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应用酵母单杂交技术筛选平菇漆酶poxc转录因子研究

致谢第1-8页
摘要第8-9页
1 文献综述第9-16页
   ·平菇漆酶第9-11页
     ·平菇漆酶酶学性质研究第9-10页
     ·平菇漆酶基因第10页
     ·平菇漆酶基因表达调控第10-11页
   ·启动子研究第11-16页
     ·启动子的结构特征第11-13页
     ·启动子的功能分析第13页
     ·真菌转录因子研究第13-16页
       ·转录因子数据库第13-14页
       ·转录因子的结构第14-16页
2 引言第16-17页
3 材料和方法第17-35页
   ·实验材料第17-21页
     ·菌株和载体第17页
     ·培养基第17-18页
     ·试剂第18页
     ·主要仪器设备第18页
     ·试验中主要溶液第18-20页
     ·引物第20-21页
   ·试验方法第21-35页
     ·半定量分析平菇漆酶 poxc 和 poxA1b 在平菇不同生长时期的表达量第23-24页
     ·诱饵质粒的构建第24-27页
     ·诱饵菌株的获得第27-28页
       ·感受态酵母细胞的制备第27-28页
       ·诱饵质粒转化感受态细胞第28页
     ·检测诱饵菌株的 AbA 最小抑菌浓度第28页
     ·构建 cDNA 文库第28-31页
     ·酵母单杂和筛选第31-32页
     ·转录因子与启动子区的相互作用的确定第32-33页
     ·原核表达验证转录因子开放阅读框的正确性第33-35页
       ·构建原核表达质粒第33-34页
       ·构建原核表达菌株及诱导表达第34页
       ·SDS-PAGE第34-35页
4 结果与分析第35-57页
   ·平菇漆酶基因 poxc 和 poxA1b 表达模式分析第35-37页
   ·酵母单杂交及筛选结果第37-44页
     ·目的片段的获得第37-38页
     ·诱饵质粒的验证第38-39页
     ·诱饵质粒转化酵母菌 Y1H第39-41页
     ·ds cDNA 文库构建第41-42页
     ·转化子的获得第42-44页
   ·生物信息学分析第44-53页
     ·开放阅读框第44-46页
     ·JGI Blast 结果第46页
     ·氨基酸序列第46-47页
     ·二级结构分析第47-49页
     ·信号肽分析第49页
     ·跨膜域分析第49-51页
     ·亚细胞定位预测第51页
     ·保守域及同源性分析第51-53页
   ·转录因子与 DNA 相互作用的确定第53-55页
     ·Demini 诱饵质粒的构建第53-54页
     ·Demini 诱饵菌株和杂交结果验证第54-55页
   ·原核表达结果第55-57页
5 结论与讨论第57-58页
参考文献第58-64页
ABSTRACT第64-65页

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