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三聚氰胺酶联免疫分析方法的研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-8页
1 前言第8-24页
   ·研究背景第8页
   ·食品添加剂与非法添加物概述第8-9页
     ·非法添加物产生原因第8页
     ·非法添加物的危害第8-9页
     ·常用的检测方法第9页
   ·免疫分析方法概述第9-14页
     ·同位素免疫分析方法第9-10页
     ·非同位素免疫分析方法第10-12页
     ·ELISA的应用第12-14页
   ·三聚氰胺概述第14-22页
     ·三聚氰胺理化性质第14页
     ·三聚氰胺的合成第14-15页
     ·三聚氰胺的用途第15页
     ·三聚氰胺的非法添加第15页
     ·三聚氰胺毒性及限量标准第15-17页
     ·三聚氰胺的检测方法第17-22页
   ·论文研究的目的及意义第22-23页
   ·研究内容第23-24页
2 材料与方法第24-35页
   ·实验材料第24-26页
     ·主要药品与试剂第24-25页
     ·仪器与设备第25页
     ·待测样品第25-26页
     ·常用溶液的配制第26页
   ·实验方法第26-35页
     ·三聚氰胺半抗原的合成第26-27页
     ·免疫原的制备第27-28页
     ·包被原的制备第28页
     ·酶标抗原的制备第28页
     ·三聚氰胺多克隆抗体的制备第28-30页
     ·间接竞争酶联免疫检测方法的建立第30-31页
     ·直接竞争酶联免疫检测方法的建立第31-32页
     ·样品基质影响的消除第32页
     ·样品的添加回收实验第32-33页
     ·精密度第33页
     ·三聚氰胺直接竞争ELISA检测方法稳定性试验第33页
     ·液相色谱串联质谱方法验证ELISA方法第33-35页
3 结果与讨论第35-50页
   ·三聚氰胺半抗原的合成第35-36页
     ·中间产物6-氯甲基-1,3,5-三嗪-2,4-二氨基的鉴定第35页
     ·半抗原的鉴定第35-36页
   ·三聚氰胺抗体的制备第36-37页
     ·抗血清效价的测定第36-37页
     ·三聚氰胺抗体的纯化第37页
   ·间接竞争酶联免疫法检测法(icELISA)的建立第37-39页
     ·包被量的优化第37-38页
     ·抗体稀释倍数的优化第38页
     ·间接竞争ELISA方法标准曲线的绘制第38-39页
   ·直接竞争酶联免疫法检测法(dcELISA)的建立第39-48页
     ·抗体包被量和酶标抗原浓度的优化第39-40页
     ·封闭液的优化第40页
     ·缓冲液PBS的pH值对反应体系的影响第40-41页
     ·直接竞争ELISA方法标准曲线的绘制第41-42页
     ·交叉反应的测定第42页
     ·样品基质影响的消除第42-44页
     ·添加回收及样品检测限第44-46页
     ·精密度第46-47页
     ·温度对抗体及酶标抗原稳定性的影响第47-48页
   ·ELISA检测结果的仪器验证第48-50页
     ·液相色谱-质谱/质谱检测方法的建立第48-49页
     ·直接竞争ELISA法检测结果与液相色谱-质谱/质谱法相关性比较第49-50页
4 结论第50-51页
5 展望第51-52页
6 参考文献第52-58页
7 攻读硕士学位期间发表论文情况第58-59页
8 致谢第59页

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