.4 光合生物中的碳固定 | 第25页 |
| 3.5 实时定量荧光PCR验证转录组数据的可靠性 | 第25-26页 |
| 4. 讨论 | 第26-27页 |
| 第二章 甜高粱中NADP-ME基因的分离 | 第27-33页 |
| 1. 试验材料 | 第27页 |
| 1.1 植物材料 | 第27页 |
| 1.2 材料处理 | 第27页 |
| 2. 试验方法 | 第27-30页 |
| 2.1 提取RNA | 第27页 |
| 2.2 甜高粱叶片中NADP-ME基因全长的克隆 | 第27-30页 |
| 2.2.1 cDNA的合成 | 第27页 |
| 2.2.2 目的片段的获得 | 第27-30页 |
| 3. 结果与分析 | 第30-32页 |
| 3.1 盐胁迫下甜高粱NADP-ME基因全长的分离 | 第30页 |
| 3.2 甜高粱NADP-ME基因的鉴定 | 第30-32页 |
| 4. 讨论 | 第32-33页 |
| 第三章 甜高粱叶片NADP-ME基因序列的生物信息学分析 | 第33-39页 |
| 1. 试验材料 | 第33页 |
| 2. 试验方法 | 第33页 |
| 3. 结果与分析 | 第33-38页 |
| 3.1 甜高粱叶片中NADP-ME基因一级结构和理化性质分析 | 第33-34页 |
| 3.2 甜高粱叶片中NADP-ME基因的疏水性分析 | 第34页 |
| 3.3 甜高粱NADP苹果酸酶的信号肽及跨膜结构预测及分析 | 第34-35页 |
| 3.4 甜高粱NADP苹果酸酶蛋白二级结构预测 | 第35-36页 |
| 3.5 甜高粱NADP苹果酸酶蛋白的保守结构域分析 | 第36页 |
| 3.6 甜高粱NADP苹果酸酶蛋白的三级结构预测 | 第36-37页 |
| 3.7 甜高粱NADP苹果酸酶基因与其他植物的同源性分析 | 第37-38页 |
| 4. 讨论 | 第38-39页 |
| 第四章 盐胁迫下甜高粱NADP-ME基因的功能分析 | 第39-59页 |
| 1. 试验材料 | 第39-40页 |
| 1.1 植物材料 | 第39页 |
| 1.2 材料处理 | 第39-40页 |
| 2. 试验方法 | 第40-45页 |
| 2.1 盐胁迫下甜高粱叶片NADP-ME基因的表达 | 第40-41页 |
| 2.2 拟南芥NADP-ME过表达株系的获得 | 第41-43页 |
| 2.2.1 表达载体pCAMBIA3300-NADP-ME的构建 | 第41-42页 |
| 2.2.2 花序侵染 | 第42页 |
| 2.2.3 Basta筛选过表达株系 | 第42-43页 |
| 2.2.4 DNA水平上的鉴定 | 第43页 |
| 2.3 NaCl处理下野生型和过表达植株萌发期试验 | 第43-44页 |
| 2.3.1 种子萌发率与主根长度的测定 | 第43-44页 |
| 2.3.2 100 mM NaCl处理下主根长度的测定 | 第44页 |
| 2.4 NaCl处理下野生型和过表达植株幼苗期试验 | 第44-45页 |
| 2.4.1 基因表达量的检测 | 第44页 |
| 2.4.2 光合作用特性的测定 | 第44-45页 |
| 2.4.3 叶绿素含量的测定 | 第45页 |
| 2.4.4 叶绿素荧光参数测定 | 第45页 |
| 2.4.5 PSI活性的测定 | 第45页 |
| 2.4.6 生物量的测定 | 第45页 |
| 3. 结果与分析 | 第45-57页 |
| 3.1 盐胁迫下甜高粱NADP-ME基因的表达 | 第45-46页 |
| 3.2 拟南芥NADP-ME过表达株系的获得 | 第46-49页 |
| 3.2.1 表达载体pCAMBIA3300-NADP-ME的构建 | 第46-47页 |
| 3.2.2 Basta筛选过表达株系 | 第47-48页 |
| 3.2.3 DNA水平上的鉴定 | 第48-49页 |
| 3.3 NaCl处理下野生型和过表达植株萌发期试验 | 第49-51页 |
| 3.3.1 不同盐处理对拟南芥种子萌发率及主根长度的影响 | 第49-51页 |
| 3.3.2 100 mM NaCl处理下拟南芥主根长度的变化 | 第51页 |
| 3.4 NaCl处理下野生型和过表达植株幼苗期试验 | 第51-57页 |
| 3.4.1 基因表达量的检测 | 第51-52页 |
| 3.4.2 盐处理对拟南芥幼苗光合参数的影响 | 第52-53页 |
| 3.4.3 盐处理对拟南芥幼苗叶绿素含量的影响 | 第53-54页 |
| 3.4.4 盐处理对拟南芥幼苗叶绿素荧光参数的影响 | 第54-55页 |
| 3.4.5 盐处理对拟南芥幼苗Fv/Fm与PSI活性的影响 | 第55-56页 |
| 3.4.6 盐处理对拟南芥幼苗生物量的影响 | 第56-57页 |
| 4. 讨论 | 第57-59页 |
| 第五章 盐胁迫对拟南芥NADP-ME基因突变体的影响 | 第59-73页 |
| 1. 试验材料 | 第59页 |
| 1.1 植物材料 | 第59页 |
| 1.2 材料处理 | 第59页 |
| 2. 试验方法 | 第59-62页 |
| 2.1 拟南芥突变体纯合体的筛选 | 第59-61页 |
| 2.1.1 CTAB小量法提基因组DNA | 第60页 |
| 2.1.2 筛选突变体 | 第60-61页 |
| 2.1.3 筛选纯合体 | 第61页 |
| 2.2 NaCl处理下野生型和突变体植株萌发期试验 | 第61-62页 |
| 2.2.1 种子萌发率和萌发势的测定 | 第61页 |
| 2.2.2 主根长度的测定 | 第61-62页 |
| 2.3 NaCl处理下野生型和突变体植株幼苗期试验 | 第62页 |
| 2.3.1 光合作用特性的测定 | 第62页 |
| 2.3.2 叶绿素含量的测定 | 第62页 |
| 2.3.3 叶绿素荧光参数的测定 | 第62页 |
| 2.3.4 PSI活性与Fv/Fm的测定 | 第62页 |
| 2.3.5 生物量的测定 | 第62页 |
| 3. 结果与分析 | 第62-70页 |
| 3.1 拟南芥突变体纯合体的筛选 | 第62-63页 |
| 3.2 NaCl处理下野生型和突变体植株萌发期试验 | 第63-65页 |
| 3.2.1 盐处理对拟南芥种子萌发率的影响 | 第63-64页 |
| 3.2.2 100 mM NaCl对拟南芥主根长度的影响 | 第64-65页 |
| 3.3 NaCl处理下野生型和突变体植株幼苗期试验 | 第65-70页 |
| 3.3.1 盐处理对拟南芥幼苗光合参数的影响 | 第65-66页 |
| 3.3.2 盐处理对拟南芥幼苗叶绿素含量的影响 | 第66-67页 |
| 3.3.3 盐处理对拟南芥幼苗叶绿素荧光参数的影响 | 第67-68页 |
| 3.3.4 盐处理对拟南芥幼苗Fv/Fm与(35)I/Io活性的影响 | 第68-69页 |
| 3.3.5 盐处理对拟南芥幼苗生物量的影响 | 第69-70页 |
| 4. 讨论 | 第70-73页 |
| 参考文献 | 第73-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第83页 |
