| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 文献综述 | 第12-19页 |
| 第一章 减蛋综合征病毒的研究进展 | 第12-19页 |
| 1.1 减蛋综合征病毒概述 | 第12页 |
| 1.2 EDSV的一般生物学特性 | 第12-14页 |
| 1.2.1 EDSV的分类 | 第12-13页 |
| 1.2.2 EDSV理化特性 | 第13页 |
| 1.2.3 EDSV基因组结构及主要编码蛋白 | 第13页 |
| 1.2.4 EDSV的流行病学 | 第13-14页 |
| 1.3 EDSV的致病机理 | 第14页 |
| 1.4 EDSV的诊断 | 第14-15页 |
| 1.5 腺病毒与细胞凋亡 | 第15-18页 |
| 1.5.1 细胞凋亡的概述 | 第15-17页 |
| 1.5.2 病毒感染与细胞凋亡的联系 | 第17-18页 |
| 1.6 本研究的研究目的和意义 | 第18-19页 |
| 试验研究 | 第19-39页 |
| 第二章 减蛋综合征病毒诱导鸭胚成纤维细胞凋亡的研究 | 第19-31页 |
| 2.1 材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 实验鸭胚 | 第19页 |
| 2.1.2 病毒和细胞 | 第19页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第20页 |
| 2.1.5 主要溶液的配制 | 第20-21页 |
| 2.2 方法 | 第21-23页 |
| 2.2.1 病毒增殖 | 第21页 |
| 2.2.2 鸭胚原代成纤维细胞的制备 | 第21页 |
| 2.2.3 EDSV TCID50的检测 | 第21页 |
| 2.2.4 EDSV病毒感染DEF细胞的病变观察 | 第21页 |
| 2.2.5 荧光定量引物设计 | 第21页 |
| 2.2.6 病毒DNA提取 | 第21页 |
| 2.2.7 流式细胞术检测细胞凋亡率 | 第21-22页 |
| 2.2.8 TUNEL检测 | 第22页 |
| 2.2.9 Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 活性检测 | 第22-23页 |
| 2.2.10 Western blot检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 及Bax、Bcl-2 的表达 | 第23页 |
| 2.3 结果 | 第23-29页 |
| 2.3.1 EDSV TCID50的检测 | 第23-24页 |
| 2.3.2 DEF细胞感染EDSV后的细胞病变 | 第24-25页 |
| 2.3.3 penton基因的PCR扩增 | 第25页 |
| 2.3.4 EDSV在DEF细胞上的增殖规律 | 第25-26页 |
| 2.3.5 流式细胞术检测EDSV感染对DEF细胞凋亡率的影响 | 第26页 |
| 2.3.6 TUNEL法检测EDSV对DEF细胞凋亡的影响 | 第26-27页 |
| 2.3.7 EDSV感染DEF细胞对Caspase-3、Caspase-8 和Caspase-9 蛋白表达的影响 | 第27-28页 |
| 2.3.8 EDSV感染DEF细胞对Bax与Bcl-2 蛋白表达水平的影响 | 第28-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-30页 |
| 2.5 小结 | 第30-31页 |
| 第三章 EDSV Hexon蛋白诱导DEF凋亡的研究 | 第31-39页 |
| 3.1 材料 | 第31-32页 |
| 3.1.1 细胞和质粒 | 第31页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第31页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第31-32页 |
| 3.1.4 主要溶液配制 | 第32页 |
| 3.2 方法 | 第32-34页 |
| 3.2.1 真核表达质粒pcDNA-3.1-Hexon的制备 | 第32-33页 |
| 3.2.2 真核表达质粒pcDNA-3.1-Hexon的提取 | 第33页 |
| 3.2.3 Caspase活性检测 | 第33-34页 |
| 3.2.4 Western blot检测Caspase-3、Caspase-8 和Caspase-9 及Bax、Bcl-2 的表达 | 第34页 |
| 3.3 结果 | 第34-37页 |
| 3.3.1 Hexon基因的PCR扩增 | 第34页 |
| 3.3.2 pcDNA- 3.1-Hexon质粒的酶切鉴定 | 第34-35页 |
| 3.3.3 pcDNA- 3.1-Hexon转染DEF细胞及表达蛋白的鉴定 | 第35页 |
| 3.3.4 TUNEL检测Hexon蛋白对DEF细胞凋亡的影响 | 第35-36页 |
| 3.3.5 Hexon蛋白对DEF细胞内Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 及Bax、Bcl-2表达的影响 | 第36-37页 |
| 3.4 讨论 | 第37-38页 |
| 3.5 小结 | 第38-39页 |
| 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-48页 |
| 附录 | 第48-49页 |
| 缩略词表 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 个人简介 | 第51页 |
