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日本囊对虾和克氏原螯虾卵黄蛋白原mRNA表达的定量研究

摘要第1-6页
Abstract第6-13页
引言第13-18页
 1.甲壳动物卵巢发育分期的研究第14-16页
 2.卵巢发育过程中,卵黄蛋白原 mRNA 的表达状况第16-18页
第一章 日本囊对虾和克氏原螯虾卵巢组织学观察第18-29页
 1 材料和方法第18-20页
   ·实验材料第18-19页
   ·实验方法第19-20页
     ·组织学切片的制作第19-20页
     ·组织切片观察第20页
 2.卵巢组织学观察结果第20-28页
   ·日本囊对虾卵巢组织学观察结果第20-24页
   ·克氏原螯虾卵巢组织学观察结果第24-28页
 3 讨论第28-29页
第二章 卵黄蛋白原 mRNA 表达的差异分析第29-57页
 1. 材料与方法第29-39页
   ·实验材料第29-30页
     ·实验用虾第29页
     ·主要仪器第29-30页
   ·实验方法第30-39页
     ·总 RNA 提取第30页
     ·甲醛变性胶电泳第30-31页
     ·cDNA 的合成第31页
     ·引物设计第31-32页
     ·PCR 条件优化第32-33页
     ·PCR 产物的纯化第33页
     ·卵黄蛋白原 mRNA 表达的半定量分析第33-34页
     ·卵黄蛋白原 mRNA 表达的相对定量分析第34-39页
       ·实时荧光定量 PCR 特异性第34-36页
       ·标准曲线的制作第36-38页
       ·实时荧光定量 PCR 扩增第38-39页
 2. 结果第39-57页
   ·RNA 纯度和完整性分析第39-42页
     ·日本囊对虾总 RNA 纯度和完整性分析第39-40页
     ·克氏原螯虾总 RNA 纯度和完整性分析第40-42页
   ·产物序列保守性分析第42-46页
     ·日本囊对虾卵黄蛋白原产物序列保守性分析第42-44页
     ·克氏原螯虾卵黄蛋白原产物序列保守性分析第44-46页
   ·卵黄蛋白原 mRNA 表达的半定量 RT-PCR 分析第46-49页
     ·日本囊对虾卵黄蛋白原 mRNA 半定量 RT-PCR 分析结果第46-48页
     ·克氏原螯虾卵黄蛋白原 mRNA 半定量 RT-PCR 分析结果第48-49页
   ·卵黄蛋白原 mRNA 表达的相对定量分析第49-57页
     ·卵巢发育不同时期,日本囊对虾卵黄蛋白原 mRNA 表达的相对定量分析第49-53页
       ·日本囊对虾卵黄蛋白原 mRNA 的相对表达量第49-51页
       ·日本囊对虾卵巢和肝胰腺在卵黄蛋白原合成中的贡献率第51-53页
     ·卵巢发育不同时期,克氏原螯虾卵黄蛋白原 mRNA 表达的相对定量分析第53-57页
       ·克氏原螯虾卵黄蛋白原 mRNA 的相对表达量第53-55页
       ·克氏原螯虾卵巢和肝胰腺在卵黄蛋白原合成中的贡献率第55-57页
第三章 卵黄蛋白原 mRNA 的 Northern 杂交分析第57-73页
 1.材料与方法第57-63页
   ·实验材料第57页
     ·实验动物第57页
     ·主要仪器第57页
   ·实验方法第57-63页
     ·主要药品溶液及试剂的配制第57-58页
     ·引物设计第58页
     ·PCR第58-59页
     ·探针纯化及测序第59页
     ·探针标记及标记效率检测第59-61页
       ·主要药品和试剂配制第59页
       ·探针的制备与标记第59-60页
       ·探针效率检测第60-61页
     ·总 RNA 样品处理第61页
     ·转膜第61-62页
     ·固定第62页
     ·Northern 杂交第62-63页
 2.结果第63-69页
   ·探针序列特异性分析第63-64页
     ·日本囊对虾卵黄蛋白原探针序列特异性分析第63-64页
     ·克氏原螯虾卵黄蛋白原探针序列特异性分析第64页
   ·探针标记效率检测第64-65页
     ·日本囊对虾卵黄蛋白原探针标记效率检测第64-65页
     ·克氏原螯虾卵黄蛋白原探针标记效率检测第65页
   ·卵黄蛋白原 mRNA Northern 杂交结果第65-69页
     ·日本囊对虾卵黄蛋白原 mRNA Northern 杂交结果第65-67页
     ·克氏原螯虾卵黄蛋白原 mRNA Northern 杂交结果第67-69页
 3.讨论第69-73页
小结第73-74页
参考文献第74-78页
致谢第78页

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