| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-26页 |
| 第一节 抗原受体激活对淋巴细胞的调节 | 第12-15页 |
| ·淋巴细胞的重要功能及CBM复合物的发现 | 第12-13页 |
| ·NF-κB的简介 | 第13-15页 |
| 第二节 CBM复合物的研究现状 | 第15-26页 |
| ·CBM复合物的简介 | 第15-21页 |
| ·CARMA1功能的调节 | 第21-24页 |
| ·CBM复合物与肿瘤的关系 | 第24-26页 |
| 第二章 材料和方法 | 第26-55页 |
| 第一节 实验材料 | 第26-33页 |
| ·研究对象 | 第26页 |
| ·所用载体 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌菌株及细胞系 | 第27页 |
| ·试剂、工具及耗材 | 第27-29页 |
| ·主要实验仪器 | 第29-30页 |
| ·主要溶液的配制 | 第30-33页 |
| 第二节 试验方法 | 第33-55页 |
| ·感受态细胞制备 | 第33页 |
| ·基因克隆 | 第33-39页 |
| ·目的蛋白的表达与纯化 | 第39-44页 |
| ·蛋白质甲基化实验 | 第44页 |
| ·蛋白质晶体生长 | 第44-47页 |
| ·晶体衍射数据的收集及处理 | 第47-48页 |
| ·晶体结构解析 | 第48-51页 |
| ·细胞功能实验 | 第51-55页 |
| 第三章 CARMA1蛋白N端的表达纯化及晶体筛选 | 第55-77页 |
| 第一节 CARMA1的生物信息学分析 | 第55-56页 |
| 第二节 鼠源CARMA1蛋白N端的表达纯化尝试 | 第56-63页 |
| ·分子克隆及CARMA1蛋白整个N端的表达 | 第56-57页 |
| ·CARMA1蛋白CARD-CC结构域的表达尝试 | 第57-63页 |
| 第三节 CARMA1 CARD结构域的表达纯化及晶体筛选 | 第63-70页 |
| ·CARMA1 CARD结构域的表达纯化 | 第63-67页 |
| ·CARMA1-CARD晶体的初步筛选 | 第67-68页 |
| ·CARMA1-CARD晶体生长条件的优化 | 第68-69页 |
| ·CARMA1-CARD晶体防冻剂选择及衍射能力初步测试 | 第69页 |
| ·CARMA1-CARD硒代衍生物的表达纯化及晶体生长 | 第69-70页 |
| 第四节 CARMA1 CARD的X射线衍射数据收集和结构解析 | 第70-77页 |
| ·数据收集 | 第70-71页 |
| ·结构解析 | 第71-77页 |
| 第四章 BCL10、MALT1及复合物的表达纯化尝试 | 第77-89页 |
| 第一节 BCL10的基本信息预测 | 第77-78页 |
| 第二节 BCL10及MALT1的表达纯化尝试 | 第78-89页 |
| ·BCL10全长蛋白的表达 | 第79页 |
| ·BCL10-CARD结构域的表达纯化 | 第79-81页 |
| ·BCL10-CARD和CARMA1-CARD的共表达尝试 | 第81-85页 |
| ·BCL10-CARD和MALT1的共表达尝试 | 第85-86页 |
| ·斑马鱼来源的BCL10 CARD结构域的表达纯化 | 第86页 |
| ·鼠源BCL1 0-CARD蛋白的变复性纯化 | 第86-89页 |
| 第五章 CARMA1和BCL10相互作用的研究及功能探索 | 第89-99页 |
| 第一节 CARMA1-CARD的整体结构分析 | 第89-91页 |
| 第二节 CARMA1-CARD的表面静电电势分析 | 第91-92页 |
| 第三节 CARMA1-CARD和BCL10-CARD相互作用的分析 | 第92-95页 |
| ·BCL10-CARD的同源建模及表面电势分析 | 第92-94页 |
| ·Protein docking方法在CARMA1-CARD和BCL10-CARD相互作用研究中的应用 | 第94-95页 |
| 第四节 CARMA1-CARD和BCL10-CARD相互作用的验证及功能实验 | 第95-99页 |
| ·真核表达载体的构建及功能位点突变体的设计 | 第95页 |
| ·免疫共沉淀实验 | 第95-97页 |
| ·双荧光素酶报告基因实验(luciferase Assay)检测NF-κB的活化 | 第97-99页 |
| 第六章 结果讨论 | 第99-101页 |
| 第七章 CRAC通道调节蛋白CRACR2A的研究 | 第101-122页 |
| 第一节 引言 | 第101-105页 |
| ·钙库调节的钙离子内流(Store-operated Ca2+ entry,SOCE) | 第101页 |
| ·STIM1和Orail分子的简介 | 第101-104页 |
| ·CRACR2A的发现及研究现状 | 第104-105页 |
| 第二节 CRACR2A的克隆、表达纯化及结晶筛选 | 第105-122页 |
| ·CRACR2A的基本生物学信息 | 第105-107页 |
| ·基因克隆及载体构建 | 第107-108页 |
| ·人源CRACR2A蛋白的研究 | 第108-120页 |
| ·其他种属CRACR2A蛋白的晶体学研究 | 第120-121页 |
| ·结论 | 第121-122页 |
| 参考文献 | 第122-130页 |
| 致谢 | 第130-131页 |
| 个人简历 | 第131页 |
