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两种人类传染病相关蛋白的表达、纯化及结构研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第一部分 人类APOBEC3H HapII在昆虫表达系统中的表达与纯化第9-29页
    第一章 绪论第9-16页
        1.1 HIV-1 病毒概述第9页
        1.2 HIV-1 的基因结构和复制周期第9-11页
        1.3 APOBEC3家族蛋白质第11-12页
        1.4 Vif抑制APOBEC3抗病毒活性的机制第12页
        1.5 APOBEC3H蛋白质第12-13页
        1.6 杆状病毒表达载体系统(baculovirus expression vector system, BEVS)第13-14页
        1.7 研究的目的及意义第14-16页
    第二章 材料和方法第16-24页
        2.1 实验材料第16-18页
            2.1.1 基因第16页
            2.1.2 菌株和细胞第16页
            2.1.3 质粒构建第16-17页
            2.1.4 常用酶和试剂盒第17页
            2.1.5 常用试剂第17-18页
            2.1.6 实验设备第18页
        2.2 实验方法第18-24页
            2.2.1 引物设计及PCR的扩增第18-19页
            2.2.2 重组粘粒的构建和鉴定第19-21页
            2.2.3 昆虫细胞的转染和杆状病毒的扩增第21页
            2.2.4 目的蛋白的表达及Western Blot检测第21-22页
            2.2.5 目的蛋白A3H-His的纯化第22页
            2.2.6 HEK293T细胞的转染第22-23页
            2.2.7 免疫共沉淀实验第23-24页
    第三章 结果与讨论第24-28页
        3.1 APOBEC3H HapII的克隆第24页
        3.2 Western blotting检测A3H-His蛋白的表达第24-25页
        3.3 A3H-His蛋白的大量表达及纯化第25-26页
        3.4 A3H-His与Vif的免疫共沉淀实验第26-28页
    第四章 小结第28-29页
第二部分 人类EV683A-N蛋白的表达及结构的初步研究第29-53页
    第一章 绪论第29-38页
        1.1 肠道病毒68型病毒(Enterovirus 68, EV-D68)概述第29-30页
        1.2 EV-D68的基因组结构第30-35页
            1.2.1 EV-D68的结构蛋白第31页
            1.2.2 EV-D68的非结构蛋白第31-35页
        1.3 EV-D68的生物学特性第35-36页
            1.3.1 免疫原性第35页
            1.3.2 特异性受体的发现第35-36页
            1.3.3 致病机理第36页
        1.4 研究的目的及意义第36-38页
    第二章 材料和方法第38-44页
        2.1 实验材料第38页
        2.2 实验方法第38-44页
            2.2.1 质粒构建第38-39页
            2.2.2 His-SUMO-3A(1-61)融合蛋白的表达验证第39页
            2.2.3 筛选目的蛋白最佳的表达条件第39-40页
            2.2.4 His-SUMO-3A(1-61)蛋白的大量表达和纯化第40-41页
            2.2.5 目的蛋白 3A(1-61)的纯化第41-42页
            2.2.6 3A(1-61)的交联反应实验(Cross-linking technology)第42-43页
            2.2.7 小RNA病毒家族中各毒株 3A蛋白的氨基酸序列比对第43页
            2.2.8 目的蛋白的三维结构预测第43-44页
    第三章 实验结果第44-51页
        3.1 小RNA病毒家族 3A蛋白氨基酸序列分析第44-45页
        3.2 pET28a-His-sumo-3A(1-61)质粒的构建第45-46页
        3.3 融合蛋白的验证表达第46-47页
        3.4 目的蛋白的大量表达与纯化第47-49页
        3.5 验证 3A(1-61)蛋白多聚体形式第49页
        3.6 3A(1-61)蛋白的结构预测第49-51页
    第四章 小结与讨论第51-53页
参考文献第53-60页
发表论文和科研情况说明第60-61页
致谢第61-62页

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