摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
主要符号表 | 第10-11页 |
第一章 绪论 | 第11-20页 |
·手足口病概述 | 第11页 |
·手足口病的主要病原体 | 第11页 |
·CVA16 的基因形态 | 第11-12页 |
·CVA16 的流行病学特征 | 第12-14页 |
·CVA 16 分子流行病学 | 第13-14页 |
·CVA 16 血清流行病学 | 第14页 |
·CVA 16 实验室诊断和病毒学监测 | 第14-16页 |
·病毒分离法 | 第15页 |
·病毒抗体检测法 | 第15-16页 |
·分子生物学的检测 | 第16-17页 |
·实时荧光定量 PCR( Real-time PCR) | 第16-17页 |
·逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) | 第17页 |
·基因芯片技术( Microarray) | 第17页 |
·CA16 的药物治疗及其局限性 | 第17页 |
·抗病毒药物的研究 | 第17页 |
·免疫球蛋白的研究 | 第17页 |
·CVA 16 的研究小结 | 第17-18页 |
·CVA 16 的预防 | 第18页 |
·项目意义 | 第18-20页 |
第二章 材料与方法 | 第20-53页 |
·材料 | 第20-36页 |
·受体菌 | 第20页 |
·主要试剂 | 第20-21页 |
·实验主要用液的配制 | 第21-35页 |
·主要仪器与设备 | 第35-36页 |
·方法 | 第36-53页 |
·CVA 16 VP1 抗原的克隆与鉴定 | 第36-43页 |
·重组抗原蛋白(VP1)的表达、纯化及鉴定 | 第43-50页 |
·捕获 ELISA 方法的建立 | 第50-53页 |
第三章 结果与分析 | 第53-60页 |
·VP1 基因片段的扩增和 pET-41a(+)/VP1 重组质粒的构建 | 第53-54页 |
·PCR 扩增 VP1 目的基因片段 | 第53页 |
·菌落 PCR 鉴定 | 第53-54页 |
·重组质粒 pET-41a(+)/VP1 的双酶切鉴定 | 第54页 |
·酶切产物的测序鉴定 | 第54页 |
·重组蛋白 VP1 的原核表达、纯化及鉴定 | 第54-58页 |
·重组蛋白 VP1 的诱导表达 | 第54-55页 |
·重组蛋白 VP1 的表达条件的优化 | 第55-56页 |
·重组蛋白 VP1 的的纯化 | 第56-57页 |
·重组蛋白 VP1 蛋白的 Western Blot 鉴定 | 第57页 |
·蛋白浓度的测定 | 第57-58页 |
·捕获法的初步建立 | 第58-60页 |
·阴阳血清筛选 | 第58页 |
·棋盘法确定包被浓度和酶结合物工作浓度 | 第58页 |
·交叉反应实验 | 第58页 |
·精密性试验 | 第58-60页 |
第四章 讨论 | 第60-63页 |
·VP1 基因的选取 | 第60页 |
·加入连接臂 | 第60-61页 |
·诱导条件的优化 | 第61页 |
·重组抗原纯化方法的选择 | 第61-62页 |
·ELISA 捕获法检测方法的建立 | 第62-63页 |
第五章 结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-70页 |
附录 | 第70-71页 |
致谢 | 第71-73页 |
个人信息 | 第73-74页 |
个人简历 | 第73-74页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第74页 |