摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-13页 |
引言 | 第13-18页 |
1.甲壳动物卵巢发育分期的研究 | 第14-16页 |
2.卵巢发育过程中,卵黄蛋白原 mRNA 的表达状况 | 第16-18页 |
第一章 日本囊对虾和克氏原螯虾卵巢组织学观察 | 第18-29页 |
1 材料和方法 | 第18-20页 |
·实验材料 | 第18-19页 |
·实验方法 | 第19-20页 |
·组织学切片的制作 | 第19-20页 |
·组织切片观察 | 第20页 |
2.卵巢组织学观察结果 | 第20-28页 |
·日本囊对虾卵巢组织学观察结果 | 第20-24页 |
·克氏原螯虾卵巢组织学观察结果 | 第24-28页 |
3 讨论 | 第28-29页 |
第二章 卵黄蛋白原 mRNA 表达的差异分析 | 第29-57页 |
1. 材料与方法 | 第29-39页 |
·实验材料 | 第29-30页 |
·实验用虾 | 第29页 |
·主要仪器 | 第29-30页 |
·实验方法 | 第30-39页 |
·总 RNA 提取 | 第30页 |
·甲醛变性胶电泳 | 第30-31页 |
·cDNA 的合成 | 第31页 |
·引物设计 | 第31-32页 |
·PCR 条件优化 | 第32-33页 |
·PCR 产物的纯化 | 第33页 |
·卵黄蛋白原 mRNA 表达的半定量分析 | 第33-34页 |
·卵黄蛋白原 mRNA 表达的相对定量分析 | 第34-39页 |
·实时荧光定量 PCR 特异性 | 第34-36页 |
·标准曲线的制作 | 第36-38页 |
·实时荧光定量 PCR 扩增 | 第38-39页 |
2. 结果 | 第39-57页 |
·RNA 纯度和完整性分析 | 第39-42页 |
·日本囊对虾总 RNA 纯度和完整性分析 | 第39-40页 |
·克氏原螯虾总 RNA 纯度和完整性分析 | 第40-42页 |
·产物序列保守性分析 | 第42-46页 |
·日本囊对虾卵黄蛋白原产物序列保守性分析 | 第42-44页 |
·克氏原螯虾卵黄蛋白原产物序列保守性分析 | 第44-46页 |
·卵黄蛋白原 mRNA 表达的半定量 RT-PCR 分析 | 第46-49页 |
·日本囊对虾卵黄蛋白原 mRNA 半定量 RT-PCR 分析结果 | 第46-48页 |
·克氏原螯虾卵黄蛋白原 mRNA 半定量 RT-PCR 分析结果 | 第48-49页 |
·卵黄蛋白原 mRNA 表达的相对定量分析 | 第49-57页 |
·卵巢发育不同时期,日本囊对虾卵黄蛋白原 mRNA 表达的相对定量分析 | 第49-53页 |
·日本囊对虾卵黄蛋白原 mRNA 的相对表达量 | 第49-51页 |
·日本囊对虾卵巢和肝胰腺在卵黄蛋白原合成中的贡献率 | 第51-53页 |
·卵巢发育不同时期,克氏原螯虾卵黄蛋白原 mRNA 表达的相对定量分析 | 第53-57页 |
·克氏原螯虾卵黄蛋白原 mRNA 的相对表达量 | 第53-55页 |
·克氏原螯虾卵巢和肝胰腺在卵黄蛋白原合成中的贡献率 | 第55-57页 |
第三章 卵黄蛋白原 mRNA 的 Northern 杂交分析 | 第57-73页 |
1.材料与方法 | 第57-63页 |
·实验材料 | 第57页 |
·实验动物 | 第57页 |
·主要仪器 | 第57页 |
·实验方法 | 第57-63页 |
·主要药品溶液及试剂的配制 | 第57-58页 |
·引物设计 | 第58页 |
·PCR | 第58-59页 |
·探针纯化及测序 | 第59页 |
·探针标记及标记效率检测 | 第59-61页 |
·主要药品和试剂配制 | 第59页 |
·探针的制备与标记 | 第59-60页 |
·探针效率检测 | 第60-61页 |
·总 RNA 样品处理 | 第61页 |
·转膜 | 第61-62页 |
·固定 | 第62页 |
·Northern 杂交 | 第62-63页 |
2.结果 | 第63-69页 |
·探针序列特异性分析 | 第63-64页 |
·日本囊对虾卵黄蛋白原探针序列特异性分析 | 第63-64页 |
·克氏原螯虾卵黄蛋白原探针序列特异性分析 | 第64页 |
·探针标记效率检测 | 第64-65页 |
·日本囊对虾卵黄蛋白原探针标记效率检测 | 第64-65页 |
·克氏原螯虾卵黄蛋白原探针标记效率检测 | 第65页 |
·卵黄蛋白原 mRNA Northern 杂交结果 | 第65-69页 |
·日本囊对虾卵黄蛋白原 mRNA Northern 杂交结果 | 第65-67页 |
·克氏原螯虾卵黄蛋白原 mRNA Northern 杂交结果 | 第67-69页 |
3.讨论 | 第69-73页 |
小结 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-78页 |
致谢 | 第78页 |