摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
1 前言 | 第9-16页 |
·西瓜细菌性果斑病研究概况 | 第9-14页 |
·病原菌的生物学特征及分类地位 | 第10-11页 |
·病原检测研究进展 | 第11页 |
·致病机理研究进展 | 第11-13页 |
·遗传多样性研究 | 第13-14页 |
·本研究的目的意义 | 第14-16页 |
2 致病相关基因Aave-3192和Aave-2108的功能研究 | 第16-37页 |
·实验材料 | 第16-18页 |
·供试菌株和质粒 | 第16页 |
·供试西瓜、甜瓜和烟草品种 | 第16页 |
·培养基 | 第16-17页 |
·抗生素及工作浓度 | 第17页 |
·试剂 | 第17页 |
·主要仪器 | 第17页 |
·引物 | 第17-18页 |
·实验方法 | 第18-24页 |
·西瓜噬酸菌特异性和Tn5转座子插入突变的PCR验证 | 第18-19页 |
·突变株的生物学测定 | 第19-20页 |
·亚克隆定位Tn5插入位点 | 第20-21页 |
·互补菌株构建 | 第21-23页 |
·互补菌株的生物学测定 | 第23-24页 |
·结果和分析 | 第24-35页 |
·西瓜噬酸菌特异性和Tn5转座子插入突变验证 | 第24-25页 |
·突变株的生物学测定 | 第25-27页 |
·亚克隆子验证 | 第27页 |
·亚克隆测序分析转座子插入位点 | 第27-28页 |
·互补载体的构建 | 第28-30页 |
·互补菌株的获得 | 第30-31页 |
·互补菌株的生物学测定 | 第31-35页 |
·小结和讨论 | 第35-37页 |
3 西瓜噬酸菌菌毛特异基因的初探 | 第37-53页 |
·实验材料 | 第37-39页 |
·菌株和质粒 | 第37页 |
·试剂 | 第37页 |
·主要仪器 | 第37-38页 |
·引物 | 第38-39页 |
·实验方法 | 第39-43页 |
·菌株的培养 | 第39页 |
·西瓜噬酸菌基因组DNA及质粒的提取 | 第39页 |
·菌毛基因PCR扩增筛选 | 第39-40页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第40页 |
·构建自杀敲除载体 | 第40-42页 |
·基因的敲除及验证 | 第42页 |
·缺失菌株的生物学测定 | 第42-43页 |
·结果和分析 | 第43-51页 |
·菌毛特异性基因的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第43-44页 |
·敲除载体的获得 | 第44-47页 |
·基因缺失菌株的获得 | 第47-48页 |
·缺失突变株的生物学测定 | 第48-51页 |
·小结与讨论 | 第51-53页 |
4 结论与讨论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
附录Ⅰ 基因组DNA的提取步骤 | 第59页 |
附录Ⅱ 质粒DNA提取步骤 | 第59-60页 |
附录Ⅲ DNA回收纯化 | 第60页 |
附录Ⅳ 转化 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |