| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1 DNA甲基化与癌症 | 第12-15页 |
| ·DNA甲基化 | 第12-13页 |
| ·DNA甲基化酶系统 | 第13页 |
| ·癌症中DNA甲基化的变化 | 第13-15页 |
| ·癌症中DNA甲基化酶系统的变化 | 第15页 |
| 2 miRNA与DNA甲基化酶系统 | 第15-17页 |
| ·miRNA | 第15-17页 |
| ·miRNA对DNA甲基化酶系统的调控 | 第17页 |
| 3 miR-145的研究进展 | 第17-21页 |
| ·miR-145的定位和调控 | 第17-18页 |
| ·miR-145与干细胞分化 | 第18-19页 |
| ·miR-145与癌症 | 第19-21页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第22-47页 |
| 1 实验材料 | 第22-30页 |
| ·细胞株 | 第22页 |
| ·质粒 | 第22页 |
| ·抗体 | 第22页 |
| ·细菌 | 第22页 |
| ·组织样本 | 第22-23页 |
| ·实验试剂和试剂盒 | 第23-25页 |
| ·实验仪器和耗材 | 第25-26页 |
| ·溶液配制 | 第26-27页 |
| ·引物序列 | 第27-30页 |
| 2 实验方法 | 第30-45页 |
| ·细胞培养 | 第30页 |
| ·细胞传代 | 第30-31页 |
| ·细胞复苏 | 第31页 |
| ·细胞冻存 | 第31-32页 |
| ·细胞转染 | 第32-33页 |
| ·稳定细胞系的构建 | 第33-34页 |
| ·质粒构建 | 第34-36页 |
| ·总RNA的抽提 | 第36页 |
| ·总DNA的抽提 | 第36页 |
| ·逆转录反应 | 第36-37页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第37页 |
| ·流式细胞仪分析细胞周期 | 第37-38页 |
| ·双荧光素酶报告基因实验 | 第38-39页 |
| ·蛋白免疫印迹(Western Blotting) | 第39-41页 |
| ·细胞增殖实验 | 第41-42页 |
| ·简化的有代表性的亚硫酸氢盐测序(RRBS) | 第42-44页 |
| ·亚硫酸氢盐扩增子测序(BSAS) | 第44-45页 |
| 3 数据分析 | 第45-47页 |
| ·实验用到的数据库 | 第45-46页 |
| ·实验用到的软件 | 第46页 |
| ·DNA甲基化水平的分析 | 第46-47页 |
| 第三章 实验结果 | 第47-65页 |
| 1 DNMTs和UHRF1在肿瘤细胞系和肺癌组织中的高表达 | 第47-50页 |
| 2 调控DNMTs/UHRF1的候选miRNA的筛选 | 第50-56页 |
| 3 miR-145在肿瘤细胞中对UHRF1和DNMT1的抑制 | 第56-59页 |
| 4 miR-145在肿瘤细胞中导致细胞周期停滞和DNA甲基化变化 | 第59-62页 |
| 5 miR-145本身受启动子区CpGi的DNA甲基化调控 | 第62-65页 |
| 第四章 讨论 | 第65-68页 |
| 攻读学位期间待发表论文 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
