摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
1 前言 | 第12-23页 |
1.1 弧菌简介 | 第12页 |
1.2 溶藻弧菌简介 | 第12-18页 |
1.2.1 溶藻弧菌的危害 | 第13-14页 |
1.2.2 溶藻弧菌病害的防治 | 第14-15页 |
1.2.3 溶藻弧菌的毒力因子 | 第15-18页 |
1.3 溶藻弧菌毒力调控机制 | 第18-22页 |
1.3.1 群体感应系统 | 第18-20页 |
1.3.2 细菌调控型sRNA | 第20-22页 |
1.4 课题研究内容及意义 | 第22-23页 |
2 qrr1-5基因克隆和分析 | 第23-33页 |
2.1 实验材料 | 第23-25页 |
2.1.1 菌株及质粒 | 第23页 |
2.1.2 培养基及试剂 | 第23-24页 |
2.1.3 引物 | 第24页 |
2.1.4 实验仪器设备 | 第24-25页 |
2.2 培养条件 | 第25页 |
2.3 实验方法 | 第25-28页 |
2.3.1 qrr1-5基因的克隆与测序 | 第25-28页 |
2.3.2 qrr1-5生物信息学分析 | 第28页 |
2.4.实验结果 | 第28-32页 |
2.4.1 qrr1-5基因的克隆与分析 | 第28-29页 |
2.4.2 Qrr1-5RNA二级结构分析 | 第29-30页 |
2.4.3 Qrr1-5靶标mRNA分子的预测分析 | 第30-32页 |
2.5 小结与讨论 | 第32-33页 |
3 qrr1-5突变株及其回补株的构建 | 第33-46页 |
3.1 实验材料 | 第33页 |
3.1.1 菌株及质粒 | 第33页 |
3.1.2 培养基及试剂 | 第33页 |
3.1.3 仪器设备 | 第33页 |
3.1.4 引物 | 第33页 |
3.2 培养条件 | 第33-35页 |
3.3 实验方法 | 第35-42页 |
3.3.1 野生型溶藻弧菌EPGS020401Δqrr1-5无标记框内缺失突变株的构建 | 第35-40页 |
3.3.2 回补菌株qrr1+-5+的构建 | 第40-42页 |
3.4 实验结果 | 第42-44页 |
3.4.1 Δqrr1-5的5个突变株的构建 | 第42-43页 |
3.4.2 qrr1~+-5~+的5个回补株的构建 | 第43-44页 |
3.5 小结与讨论 | 第44-46页 |
4 qrr1-5对溶藻弧菌不同生理功能的影响 | 第46-60页 |
4.1 实验材料 | 第46页 |
4.1.1 菌株 | 第46页 |
4.1.2 培养基及试剂 | 第46页 |
4.1.3 仪器设备 | 第46页 |
4.2 培养条件 | 第46-47页 |
4.3 实验方法 | 第47-50页 |
4.3.1 溶藻弧菌生长曲线测定 | 第47页 |
4.3.2 游动性与爬动性测定 | 第47页 |
4.3.3 生物被膜测定 | 第47-48页 |
4.3.4 胞外蛋白酶活性测定 | 第48-49页 |
4.3.5 不同环境应激能力测定 | 第49-50页 |
4.4 实验结果 | 第50-59页 |
4.4.1 Qrr1-5对溶藻弧菌生长情况的影响 | 第50-51页 |
4.4.2 Qrr1-5对溶藻弧菌运动性的调控 | 第51-52页 |
4.4.3 Qrr1-5对溶藻弧菌生物被膜形成的影响 | 第52-54页 |
4.4.4 Qrr1-5对溶藻弧菌胞外蛋白酶生成及活性的调控 | 第54-56页 |
4.4.5 Qrr1-5对溶藻弧菌不同环境应激能力的影响 | 第56-59页 |
4.5 小结与讨论 | 第59-60页 |
5 主要结论、创新点与展望 | 第60-63页 |
5.1 主要结论 | 第60-61页 |
5.2 创新点 | 第61页 |
5.3 展望 | 第61-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-70页 |
附录A 部分试剂及培养基的配制 | 第70-71页 |
附录B Qrr1-5的序列信息 | 第71-72页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第72-73页 |