| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-53页 |
| ·环境响应性药物递送载体 | 第11-25页 |
| ·环境响应性药物递送载体的概念 | 第11-12页 |
| ·纳米材料作为药物递送载体的优势 | 第12-13页 |
| ·环境响应性药物递送载体的分类 | 第13-25页 |
| ·温度响应的药物递送载体 | 第13-14页 |
| ·pH响应的药物递送载体 | 第14-16页 |
| ·光响应的药物递送载体 | 第16-18页 |
| ·氧化还原电势响应的药物递送载体 | 第18-20页 |
| ·磁场响应的药物递送载体 | 第20-22页 |
| ·酶分子响应的药物递送载体 | 第22-23页 |
| ·其他刺激响应的药物递送载体 | 第23-24页 |
| ·双重响应及多重响应的药物递送载体 | 第24-25页 |
| ·生物智能元件—内含肽 | 第25-39页 |
| ·内含肽的定义 | 第25-26页 |
| ·内含肽的剪接机制 | 第26-29页 |
| ·N-O键重排 | 第27-28页 |
| ·转酯作用 | 第28页 |
| ·Asn环化 | 第28页 |
| ·O-N键重组 | 第28-29页 |
| ·内含肽的分类 | 第29-30页 |
| ·内含肽在的生物学上的应用 | 第30-39页 |
| ·蛋白质的表达及分离纯化 | 第30-34页 |
| ·环肽的人工制备 | 第34页 |
| ·基因功能的研究和药物靶点 | 第34-35页 |
| ·蛋白质相互作用研究 | 第35-36页 |
| ·内含肽介导的蛋白质连接技术 | 第36-39页 |
| ·其他用途 | 第39页 |
| ·蛋白质/多肽药物递送的研究现状 | 第39-40页 |
| ·蛋白质和纳米颗粒的相互作用 | 第40-52页 |
| ·蛋白质与纳米颗粒相互作用的影响因素 | 第40-45页 |
| ·纳米颗粒的性质 | 第41-43页 |
| ·蛋白质的性质 | 第43-44页 |
| ·溶液因素 | 第44-45页 |
| ·蛋白质和纳米颗粒相互作用的研究意义 | 第45-46页 |
| ·蛋白质和纳米颗粒相互作用的表征参数 | 第46页 |
| ·蛋白质和纳米颗粒相互作用的研究方法 | 第46-48页 |
| ·蛋白质在纳米颗粒表面取向的研究现状 | 第48-51页 |
| ·超电荷绿色荧光蛋白简介 | 第51-52页 |
| ·本研究的主要目标及研究内容 | 第52-53页 |
| 第2章 基于内含肽的环境响应纳米载体的构建 | 第53-87页 |
| ·材料与方法 | 第53-70页 |
| ·试验材料 | 第53-59页 |
| ·菌株和质粒 | 第53-55页 |
| ·主要仪器 | 第55-57页 |
| ·试剂与溶液配方 | 第57-59页 |
| ·方法 | 第59-70页 |
| ·表达载体pET32a-EGFPI及pET32a-mEGFPI的构建 | 第59-64页 |
| ·蛋白EGFPI及mEGFPI的表达和纯化 | 第64-65页 |
| ·温度和还原剂诱导的EGFPI蛋白的裂解反应 | 第65-67页 |
| ·金纳米颗粒的合成、修饰及表征 | 第67-68页 |
| ·货物蛋白在金纳米颗粒表面的装载 | 第68-69页 |
| ·内含肽介导的货物蛋白与载体的分离 | 第69-70页 |
| ·结果与分析 | 第70-85页 |
| ·表达载体pET32a-EGFPI和pET32a-mEGFPI的构建及验证 | 第70-72页 |
| ·融合蛋白EGFPI及mEGFPI的表达纯化 | 第72-73页 |
| ·EGFPI的裂解反应及产物鉴定 | 第73-76页 |
| ·金纳米颗粒的TEM表征 | 第76页 |
| ·金纳米颗粒吸收光谱测定 | 第76-77页 |
| ·载荷蛋白装载的琼脂糖凝胶电泳表征 | 第77-79页 |
| ·金-蛋白复合物的分离纯化 | 第79-80页 |
| ·货物装载效率计算 | 第80-81页 |
| ·货物释放的SDS-PAGE表征 | 第81-83页 |
| ·货物释放的荧光强度表征 | 第83-85页 |
| ·讨论与结论 | 第85-87页 |
| 第3章 金纳米颗粒表面蛋白质取向的研究 | 第87-101页 |
| ·材料和方法 | 第87-93页 |
| ·材料 | 第87-90页 |
| ·质粒与菌株 | 第87-90页 |
| ·主要仪器 | 第90页 |
| ·试剂与溶液配方 | 第90页 |
| ·方法 | 第90-93页 |
| ·表达载体的构建pET32a-MBPI，pET32a-GSTI，pET32a- (-30)EGFPI，pET32a-(+15)EGFPI | 第90-92页 |
| ·GSTI，MBPI，-30GFPI，+15GFPI蛋白的表达及纯化 | 第92页 |
| ·内含肽介导的融合蛋白的裂解反应 | 第92页 |
| ·蛋白质在金纳米颗粒表面的装载及释放 | 第92-93页 |
| ·结果与分析 | 第93-100页 |
| ·表达载体pET32a-MBPI，pET32a-GSTI，pET32a-(-30)EGFPI， pET32a-(+15)EGFPI的构建和验证 | 第93-96页 |
| ·融合蛋白MBPI，GSTI，-30GFPI，+15GFPI的表达纯化 | 第96页 |
| ·融合蛋白的裂解反应 | 第96-97页 |
| ·蛋白质在金纳米颗粒表面的取向分析 | 第97-100页 |
| ·讨论与结论 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-118页 |
| 附录 | 第118-125页 |
| 附录1 缩略词表 | 第118-119页 |
| 附录2 金纳米颗粒浓度计算表 | 第119-120页 |
| 附录3 金纳米颗粒粒径计算表 | 第120页 |
| 附录4 金纳米颗粒表面裂解产物的二级质谱图 | 第120-121页 |
| 附录5 融合蛋白序列 | 第121-123页 |
| 附录6 金纳米颗粒表面裂解产物的色谱分离图 | 第123-124页 |
| 附录7 金纳米颗粒的合成 | 第124-125页 |
| 作者简历 | 第125页 |
