摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
主要符号表 | 第12-13页 |
第1章 引言 | 第13-23页 |
·SAM 的概述 | 第13-14页 |
·SAM 的生物学功能 | 第14-15页 |
·转甲基作用 | 第14页 |
·转硫作用 | 第14-15页 |
·转氨丙基作用 | 第15页 |
·SAM 的临床研究 | 第15-16页 |
·SAM 在治疗肝病中的作用 | 第15页 |
·SAM 在治疗抑郁症中的作用 | 第15-16页 |
·SAM 在治疗骨关节炎中的作用 | 第16页 |
·SAM 在治疗其他疾病中的作用 | 第16页 |
·SAM 的制备方法 | 第16-19页 |
·化学合成法 | 第16页 |
·酶促转化法 | 第16-17页 |
·微生物发酵法 | 第17-19页 |
·大肠杆菌与酿酒酵母偶联构建 ATP 再生系统 | 第19页 |
·SAM 的分离纯化 | 第19-21页 |
·SAM 的稳定化 | 第21页 |
·研究目的及内容 | 第21-23页 |
·研究目的及意义 | 第21页 |
·主要研究内容 | 第21-23页 |
第2章 重组大肠杆菌 BL21(pET-28a-SAMS)的构建 | 第23-38页 |
·材料 | 第23-26页 |
·菌株及载体 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23页 |
·主要仪器 | 第23-24页 |
·实验所需溶液及其配制 | 第24-25页 |
·实验所需培养基配制 | 第25-26页 |
·方法 | 第26-32页 |
·引物设计 | 第26页 |
·毕赤酵母基因组 DNA 的提取 | 第26页 |
·S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因(SAMS)的扩增 | 第26-27页 |
·S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因(SAMS)的 T 克隆及测序 | 第27-28页 |
·重组表达质粒 pET-28a-SAMS 的构建 | 第28-29页 |
·重组大肠杆菌 BL21(pET-28a-SAMS)的构建 | 第29-32页 |
·结果与分析 | 第32-37页 |
·S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因(SAMS)的扩增 | 第32-33页 |
·S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因(SAMS)的 T 克隆及测序 | 第33-34页 |
·重组表达载体 pET-28a-SAMS 的构建 | 第34-36页 |
·重组大肠杆菌 BL21(pET-28a-SAMS)的构建 | 第36-37页 |
·本章小结 | 第37-38页 |
第3章 大肠杆菌发酵法制备 SAM | 第38-47页 |
·材料 | 第38-39页 |
·菌种 | 第38页 |
·主要试剂 | 第38页 |
·主要仪器 | 第38-39页 |
·实验所需溶液及其配制 | 第39页 |
·方法 | 第39-41页 |
·大肠杆菌发酵法制备 SAM | 第39页 |
·HPLC 法测定 SAM | 第39页 |
·SAM 在大肠杆菌中合成条件的优化 | 第39-41页 |
·结果与分析 | 第41-46页 |
·HPLC 法测定 SAM 的标准曲线 | 第41-42页 |
·HPLC 法测定大肠杆菌中合成的 SAM | 第42-43页 |
·SAM 在大肠杆菌中合成条件的优化 | 第43-46页 |
·本章小结 | 第46-47页 |
第4章 重组大肠杆菌 BL21(pET-28a-SAMS)与酿酒酵母偶联合成 SAM | 第47-57页 |
·材料 | 第47-48页 |
·菌种 | 第47页 |
·主要试剂 | 第47页 |
·主要仪器 | 第47-48页 |
·方法 | 第48-49页 |
·大肠杆菌 BL21(pET-28a-SAMS)培养方法 | 第48-49页 |
·酿酒酵母 JM-310 培养方法 | 第49页 |
·外加 ATP 对 SAM 合成的影响 | 第49页 |
·大肠杆菌 BL21(pET-28a-SAMS)与酿酒酵母偶联合成 SAM 的条件优化 | 第49页 |
·结果与分析 | 第49-55页 |
·外加 ATP 对 SAM 合成的影响 | 第49-50页 |
·大肠杆菌 BL21(pET-28a-SAMS)与酿酒酵母细胞量的配比对 SAM 合成的影响 | 第50页 |
·培养时间对大肠杆菌与酿酒酵母偶联产生 SAM 的影响 | 第50-51页 |
·培养温度对大肠杆菌与酿酒酵母偶联产生 SAM 的影响 | 第51页 |
·细胞通透性处理对 SAM 合成的影响 | 第51-52页 |
·偶联反应液中主要物质浓度的优化 | 第52-54页 |
·最佳条件下偶联反应与对照组的比较 | 第54-55页 |
·本章小结 | 第55-57页 |
第5章 SAM 的初步分离纯化及其稳定化 | 第57-65页 |
·材料 | 第57-58页 |
·主要试剂 | 第57页 |
·主要仪器 | 第57-58页 |
·实验所需溶液及其配制 | 第58页 |
·方法 | 第58-60页 |
·SAM 的分离纯化方法 | 第58-59页 |
·液质联用鉴定 SAM | 第59页 |
·SAM 的稳定化 | 第59-60页 |
·结果与分析 | 第60-64页 |
·SAM 的分离纯化 | 第60-61页 |
·SAM 的液质联用鉴定 | 第61-62页 |
·SAM 的稳定化 | 第62-64页 |
·本章小结 | 第64-65页 |
第6章 结论和展望 | 第65-67页 |
·结论 | 第65-66页 |
·展望 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-73页 |
在学期间发表的学术论文 | 第73页 |