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水稻杂种育性基因f5的克隆及高通量分子标记技术的开发与应用

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
缩略词表第13-14页
第一章 水稻杂种育性基因f5的克隆第14-78页
 1 前言第14-28页
   ·研究问题的由来第14-15页
   ·水稻杂种不育的细胞学研究第15-18页
   ·水稻杂种不育的遗传机理研究第18-21页
   ·水稻杂种不育的分子机理和进化研究第21-25页
   ·水稻籼粳亚种间育性基因f5克隆研究进展第25-28页
   ·研究的目的与意义第28页
 2 材料和方法第28-43页
   ·材料第28-30页
     ·水稻材料第28-29页
     ·BAC文库第29页
     ·全长cDNA第29-30页
   ·基因组DNA样品抽提第30-32页
     ·群体基因组DNA快速抽提第30-31页
     ·基因组DNA大样法抽提第31页
     ·小样法抽提大样基因组DNA第31-32页
   ·PCR产物测序第32-33页
     ·目标片段的PCR扩增第32页
     ·PCR产物消化第32-33页
     ·测序第33页
   ·BAC鸟枪法测序第33-36页
     ·细菌培养和BAC大量抽提第33-34页
     ·Shotgun亚克隆文库构建第34-35页
     ·抽质粒测序第35-36页
     ·序列拼接第36页
   ·SSR标记分析第36-38页
     ·SSR标记的PCR扩增第36页
     ·制备PAGE胶第36-37页
     ·PAGE电泳第37页
     ·银染显影第37-38页
   ·InDel标记分析第38页
   ·CAPS标记分析第38-41页
   ·基因表达分析第41-42页
     ·水稻材料和组织第41页
     ·实验步骤第41-42页
   ·性状考察第42-43页
     ·花粉育性考察第42页
     ·小穗育性考察第42-43页
 3 结果与分析第43-74页
   ·水稻亚种间不完全双列杂交育性关联分析第43-46页
     ·试验设计第43-44页
     ·花粉育性和小穗育性分析第44-45页
     ·已知基因的关联分析第45-46页
   ·f5遗传分析第46-49页
     ·三交群体第46-47页
     ·籼粳F2群体第47页
     ·近等基因系第47-49页
   ·f5区域的比较测序第49-53页
     ·f5区域的重复序列及拷贝数分析第49-51页
     ·候选基因ORF1的序列分析第51-52页
     ·候选基因ORF2的序列分析第52-53页
   ·f5候选基因ORF1和ORF2的比较表达分析第53-59页
     ·ORF1和ORF2在不同品种中的总体表达情况第53-55页
     ·籼稻和粳稻ORF2全长cDNA第55-57页
     ·ORF2籼粳等位基因在杂种中的表达差异第57-59页
   ·f5基因的定位第59-68页
     ·NIL ZS97(f5-Du/f5-ZS)群体定位第59-65页
     ·NIL Balilla(f5-NJ/f5-Ba)群体定位第65-68页
   ·Balilla/Nanjing11 F2群体育性和偏分离位点的全基因组分析第68-74页
     ·利用InDel标记构建全基因组遗传连锁图第68-71页
     ·偏分离位点分析第71-72页
     ·杂种育性QTL分析以及和偏分离位点的关系第72-74页
 4 总结与讨论第74-78页
   ·与他人研究结果的比较第74-76页
   ·f5基因克隆的思考第76-78页
第二章 高通量分子标记技术的开发和应用第78-124页
 1 前言第78-95页
   ·研究问题的由来及研究的目的和意义第78-79页
   ·传统的分子标记技术第79-83页
     ·RFLP标记第79-80页
     ·PCR标记第80-82页
     ·SNP标记第82-83页
   ·基于基因芯片技术的高通量分子标记技术第83-90页
     ·SNP芯片第83-86页
     ·SFP标记第86-88页
     ·DArT技术第88-89页
     ·RAD标记第89-90页
   ·基于测序技术的高通量分子标记技术第90-95页
     ·SNP测序第91-93页
     ·RAD标签测序第93-95页
 2 材料与方法第95-101页
   ·实验材料第95页
   ·实验方法第95-97页
     ·芯片样品发芽实验第95-96页
     ·RNA抽提和芯片杂交第96页
     ·PCR分子标记开发第96页
     ·表型考察第96-97页
     ·RIL群体测序第97页
   ·计算方法第97-101页
     ·SFP的鉴定和连锁图的构建第97-99页
     ·基于群体测序的SNP鉴定和高密度连锁图的构建第99-100页
     ·表型QTL扫描第100-101页
 3 结果与分析第101-119页
   ·SFP鉴定和连锁图的构建第101-104页
   ·亲本珍汕97和明恢63材料鉴定第104-107页
   ·基于群体测序的SNP基因分型和RIL群体材料鉴定第107-111页
   ·SNP高密度遗传连锁图的构建第111-113页
   ·高密度SNP连锁图的质量评价第113-115页
   ·产量相关性状的QTL分析第115-119页
 4 讨论第119-123页
   ·基于表达谱芯片的SFP鉴定和RIL群体基因分型第119-120页
   ·基于群体测序的SNP基因分型的优势第120-122页
   ·影响QTL定位的因素第122-123页
 5 总结与展望第123-124页
参考文献第124-140页
附录第140-153页
 附录Ⅰ 附表第140-149页
 附录Ⅱ SFP鉴定SFPdet程序代码第149-151页
 附录Ⅲ 作者简介第151-153页
致谢第153页

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