| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-17页 |
| ·草鱼出血病研究进展 | 第10-11页 |
| ·鱼类先天性免疫与模式识别受体 | 第11-16页 |
| ·鱼类先天性免疫概述 | 第11-12页 |
| ·鱼类模式识别受体 | 第12-13页 |
| ·MDA5研究进展 | 第13-16页 |
| ·研究目的和意义 | 第16-17页 |
| 第二章 草鱼MDA5及其结构域表达质粒的构建和在CIK细胞中的表达 | 第17-27页 |
| ·材料与方法 | 第17-21页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·目的片段的扩增和回收 | 第17-19页 |
| ·表达质粒的构建和鉴定 | 第19-21页 |
| ·细胞培养和传代 | 第21页 |
| ·细胞转染和质粒表达检测 | 第21页 |
| ·结果与分析 | 第21-25页 |
| ·CiMDA5结构域分析 | 第21-22页 |
| ·目的片段的扩增 | 第22页 |
| ·CiMDA5及CiMDA5结构域表达质粒的构建和验证 | 第22-24页 |
| ·CiMDA5及CiMDA5结构域表达质粒在CIK细胞中的表达 | 第24-25页 |
| ·讨论 | 第25-26页 |
| ·小结 | 第26-27页 |
| 第三章 草鱼MDA5基因的免疫功能 | 第27-46页 |
| ·材料与方法 | 第27-30页 |
| ·实验材料和仪器 | 第27页 |
| ·细胞刺激 | 第27-28页 |
| ·96孔板染色实验和GCRV病毒滴度 | 第28页 |
| ·总RNA的提取和实时荧光定量PCR | 第28-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-42页 |
| ·CiMDA5及CiMDA5结构域的抗病毒作用 | 第30-32页 |
| ·GCRV刺激后CiIPS-1、CiIFN1、CiIL-1β 和CiMx1在转基因细胞中的表达 | 第32-35页 |
| ·poly(I:C)刺激后CiIPS-1、CiIFN1、CiIL-1β 和CiMx1在转基因细胞中的表达 | 第35-37页 |
| ·LPS刺激后CiIPS-1、CiIFN1、CiIL-1β 和CiMx1在转基因细胞中的表达 | 第37-40页 |
| ·PGN刺激后CiIPS-1、CiIFN1、CiIL-1β 和CiMx1在转基因细胞中的表达 | 第40-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| ·小结 | 第44-46页 |
| 第四章 草鱼IRF3/7 在MDA5通路中的作用机制 | 第46-56页 |
| ·材料与方法 | 第46-50页 |
| ·实验材料 | 第46页 |
| ·引物设计和载体构建 | 第46-47页 |
| ·细胞转染 | 第47页 |
| ·双荧光素酶报告实验 | 第47-48页 |
| ·CiIRF7多克隆抗体的制备 | 第48-49页 |
| ·免疫印迹和免疫沉淀实验 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-54页 |
| ·CiIRF7的原核表达和抗体制备 | 第50-51页 |
| ·GCRV感染，poly(I:C)刺激和过表达CiMDA5对CiIRF3/7 的影响 | 第51-52页 |
| ·GCRV感染或poly(I:C)刺激后过表达CiMDA5对CiIRF3/7 的影响 | 第52-54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 附录 | 第63-67页 |
| 缩略词 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简介 | 第70页 |
