摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-21页 |
·草鱼出血病病原简介 | 第12页 |
·草鱼出血病预防和控制 | 第12-13页 |
·基因转运方法 | 第13-14页 |
·碳纳米管载体简介 | 第14-15页 |
·碳纳米管的制备方法 | 第15页 |
·碳纳米管的细胞穿透机制 | 第15-16页 |
·打孔式穿过胞膜 | 第15页 |
·依赖能量的内吞作用 | 第15-16页 |
·能量不依赖的非内吞作用 | 第16页 |
·扩散作用 | 第16页 |
·碳纳米管的功能化修饰 | 第16-17页 |
·共价修饰 | 第16-17页 |
·非共价修饰 | 第17页 |
·功能化碳纳米管在生物医学方面的应用 | 第17-19页 |
·作为药物分子载体的研究 | 第17-18页 |
·协助多肽和蛋白质转运的研究 | 第18页 |
·协助基因转运的研究 | 第18-19页 |
·碳纳米管对水生生物的毒性研究 | 第19页 |
·选题的目的和意义 | 第19-21页 |
第二章 碳纳米管载重组质粒pEGFP-vp5转化大肠杆菌的研究 | 第21-29页 |
·材料与方法 | 第21-24页 |
·试验材料 | 第21页 |
·主要试剂和仪器 | 第21页 |
·草鱼呼肠孤病毒vp5基因的扩增 | 第21-22页 |
·重组质粒pEGFP-vp5的构建及鉴定 | 第22-23页 |
·功能化碳纳米管的修饰 | 第23-24页 |
·碳纳米管载pEGFP-vp5转化系统的构建 | 第24页 |
·碳纳米管对大肠杆菌的毒性评估 | 第24页 |
·最优碳纳米管种类及配比的筛选 | 第24页 |
·结果与分析 | 第24-28页 |
·重组质粒pEGFP-vp5构建与鉴定 | 第24-25页 |
·功能化碳纳米管的结构 | 第25-26页 |
·最优碳纳米管修饰方式 | 第26页 |
·S4与重组质粒pEGFP-vp5的最佳配比 | 第26-27页 |
·重组质粒的合适用量 | 第27-28页 |
·讨论 | 第28页 |
·小结 | 第28-29页 |
第三章 碳纳米管载重组质粒pEGFP-vp5转染草鱼肾细胞(CIK)的研究 | 第29-36页 |
·材料与方法 | 第29-31页 |
·试验细胞 | 第29页 |
·主要试剂和仪器 | 第29页 |
·多壁碳纳米管的氨基化修饰 | 第29页 |
·重组质粒pEGFP-vp5的构建 | 第29页 |
·MWCNTs-NH3+: pEGFP-vp5复合物的制备 | 第29-30页 |
·凝胶电泳分析MWCNTs-NH3+:DNA的最佳配比 | 第30页 |
·扫描电镜和透射电镜分析样品的制备 | 第30页 |
·RT-PCR检测vp5在CIK细胞中的表达 | 第30-31页 |
·统计分析 | 第31页 |
·结果与分析 | 第31-34页 |
·MWCNTs-NH3+: pEGFP-vp5复合物的琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
·扫描电镜和透射电镜分析 | 第31-32页 |
·MWCNTs-NH3+递送质粒pEGFP-vp5进入细胞能力的评估 | 第32-33页 |
·vp5基因在CIK细胞中的表达 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-35页 |
·小结 | 第35-36页 |
第四章 碳纳米管载重组质粒pEGFP-vp5免疫草鱼的研究 | 第36-53页 |
·材料与方法 | 第36-40页 |
·试验病毒与动物 | 第36页 |
·主要试剂和仪器 | 第36-37页 |
·单壁碳纳米管的氨基化修饰 | 第37页 |
·重组质粒pEGFP-vp5的构建 | 第37页 |
·碳纳米管载pEGFP-vp5疫苗系统的构建 | 第37页 |
·碳纳米管载疫苗毒性评估 | 第37-38页 |
·碳纳米管载核酸疫苗免疫草鱼 | 第38页 |
·肌肉组织中重组质粒检测 | 第38页 |
·肌肉组织中重组质粒表达检测 | 第38页 |
·免疫相关基因表达的测定 | 第38-39页 |
·抗体效价测定 | 第39页 |
·攻毒试验及病毒的检测 | 第39-40页 |
·统计分析 | 第40页 |
·结果与分析 | 第40-50页 |
·毒性评估 | 第40页 |
·肌肉组织内pEGFP-vp5的持久性 | 第40-41页 |
·肌肉组织内vp5基因的表达 | 第41-43页 |
·免疫相关基因的表达分析 | 第43-44页 |
·疫苗的免疫保护 | 第44-47页 |
·抗体效价测定 | 第47-48页 |
·不同组织中病毒的检测 | 第48-50页 |
·讨论 | 第50-52页 |
·小结 | 第52-53页 |
结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
附录 | 第60-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简介 | 第64页 |