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碳纳米管作为重组质粒pEGFP-vp5基因转运载体的研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 文献综述第12-21页
   ·草鱼出血病病原简介第12页
   ·草鱼出血病预防和控制第12-13页
   ·基因转运方法第13-14页
   ·碳纳米管载体简介第14-15页
     ·碳纳米管的制备方法第15页
   ·碳纳米管的细胞穿透机制第15-16页
     ·打孔式穿过胞膜第15页
     ·依赖能量的内吞作用第15-16页
     ·能量不依赖的非内吞作用第16页
     ·扩散作用第16页
   ·碳纳米管的功能化修饰第16-17页
     ·共价修饰第16-17页
     ·非共价修饰第17页
   ·功能化碳纳米管在生物医学方面的应用第17-19页
     ·作为药物分子载体的研究第17-18页
     ·协助多肽和蛋白质转运的研究第18页
     ·协助基因转运的研究第18-19页
   ·碳纳米管对水生生物的毒性研究第19页
   ·选题的目的和意义第19-21页
第二章 碳纳米管载重组质粒pEGFP-vp5转化大肠杆菌的研究第21-29页
   ·材料与方法第21-24页
     ·试验材料第21页
     ·主要试剂和仪器第21页
     ·草鱼呼肠孤病毒vp5基因的扩增第21-22页
     ·重组质粒pEGFP-vp5的构建及鉴定第22-23页
     ·功能化碳纳米管的修饰第23-24页
     ·碳纳米管载pEGFP-vp5转化系统的构建第24页
     ·碳纳米管对大肠杆菌的毒性评估第24页
     ·最优碳纳米管种类及配比的筛选第24页
   ·结果与分析第24-28页
     ·重组质粒pEGFP-vp5构建与鉴定第24-25页
     ·功能化碳纳米管的结构第25-26页
     ·最优碳纳米管修饰方式第26页
     ·S4与重组质粒pEGFP-vp5的最佳配比第26-27页
     ·重组质粒的合适用量第27-28页
   ·讨论第28页
   ·小结第28-29页
第三章 碳纳米管载重组质粒pEGFP-vp5转染草鱼肾细胞(CIK)的研究第29-36页
   ·材料与方法第29-31页
     ·试验细胞第29页
     ·主要试剂和仪器第29页
     ·多壁碳纳米管的氨基化修饰第29页
     ·重组质粒pEGFP-vp5的构建第29页
     ·MWCNTs-NH3+: pEGFP-vp5复合物的制备第29-30页
     ·凝胶电泳分析MWCNTs-NH3+:DNA的最佳配比第30页
     ·扫描电镜和透射电镜分析样品的制备第30页
     ·RT-PCR检测vp5在CIK细胞中的表达第30-31页
     ·统计分析第31页
   ·结果与分析第31-34页
     ·MWCNTs-NH3+: pEGFP-vp5复合物的琼脂糖凝胶电泳第31页
     ·扫描电镜和透射电镜分析第31-32页
     ·MWCNTs-NH3+递送质粒pEGFP-vp5进入细胞能力的评估第32-33页
     ·vp5基因在CIK细胞中的表达第33-34页
   ·讨论第34-35页
   ·小结第35-36页
第四章 碳纳米管载重组质粒pEGFP-vp5免疫草鱼的研究第36-53页
   ·材料与方法第36-40页
     ·试验病毒与动物第36页
     ·主要试剂和仪器第36-37页
     ·单壁碳纳米管的氨基化修饰第37页
     ·重组质粒pEGFP-vp5的构建第37页
     ·碳纳米管载pEGFP-vp5疫苗系统的构建第37页
     ·碳纳米管载疫苗毒性评估第37-38页
     ·碳纳米管载核酸疫苗免疫草鱼第38页
     ·肌肉组织中重组质粒检测第38页
     ·肌肉组织中重组质粒表达检测第38页
     ·免疫相关基因表达的测定第38-39页
     ·抗体效价测定第39页
     ·攻毒试验及病毒的检测第39-40页
     ·统计分析第40页
   ·结果与分析第40-50页
     ·毒性评估第40页
     ·肌肉组织内pEGFP-vp5的持久性第40-41页
     ·肌肉组织内vp5基因的表达第41-43页
     ·免疫相关基因的表达分析第43-44页
     ·疫苗的免疫保护第44-47页
     ·抗体效价测定第47-48页
     ·不同组织中病毒的检测第48-50页
   ·讨论第50-52页
   ·小结第52-53页
结论第53-54页
参考文献第54-60页
附录第60-63页
致谢第63-64页
作者简介第64页

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