摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一部分 人类APOBEC3H HapII在昆虫表达系统中的表达与纯化 | 第9-29页 |
第一章 绪论 | 第9-16页 |
1.1 HIV-1 病毒概述 | 第9页 |
1.2 HIV-1 的基因结构和复制周期 | 第9-11页 |
1.3 APOBEC3家族蛋白质 | 第11-12页 |
1.4 Vif抑制APOBEC3抗病毒活性的机制 | 第12页 |
1.5 APOBEC3H蛋白质 | 第12-13页 |
1.6 杆状病毒表达载体系统(baculovirus expression vector system, BEVS) | 第13-14页 |
1.7 研究的目的及意义 | 第14-16页 |
第二章 材料和方法 | 第16-24页 |
2.1 实验材料 | 第16-18页 |
2.1.1 基因 | 第16页 |
2.1.2 菌株和细胞 | 第16页 |
2.1.3 质粒构建 | 第16-17页 |
2.1.4 常用酶和试剂盒 | 第17页 |
2.1.5 常用试剂 | 第17-18页 |
2.1.6 实验设备 | 第18页 |
2.2 实验方法 | 第18-24页 |
2.2.1 引物设计及PCR的扩增 | 第18-19页 |
2.2.2 重组粘粒的构建和鉴定 | 第19-21页 |
2.2.3 昆虫细胞的转染和杆状病毒的扩增 | 第21页 |
2.2.4 目的蛋白的表达及Western Blot检测 | 第21-22页 |
2.2.5 目的蛋白A3H-His的纯化 | 第22页 |
2.2.6 HEK293T细胞的转染 | 第22-23页 |
2.2.7 免疫共沉淀实验 | 第23-24页 |
第三章 结果与讨论 | 第24-28页 |
3.1 APOBEC3H HapII的克隆 | 第24页 |
3.2 Western blotting检测A3H-His蛋白的表达 | 第24-25页 |
3.3 A3H-His蛋白的大量表达及纯化 | 第25-26页 |
3.4 A3H-His与Vif的免疫共沉淀实验 | 第26-28页 |
第四章 小结 | 第28-29页 |
第二部分 人类EV683A-N蛋白的表达及结构的初步研究 | 第29-53页 |
第一章 绪论 | 第29-38页 |
1.1 肠道病毒68型病毒(Enterovirus 68, EV-D68)概述 | 第29-30页 |
1.2 EV-D68的基因组结构 | 第30-35页 |
1.2.1 EV-D68的结构蛋白 | 第31页 |
1.2.2 EV-D68的非结构蛋白 | 第31-35页 |
1.3 EV-D68的生物学特性 | 第35-36页 |
1.3.1 免疫原性 | 第35页 |
1.3.2 特异性受体的发现 | 第35-36页 |
1.3.3 致病机理 | 第36页 |
1.4 研究的目的及意义 | 第36-38页 |
第二章 材料和方法 | 第38-44页 |
2.1 实验材料 | 第38页 |
2.2 实验方法 | 第38-44页 |
2.2.1 质粒构建 | 第38-39页 |
2.2.2 His-SUMO-3A(1-61)融合蛋白的表达验证 | 第39页 |
2.2.3 筛选目的蛋白最佳的表达条件 | 第39-40页 |
2.2.4 His-SUMO-3A(1-61)蛋白的大量表达和纯化 | 第40-41页 |
2.2.5 目的蛋白 3A(1-61)的纯化 | 第41-42页 |
2.2.6 3A(1-61)的交联反应实验(Cross-linking technology) | 第42-43页 |
2.2.7 小RNA病毒家族中各毒株 3A蛋白的氨基酸序列比对 | 第43页 |
2.2.8 目的蛋白的三维结构预测 | 第43-44页 |
第三章 实验结果 | 第44-51页 |
3.1 小RNA病毒家族 3A蛋白氨基酸序列分析 | 第44-45页 |
3.2 pET28a-His-sumo-3A(1-61)质粒的构建 | 第45-46页 |
3.3 融合蛋白的验证表达 | 第46-47页 |
3.4 目的蛋白的大量表达与纯化 | 第47-49页 |
3.5 验证 3A(1-61)蛋白多聚体形式 | 第49页 |
3.6 3A(1-61)蛋白的结构预测 | 第49-51页 |
第四章 小结与讨论 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-60页 |
发表论文和科研情况说明 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |