致谢 | 第7-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
ABSTRACT | 第9页 |
第一章 绪论 | 第14-20页 |
1.1 铅的神经毒性及可能机制 | 第14-16页 |
1.1.1 铅的神经毒性 | 第14-15页 |
1.1.2 铅神经毒性的可能机制 | 第15-16页 |
1.2 表观遗传学 | 第16-18页 |
1.2.1 表观遗传学涉及机制 | 第16-17页 |
1.2.2 表观遗传学研究方法 | 第17-18页 |
1.3 课题研究的背景,意义和主要内容 | 第18-20页 |
1.3.1 课题研究的背景和意义 | 第18-19页 |
1.3.2 课题研究的主要内容 | 第19-20页 |
第二章 EZH2在铅暴露导致的神经毒性中发挥关键作用 | 第20-41页 |
2.1 实验材料 | 第20-22页 |
2.1.1 实验仪器 | 第20页 |
2.1.2 实验试剂和药品 | 第20-21页 |
2.1.3 相关抗体 | 第21页 |
2.1.4 相关引物 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-34页 |
2.2.1 PC12细胞培养 | 第22页 |
2.2.2 细胞存活率检测 | 第22-23页 |
2.2.3 蛋白免疫印迹法(Western Blot) | 第23-25页 |
2.2.4 shEZH2载体构建 | 第25-27页 |
2.2.5 无内毒素质粒提取方法 | 第27页 |
2.2.6 Lipofectamine 3000 转染细胞实验 | 第27-28页 |
2.2.7 细胞核蛋白浆蛋白分离提取 | 第28页 |
2.2.8 免疫共沉淀 (Co-IP) | 第28-29页 |
2.2.9 染色质免疫共沉淀 | 第29-32页 |
2.2.10 细胞中总RNA提取 | 第32页 |
2.2.11 反转录 | 第32-33页 |
2.2.12 荧光定量聚合酶链式反应 | 第33-34页 |
2.3 数据分析 | 第34页 |
2.4 实验结果 | 第34-39页 |
2.4.1 铅暴露抑制EZH2表达 | 第34-35页 |
2.4.2 慢性铅暴露通过EZH2对细胞突起生成产生影响 | 第35-37页 |
2.4.3 铅暴露通过EZH2调控细胞生长发育相关的诸多关键基因 | 第37-39页 |
2.5 讨论 | 第39-41页 |
第三章 慢性铅暴露通过抑制EZH2表达损伤发育期大鼠学习记忆能力 | 第41-51页 |
3.1 实验材料 | 第41-42页 |
3.1.1 实验仪器 | 第41页 |
3.1.2 实验试剂和药品 | 第41页 |
3.1.3 相关抗体 | 第41页 |
3.1.4 实验动物 | 第41-42页 |
3.2 实验方法 | 第42-45页 |
3.2.1 原代海马神经元培养 | 第42-43页 |
3.2.2 高尔基染色实验(Golgi-COX) | 第43-44页 |
3.2.3 Morris水迷宫实验 | 第44-45页 |
3.2.4 其他实验方法 | 第45页 |
3.3 实验结果 | 第45-49页 |
3.3.1 慢性铅暴露通过EZH2降低神经元中H3K27me3水平 | 第45-47页 |
3.3.2 慢性铅暴露通过EZH2损伤发育期大鼠学习记忆能力 | 第47-49页 |
3.4 数据分析 | 第49-50页 |
3.5 讨论 | 第50-51页 |
第四章 慢性铅暴露通过H3K27me3调控Wnt信号通路 | 第51-60页 |
4.1 实验材料 | 第51-52页 |
4.1.1 实验仪器 | 第51页 |
4.1.2 实验试剂及药品 | 第51页 |
4.1.3 相关引物 | 第51-52页 |
4.2 实验方法 | 第52-55页 |
4.2.1 神经元基因组提取 | 第52-53页 |
4.2.2 特异扩增亚硫酸氢钠处理的DNA启动子区Cp G岛 | 第53-54页 |
4.2.3 特定甲基化位点分析 | 第54-55页 |
4.3 数据分析 | 第55页 |
4.4 实验结果 | 第55-58页 |
4.5 讨论 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况 | 第66-67页 |