| 摘要 | 第1-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 文献综述 | 第12-21页 |
| 1 黑色素细胞 | 第12-15页 |
| ·黑色素细胞概述 | 第12页 |
| ·黑色素细胞的发育和功能 | 第12-15页 |
| 2 色素沉着机制 | 第15-17页 |
| ·黑色素生成和黑素体 | 第16-17页 |
| ·黑素皮质素1受体 | 第17页 |
| 3 内皮素 | 第17-20页 |
| ·内皮素及其受体 | 第17-18页 |
| ·内皮素与黑色素细胞 | 第18-19页 |
| ·内皮素与黑色素瘤 | 第19-20页 |
| ·内皮素表达水平 | 第19页 |
| ·紫外线的影响 | 第19页 |
| ·肿瘤宿主之间的相互作用 | 第19-20页 |
| ·展望 | 第20页 |
| 4.本研究的意义和解决的问题 | 第20-21页 |
| 实验一 绵羊皮肤黑色素细胞的体外培养与鉴定 | 第21-30页 |
| 1 实验材料 | 第21-22页 |
| ·实验动物 | 第21页 |
| ·实验仪器 | 第21页 |
| ·实验试剂 | 第21-22页 |
| 2 实验方法 | 第22-26页 |
| ·绵羊皮肤黑色素细胞的原代培养 | 第22-23页 |
| ·绵羊皮肤黑色素细胞的传代培养 | 第23页 |
| ·绵羊黑色素细胞的冻存与复苏 | 第23页 |
| ·绵羊皮肤黑色素细胞生长率的测定 | 第23-24页 |
| ·绵羊皮肤黑色素细胞的生物学鉴定 | 第24-26页 |
| ·Dopa染色 | 第24页 |
| ·免疫细胞化学 | 第24页 |
| ·RT-PCR初步鉴定 | 第24-26页 |
| 3. 结果与分析 | 第26-30页 |
| ·绵羊皮肤黑色素细胞的形态学观察 | 第26-27页 |
| ·绵羊皮肤黑色素细胞生长率的测定 | 第27页 |
| ·绵羊皮肤黑色素细胞的生物学鉴定 | 第27-30页 |
| ·L-Dopa染色 | 第27-28页 |
| ·免疫组化 | 第28-29页 |
| ·绵羊皮肤黑色素细胞MITF和TYR基因的RT-PCR检测 | 第29-30页 |
| 实验二 EDN1对绵羊皮肤黑色素细胞的影响 | 第30-42页 |
| 1 实验材料 | 第30页 |
| ·实验动物 | 第30页 |
| ·实验仪器 | 第30页 |
| ·实验试剂 | 第30页 |
| 2 实验方法 | 第30-33页 |
| ·绵羊皮肤黑色素细胞的原代培养 | 第30页 |
| ·绵羊皮肤黑色素细胞的传代培养 | 第30页 |
| ·绵羊皮肤黑色素细胞的冻存与复苏 | 第30页 |
| ·绵羊皮肤黑色素细胞活力的测定 | 第30-31页 |
| ·黑色素含量的测定 | 第31页 |
| ·qRT-PCR检测 | 第31-33页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第31页 |
| ·cDNA的合成 | 第31页 |
| ·引物的设计 | 第31页 |
| ·qRT-PCR反应 | 第31-32页 |
| ·qRT-PCR体系的建立 | 第31-32页 |
| ·qRT-PCR扩增条件建立 | 第32页 |
| ·数据分析 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-42页 |
| ·EDN1对绵羊皮肤黑色素细胞形态学的影响 | 第33-34页 |
| ·EDN1对绵羊皮肤黑色素细胞增殖的影响 | 第34页 |
| ·EDN1对绵羊皮肤黑色素细胞黑色素含量的影响 | 第34-35页 |
| ·绵羊皮肤黑色素细胞内MITF、MC1R、TYR和EDNRB基因的表达变化 | 第35页 |
| ·绵羊皮肤黑色素细胞总RNA质量的鉴定 | 第35页 |
| ·实时荧光定量PCR结果分析 | 第35-37页 |
| ·EDN1对绵羊皮肤黑色素细胞内MITF、MC1R、TYR和EDNRB基因表达变化量的影响 | 第37-42页 |
| 讨论 | 第42-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| Abstract | 第50-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
