| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 1. 绪论 | 第13-23页 |
| ·蔗糖磷酸化酶的概述 | 第13-15页 |
| ·酶的固定化研究进展 | 第15-20页 |
| ·酶的固定化方法 | 第15-16页 |
| ·载体结合法 | 第16页 |
| ·包埋法 | 第16-17页 |
| ·膜截留法 | 第17页 |
| ·无载体交联 | 第17-20页 |
| ·壳聚糖在酶固定化中的应用 | 第20-22页 |
| ·本文的研究内容及意义 | 第22-23页 |
| 2. 蔗糖磷酸化酶的克隆表达 | 第23-48页 |
| ·引言 | 第23页 |
| ·材料与设备 | 第23-25页 |
| ·菌株与质粒 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·主要实验试剂 | 第24页 |
| ·主要实验仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-36页 |
| ·长双歧杆菌的穿刺培养 | 第25页 |
| ·引物的设计 | 第25-26页 |
| ·PCR获得目的基因 | 第26-27页 |
| ·重组质粒pMD19-BLSpase的构建 | 第27-29页 |
| ·重组质粒pET21a-BLSpase的构建 | 第29-31页 |
| ·基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pET21a-BLSpase的构建 | 第31-32页 |
| ·重组蔗糖磷酸化酶的异源表达和分离纯化 | 第32-33页 |
| ·重组蔗糖磷酸化酶的酶学性质表征 | 第33-36页 |
| ·实验结果与讨论 | 第36-46页 |
| ·长双歧杆菌Spase基因的PCR扩增 | 第36-37页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第37-38页 |
| ·BLSpase基因测序分析 | 第38-40页 |
| ·基因工程菌的构建 | 第40-42页 |
| ·重组蔗糖磷酸化酶的异源表达和分离纯化 | 第42-43页 |
| ·重组蔗糖磷酸化酶的酶学性质表征 | 第43-46页 |
| ·结论 | 第46-48页 |
| 3. 戊二醛交联制备Spase交联聚集体 | 第48-59页 |
| ·引言 | 第48页 |
| ·材料与方法 | 第48-50页 |
| ·主要实验试剂与仪器 | 第48页 |
| ·BSA与BLSpase共交联聚集体的制备 | 第48-49页 |
| ·BSA与BLSpase共交联聚集体的分析方法 | 第49页 |
| ·BSA与BLSpase共交联聚集体酶学性质研究 | 第49-50页 |
| ·结果与讨论 | 第50-57页 |
| ·戊二醛交联制备Spase交联聚集体条件的优化 | 第50-54页 |
| ·BSA-BLSpase-CLEAs的酶学性质 | 第54-57页 |
| ·结论 | 第57-59页 |
| 4. 壳聚糖固定化Spase的研究 | 第59-70页 |
| ·引言 | 第59页 |
| ·材料与方法 | 第59-61页 |
| ·主要实验试剂与仪器 | 第59-60页 |
| ·壳聚糖微球的制备 | 第60页 |
| ·交联剂活化壳聚糖载体 | 第60页 |
| ·蔗糖磷酸化酶在活化壳聚糖微球载体上的固定化 | 第60页 |
| ·固定化酶的分析方法 | 第60-61页 |
| ·固定化酶基本性质的测定 | 第61页 |
| ·结果与讨论 | 第61-69页 |
| ·壳聚糖浓度对微球制备的影响 | 第62页 |
| ·交联剂制备活化载体条件优化 | 第62-63页 |
| ·BLSpase的固定化过程 | 第63-65页 |
| ·固定化酶的酶学性质 | 第65-69页 |
| ·结论 | 第69-70页 |
| 5. 结论与展望 | 第70-73页 |
| ·结论 | 第70-71页 |
| ·创新 | 第71页 |
| ·展望 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-80页 |
| 附录 作者简介 | 第80页 |