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S-腺苷甲硫氨酸(SAM)在大肠杆菌中的合成

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
主要符号表第12-13页
第1章 引言第13-23页
   ·SAM 的概述第13-14页
   ·SAM 的生物学功能第14-15页
     ·转甲基作用第14页
     ·转硫作用第14-15页
     ·转氨丙基作用第15页
   ·SAM 的临床研究第15-16页
     ·SAM 在治疗肝病中的作用第15页
     ·SAM 在治疗抑郁症中的作用第15-16页
     ·SAM 在治疗骨关节炎中的作用第16页
     ·SAM 在治疗其他疾病中的作用第16页
   ·SAM 的制备方法第16-19页
     ·化学合成法第16页
     ·酶促转化法第16-17页
     ·微生物发酵法第17-19页
   ·大肠杆菌与酿酒酵母偶联构建 ATP 再生系统第19页
   ·SAM 的分离纯化第19-21页
   ·SAM 的稳定化第21页
   ·研究目的及内容第21-23页
     ·研究目的及意义第21页
     ·主要研究内容第21-23页
第2章 重组大肠杆菌 BL21(pET-28a-SAMS)的构建第23-38页
   ·材料第23-26页
     ·菌株及载体第23页
     ·主要试剂第23页
     ·主要仪器第23-24页
     ·实验所需溶液及其配制第24-25页
     ·实验所需培养基配制第25-26页
   ·方法第26-32页
     ·引物设计第26页
     ·毕赤酵母基因组 DNA 的提取第26页
     ·S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因(SAMS)的扩增第26-27页
     ·S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因(SAMS)的 T 克隆及测序第27-28页
     ·重组表达质粒 pET-28a-SAMS 的构建第28-29页
     ·重组大肠杆菌 BL21(pET-28a-SAMS)的构建第29-32页
   ·结果与分析第32-37页
     ·S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因(SAMS)的扩增第32-33页
     ·S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因(SAMS)的 T 克隆及测序第33-34页
     ·重组表达载体 pET-28a-SAMS 的构建第34-36页
     ·重组大肠杆菌 BL21(pET-28a-SAMS)的构建第36-37页
   ·本章小结第37-38页
第3章 大肠杆菌发酵法制备 SAM第38-47页
   ·材料第38-39页
     ·菌种第38页
     ·主要试剂第38页
     ·主要仪器第38-39页
     ·实验所需溶液及其配制第39页
   ·方法第39-41页
     ·大肠杆菌发酵法制备 SAM第39页
     ·HPLC 法测定 SAM第39页
     ·SAM 在大肠杆菌中合成条件的优化第39-41页
   ·结果与分析第41-46页
     ·HPLC 法测定 SAM 的标准曲线第41-42页
     ·HPLC 法测定大肠杆菌中合成的 SAM第42-43页
     ·SAM 在大肠杆菌中合成条件的优化第43-46页
   ·本章小结第46-47页
第4章 重组大肠杆菌 BL21(pET-28a-SAMS)与酿酒酵母偶联合成 SAM第47-57页
   ·材料第47-48页
     ·菌种第47页
     ·主要试剂第47页
     ·主要仪器第47-48页
   ·方法第48-49页
     ·大肠杆菌 BL21(pET-28a-SAMS)培养方法第48-49页
     ·酿酒酵母 JM-310 培养方法第49页
     ·外加 ATP 对 SAM 合成的影响第49页
     ·大肠杆菌 BL21(pET-28a-SAMS)与酿酒酵母偶联合成 SAM 的条件优化第49页
   ·结果与分析第49-55页
     ·外加 ATP 对 SAM 合成的影响第49-50页
     ·大肠杆菌 BL21(pET-28a-SAMS)与酿酒酵母细胞量的配比对 SAM 合成的影响第50页
     ·培养时间对大肠杆菌与酿酒酵母偶联产生 SAM 的影响第50-51页
     ·培养温度对大肠杆菌与酿酒酵母偶联产生 SAM 的影响第51页
     ·细胞通透性处理对 SAM 合成的影响第51-52页
     ·偶联反应液中主要物质浓度的优化第52-54页
     ·最佳条件下偶联反应与对照组的比较第54-55页
   ·本章小结第55-57页
第5章 SAM 的初步分离纯化及其稳定化第57-65页
   ·材料第57-58页
     ·主要试剂第57页
     ·主要仪器第57-58页
     ·实验所需溶液及其配制第58页
   ·方法第58-60页
     ·SAM 的分离纯化方法第58-59页
     ·液质联用鉴定 SAM第59页
     ·SAM 的稳定化第59-60页
   ·结果与分析第60-64页
     ·SAM 的分离纯化第60-61页
     ·SAM 的液质联用鉴定第61-62页
     ·SAM 的稳定化第62-64页
   ·本章小结第64-65页
第6章 结论和展望第65-67页
   ·结论第65-66页
   ·展望第66-67页
致谢第67-68页
参考文献第68-73页
在学期间发表的学术论文第73页

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