| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-20页 |
| ·细胞培养技术及应用 | 第8-9页 |
| ·动物细胞培养技术概述 | 第8页 |
| ·细胞培养技术在抗肿瘤研究中的应用 | 第8-9页 |
| ·乳腺癌概述 | 第9-11页 |
| ·乳腺癌发展及现状 | 第9-10页 |
| ·乳腺癌的发病机制及治疗 | 第10-11页 |
| ·多糖概述 | 第11-15页 |
| ·多糖的分类 | 第11-12页 |
| ·多糖的活性 | 第12-15页 |
| ·细胞凋亡概述 | 第15-17页 |
| ·细胞凋亡的特征 | 第15页 |
| ·细胞凋亡的作用机理及调控 | 第15-17页 |
| ·研究细胞凋亡应用于乳腺癌治疗的展望 | 第17页 |
| ·蛋白质组学在细胞凋亡研究中的应用 | 第17-19页 |
| ·蛋白质组学的概念 | 第17-18页 |
| ·蛋白质组学相关技术及在细胞调亡研究中的应用 | 第18-19页 |
| ·本课题的研究目的与意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-37页 |
| ·实验材料 | 第20-23页 |
| ·主要试剂及药品 | 第20-21页 |
| ·实验仪器与设备 | 第21-22页 |
| ·实验细胞及软骨多糖制备 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-37页 |
| ·MCF-7细胞系的维持 | 第23-24页 |
| ·MCF-7细胞滚瓶培养条件的研究 | 第24-26页 |
| ·MCF-7细胞与软骨多糖在滚瓶中共培养 | 第26页 |
| ·转瓶细胞观察台对MCF-7细胞形态的观察 | 第26页 |
| ·Hoechst33342/PI双染检测软骨多糖对滚瓶培养的MCF-7的凋亡作用 | 第26-27页 |
| ·Annexin V-FITC/PI染检测软骨多糖对滚瓶培养MCF-7的凋亡作用 | 第27页 |
| ·DNA Ladder法检测软骨多糖对滚瓶培养的MCF-7的凋亡作用 | 第27-28页 |
| ·流式细胞术分析软骨多糖对滚瓶培养的MCF-7细胞周期的影响 | 第28-29页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)比较MCF-7蛋白差异 | 第29-32页 |
| ·利用双向电泳结合MALDI-TOF分析MCF-7凋亡前后差异蛋白 | 第32-37页 |
| 3 结果与讨论 | 第37-52页 |
| ·MCF-7细胞的滚瓶培养条件 | 第37-41页 |
| ·转速范围 | 第37-38页 |
| ·培养时间 | 第38-39页 |
| ·培养液用量 | 第39页 |
| ·正交法优化培养条件 | 第39-41页 |
| ·转瓶细胞观察台观察软骨多糖对MCF-7的作用 | 第41-42页 |
| ·Hoechst33342/PI双染色检测MCF-7的凋亡作用 | 第42-43页 |
| ·Annexin V FITC-PI对MCF-7的凋亡检测结果 | 第43-44页 |
| ·凋亡细胞DNA的琼脂糖凝胶电泳检测结果 | 第44-45页 |
| ·流式细胞术测定MCF-7细胞周期结果 | 第45-46页 |
| ·SDS-PAGE分析MCF-7凋亡前后蛋白 | 第46页 |
| ·二维电泳结合MALDI-TOF-MS/MS分析结果 | 第46-52页 |
| ·二维电泳结果 | 第46-49页 |
| ·差异表达蛋白MADI-TOF-MS/MS质谱分析结果 | 第49-52页 |
| 4 结论 | 第52-53页 |
| 5 展望 | 第53-54页 |
| 6 参考文献 | 第54-61页 |
| 7 致谢 | 第61页 |
