| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 英文缩略词中英文注释表 | 第14-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-22页 |
| 1.1 引言 | 第16页 |
| 1.2 肺泡巨噬细胞在重症急性胰腺炎肺损伤中的作用 | 第16-17页 |
| 1.3 巨噬细胞的极化和功能调节 | 第17页 |
| 1.4 干扰素调节因子5与炎症状态下的巨噬细胞极化 | 第17-18页 |
| 1.5 研究目的和研究意义 | 第18-19页 |
| 1.5.1 研究目的 | 第19页 |
| 1.5.2 研究意义 | 第19页 |
| 1.6 研究内容、方法和技术路线 | 第19-22页 |
| 1.6.1 研究内容 | 第19-20页 |
| 1.6.2 研究方法 | 第20-21页 |
| 1.6.3 技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 重症急性胰腺炎肺损伤小鼠模型的建立 | 第22-42页 |
| 2.1 引言 | 第22页 |
| 2.2 材料与方法 | 第22-24页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.2 主要溶液 | 第23页 |
| 2.2.3 主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.3 实验动物 | 第24页 |
| 2.4 方法 | 第24-31页 |
| 2.4.1 实验动物分组 | 第24页 |
| 2.4.2 重症急性胰腺炎肺损伤小鼠模型的建立方法 | 第24-25页 |
| 2.4.3 族腺、肺组织病理切片苏木精-伊红染色（hematoxylin-eosin staining,HE)及病理学评分 | 第25-28页 |
| 2.4.4 血清淀粉酶测定 | 第28页 |
| 2.4.5 肺组织湿干重比测定 | 第28页 |
| 2.4.6 肺组织髓过氧化物酶活性和丙二醛含量测定 | 第28-30页 |
| 2.4.7 肺组织TNF-α和IL-1β测定 | 第30页 |
| 2.4.8 统计学分析 | 第30-31页 |
| 2.5 结果 | 第31-39页 |
| 2.5.1 胰腺、肺组织大体形态学改变 | 第31-32页 |
| 2.5.2 胰腺、肺组织镜下病理改变 | 第32-34页 |
| 2.5.3 胰腺与肺组织病理学评分 | 第34-35页 |
| 2.5.4 血清淀粉酶测定结果 | 第35-36页 |
| 2.5.5 肺组织湿干重比测定结果 | 第36页 |
| 2.5.6 肺组织MPO活性和MDA含量变化 | 第36-38页 |
| 2.5.7 肺组织TNF-α和IL-1β水平变化 | 第38-39页 |
| 2.6 讨论 | 第39-42页 |
| 第三章 肺泡巨噬细胞极化与重症急性胰腺炎肺损伤 | 第42-59页 |
| 3.1 引言 | 第42页 |
| 3.2 材料与方法 | 第42-44页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第42-43页 |
| 3.2.2 主要仪器设备 | 第43-44页 |
| 3.2.3 实验动物及分组 | 第44页 |
| 3.3 方法 | 第44-47页 |
| 3.3.1 重症急性胰腺炎肺损伤小鼠模型的建立 | 第44页 |
| 3.3.2 肺泡灌洗及炎症细胞计数 | 第44-45页 |
| 3.3.3 肺泡巨噬细胞表型鉴定 | 第45页 |
| 3.3.4 肺组织TNF-α和IL-1β测定 | 第45页 |
| 3.3.5 免疫组织化学染色法检测肺巨噬细胞浸润情况 | 第45-46页 |
| 3.3.6 激光共聚焦免疫荧光染色 | 第46-47页 |
| 3.3.7 统计学分析 | 第47页 |
| 3.4 结果 | 第47-56页 |
| 3.4.1 重症急性胰腺炎肺损伤建模成功后肺的炎症反应 | 第47-49页 |
| 3.4.2 肺泡M1、M2型巨噬细胞分选鉴定 | 第49-50页 |
| 3.4.3 肺组织TNF-α和IL-1β水平变化 | 第50页 |
| 3.4.4 CD68免疫组化染色法检测重症急性胰腺炎肺损伤时肺泡巨噬细胞浸润情况 | 第50-51页 |
| 3.4.5 激光共聚焦免疫荧光染色检测重症急性胰腺炎肺组织中M1、M2巨噬细胞的浸润情况 | 第51-56页 |
| 3.5 讨论 | 第56-59页 |
| 第四章 IRF5在肺泡巨噬细胞极化中的作用 | 第59-73页 |
| 4.1 引言 | 第59页 |
| 4.2 材料 | 第59-63页 |
| 4.2.1 主要试剂 | 第59-61页 |
| 4.2.2 主要溶液 | 第61-62页 |
| 4.2.3 主要仪器设备 | 第62页 |
| 4.2.4 实验动物及分组 | 第62-63页 |
| 4.3 方法 | 第63-67页 |
| 4.3.1 重症急性胰腺炎肺损伤小鼠模型的建立 | 第63页 |
| 4.3.2 肺泡灌洗及肺泡M1、M2型巨噬细胞的分选鉴定 | 第63页 |
| 4.3.3 骨髓来源巨噬细胞的制备 | 第63页 |
| 4.3.4 骨髓来源巨噬细胞极化的体外诱导 | 第63页 |
| 4.3.5 实时定量PCR检测重症急性胰腺炎早期肺泡巨噬细胞IRF5、IL-12、TNF-α、iNOS、IL-10、Arg-1 mRNA的表达 | 第63-65页 |
| 4.3.6 实时定量PCR检测采用IRF5 siRNA沉默IRF5表达后,肺泡巨噬细胞IRF5、TNF-α、IL-12、iNOS、IL-10、Arg-1 mRNA的表达水平 | 第65页 |
| 4.3.7 Western blotting检测相关细胞因子IRF5、TNF-α、IL-12、iNOS、IL-10Arg-1蛋白的表达水平 | 第65-67页 |
| 4.3.8 统计学分析 | 第67页 |
| 4.4 结果 | 第67-71页 |
| 4.4.1 肺泡M1、M2型巨噬细胞形态学观察 | 第67-68页 |
| 4.4.2 IRF5在肺泡M1、M2型巨噬细胞中的表达 | 第68-69页 |
| 4.4.3 IRF5 siRNA转染肺泡M1型巨噬细胞后, IRF5、TNF-α、IL-12、iNOSmRNA水平明显降低,IL-10、Arg-1mRNA水平明显增高 | 第69-70页 |
| 4.4.4 IRF5 siRNA转染肺泡M1型巨噬细胞后,IRF5、TN F-α、IL-12、iNOS蛋白水平明显降低,IL-10、Arg-1蛋白水平明显增高 | 第70-71页 |
| 4.5 讨论 | 第71-73页 |
| 第五章 慢病毒介导的IRF5干扰对重症急性胰腺炎肺损伤保护作用的研究 | 第73-102页 |
| 5.1 引言 | 第73页 |
| 5.2 材料与方法 | 第73-75页 |
| 5.2.1 主要试剂 | 第73-74页 |
| 5.2.2 主要仪器设备 | 第74-75页 |
| 5.2.3 实验动物 | 第75页 |
| 5.3 方法 | 第75-84页 |
| 5.3.1 实验动物分组 | 第75页 |
| 5.3.2 慢病毒干扰的构建 | 第75-81页 |
| 5.3.3 IRF5 shRNA感染小鼠及建模 | 第81页 |
| 5.3.4 胰腺、肺组织切片HE染色及病理学评分 | 第81页 |
| 5.3.5 血清淀粉酶测定 | 第81页 |
| 5.3.6 肺组织湿干重比测定 | 第81页 |
| 5.3.7 肺组织MPO活性和MDA含量测定 | 第81页 |
| 5.3.8 肺组织TNF-α和IL-1β含量检测 | 第81-82页 |
| 5.3.9 免疫组织化学法检测小鼠肺组织IRF5、IL-12、TNF-α蛋白的表达 | 第82-83页 |
| 5.3.10 激光共聚焦免疫荧光染色法检测小鼠肺组织CD68、iNOS、Arg-1的表达 | 第83-84页 |
| 5.3.11 统计学分析 | 第84页 |
| 5.4 结果 | 第84-98页 |
| 5.4.1 IRF5干扰序列筛选 | 第84页 |
| 5.4.2 IRF5 shRNA干扰后血淀粉酶变化 | 第84-85页 |
| 5.4.3 IRF5 shRNA干扰后肺组织湿干重比测定结果 | 第85页 |
| 5.4.4 IRF5 shRNA干扰后肺组织MPO活性变化 | 第85-86页 |
| 5.4.5 IRF5 shRNA干扰后肺组织MDA含量变化 | 第86-87页 |
| 5.4.6 IRF5 shRNA干扰后肺组织TNF-α水平的变化 | 第87-88页 |
| 5.4.7 IRF5 shRNA干扰后肺组织IL-1β水平的变化 | 第88页 |
| 5.4.8 肺组织HE染色切片病理学结果 | 第88-91页 |
| 5.4.9 肺组织免疫组化结果 | 第91-93页 |
| 5.4.10 激光共聚焦免疫荧光染色检测肺组织CD68、iNOS、Arg-1的表达 | 第93-98页 |
| 5.5 讨论 | 第98-102页 |
| 第六章 主要结论和展望 | 第102-104页 |
| 6.1 主要结论 | 第102页 |
| 6.2 展望 | 第102-104页 |
| 参考文献 | 第104-116页 |
| 综述 | 第116-134页 |
| 参考文献 | 第126-134页 |
| 致谢 | 第134-135页 |
| 博士期间已发表和待发表的学术论文 | 第135-136页 |
| 在读期间主持及参与的科研项目 | 第136页 |
