水稻mutant37基因的精细定位和功能初步分析
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-23页 |
| ·miRNA的合成途径 | 第10-14页 |
| ·miRNA的经典合成途径 | 第12页 |
| ·miRNA的Mirttron合成途径 | 第12-14页 |
| ·miRNA合成途径中的酶与蛋白质 | 第14-15页 |
| ·Drosha-DGCR8 | 第14页 |
| ·Dicer | 第14-15页 |
| ·RISC | 第15页 |
| ·植物中miRNA的合成途径 | 第15-16页 |
| ·植物中miRNA的作用机制 | 第16-17页 |
| ·miRNA指导的靶mRNA的特异性切割 | 第16页 |
| ·miRNA指导的翻译抑制 | 第16-17页 |
| ·miRNA在植物中的角色 | 第17页 |
| ·植物miRNA的功能 | 第17-22页 |
| ·miRNA在植物中的调控作用 | 第19页 |
| ·miRNA调节细胞生长发育 | 第19-20页 |
| ·miRNA在植物逆境胁迫中的作用 | 第20-21页 |
| ·miRNA与病毒感染 | 第21页 |
| ·miRNA与农艺性状的改善 | 第21-22页 |
| ·miR156在植物中的作用 | 第22页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 2 实验材料与方法 | 第23-38页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·供试材料及其来源 | 第23页 |
| ·遗传群体的构建和田间管理 | 第23页 |
| ·主要的实验仪器与试剂 | 第23-24页 |
| ·主要的实验试剂 | 第23-24页 |
| ·主要的实验仪器 | 第24页 |
| ·主要的实验载体 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-38页 |
| ·甲基磺酸乙酯(EMS)的化学诱变 | 第24-25页 |
| ·农艺性状调查 | 第25页 |
| ·遗传分析 | 第25页 |
| ·叶鞘的细胞学结构特征观察 | 第25-26页 |
| ·水稻DNA提取 | 第26-27页 |
| ·PCR反应体系及扩增程序 | 第27-28页 |
| ·PCR反应体系 | 第27页 |
| ·PCR扩增程序 | 第27-28页 |
| ·10×PCR-buffer的配方 | 第28页 |
| ·凝胶电泳检测及纯化回收 | 第28-30页 |
| ·凝胶电泳 | 第28-29页 |
| ·目的DNA片段的纯化和回收 | 第29-30页 |
| ·mutant37的基因定位和克隆 | 第30页 |
| ·mutant37基因的初步定位 | 第30页 |
| ·mutant37基因的精细定位 | 第30页 |
| ·候选基因的克隆和测序及相关基因表达分析 | 第30-32页 |
| ·mutant37候选基因的克隆及测序 | 第30-31页 |
| ·总RNA的提取 | 第31页 |
| ·反转录cDNA | 第31-32页 |
| ·miR156d基因的表达分析 | 第32页 |
| ·过表达载体和RNAi载体构建 | 第32-35页 |
| ·质粒提取及大肠杆菌和农杆菌的转化 | 第35-36页 |
| ·质粒提取 | 第35页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第35页 |
| ·农杆菌的转化 | 第35-36页 |
| ·阳性菌株的鉴定 | 第36页 |
| ·农杆菌介导的水稻(粳稻)成熟胚的转化 | 第36-38页 |
| ·预培养 | 第36-37页 |
| ·农杆菌侵染和共培养 | 第37页 |
| ·抗性愈伤的筛选和分化 | 第37-38页 |
| 3 实验结果与分析 | 第38-48页 |
| ·mutant37的表型观察鉴定 | 第38页 |
| ·mutant37的遗传分析 | 第38页 |
| ·mutant37叶鞘细胞学形态结构观察 | 第38-42页 |
| ·miR156d的基因定位 | 第42页 |
| ·miR156d的初定位 | 第42页 |
| ·miR156d的精细定位 | 第42页 |
| ·候选区段的基因预测和相关基因的表达分析 | 第42-47页 |
| ·MiR156d过表达载体以及转基因实验 | 第47-48页 |
| ·过表达载体 | 第47页 |
| ·过表达转基因实验 | 第47-48页 |
| 4 讨论与展望 | 第48-51页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·下一步工作展望 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 附录A 实验仪器 | 第58-59页 |
| 附录B 实验室常用试剂配方 | 第59-62页 |
| 附录C 英文缩略词表 | 第62-63页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-67页 |
| 承诺书 | 第67-68页 |
