| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-20页 |
| 1.1 人转录因子FET家族研究现状 | 第7-12页 |
| 1.1.1 FET家族成员的结构域组成 | 第7页 |
| 1.1.2 FET蛋白与DNA和RNA的结合作用 | 第7-8页 |
| 1.1.3 细胞内FET蛋白的分布以及与RNA结合的特异性 | 第8-9页 |
| 1.1.4 FET蛋白在RNA加工及DNA损伤修复中的作用 | 第9-10页 |
| 1.1.5 FET蛋白在转录中的作用 | 第10-11页 |
| 1.1.6 FET蛋白与肿瘤的关系 | 第11-12页 |
| 1.2 核糖体内部进入位点（IRES）的研究现状 | 第12-18页 |
| 1.2.1 传统帽子介导的翻译 | 第12-13页 |
| 1.2.2 IRES介导的翻译 | 第13-14页 |
| 1.2.3 IRES活性的检测方法 | 第14-15页 |
| 1.2.4 ITAFs对IRES功能的影响 | 第15-17页 |
| 1.2.5 IRES的作用机制及应用 | 第17-18页 |
| 1.3 立题意义和主要研究内容 | 第18-20页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第20-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 菌株、细胞株、质粒及引物 | 第20-21页 |
| 2.1.2 试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第22页 |
| 2.1.4 培养基及溶液配制 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-29页 |
| 2.2.1 FET家族 5' UTR IRES活性初步分析的方法 | 第23-24页 |
| 2.2.2 隐含启动子排除的实验方法 | 第24-26页 |
| 2.2.3 荧光定量PCR排除FUS和EWSR1 mRNA 5' UTR内部剪切位点 | 第26页 |
| 2.2.4 FUS和EWSR1 IRES序列逐步截短及活性分析方法 | 第26页 |
| 2.2.5 EWSR1 IRES元件碱基突变方法 | 第26-27页 |
| 2.2.6 细胞培养 | 第27页 |
| 2.2.7 Western Blot | 第27-28页 |
| 2.2.8 RT-PCR分析细胞胁迫条件下FUS mRNA的表达水平 | 第28-29页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第29-47页 |
| 3.1 转录因子FET家族mRNA IRES活性的探究 | 第29-35页 |
| 3.1.1 FET家族成员mRNA 5' UTR分析及与IRES元件二级结构的比较 | 第29-30页 |
| 3.1.2 FET家族转录因子mRNA IRES活性的初步筛选 | 第30页 |
| 3.1.3 转录因子FUS和EWSR1 mRNA 5' UTR隐含启动子活性分析 | 第30-34页 |
| 3.1.4 FUS和EWSR1 IRES元件内部剪接位点的排除 | 第34-35页 |
| 3.2 EWSR1和FUS IRES元件活性中心域的分析 | 第35-42页 |
| 3.2.1 EWSR1和FUS IRES元件截短重组质粒的构建 | 第35-36页 |
| 3.2.2 EWSR1 IRES元件的活性中心分析 | 第36-37页 |
| 3.2.3 FUS IRES元件的活性中心分析 | 第37页 |
| 3.2.4 EWSR1 IRES元件基因突变分析 | 第37-41页 |
| 3.2.5 关于FUS和EWSR1 IRES元件活性中心域进一步探究 | 第41-42页 |
| 3.3 FET家族转录因子IRES活性生理学意义的初步探究 | 第42-47页 |
| 3.3.1 细胞胁迫条件下A2780细胞中EWSR1的表达 | 第42-43页 |
| 3.3.2 细胞胁迫条件下A2780细胞中FUS的表达 | 第43-45页 |
| 3.3.3 细胞胁迫条件对A2780细胞中FUS IRES元件活性的影响 | 第45-47页 |
| 第四章 主要结论与展望 | 第47-49页 |
| 4.1 主要结论 | 第47-48页 |
| 4.2 存在的问题与展望 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第55页 |
