| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-26页 |
| 1 转座子的概述 | 第11-13页 |
| ·转座子的定义 | 第11页 |
| ·转座子类型 | 第11-12页 |
| ·转座子家族 | 第12-13页 |
| 2 SB转座子研究进展 | 第13-16页 |
| ·SB转座子的发现与结构 | 第13-14页 |
| ·SB转座系统的转座偏好 | 第14-15页 |
| ·SB转座子的转座机制 | 第15页 |
| ·SB转座子的应用 | 第15-16页 |
| 3 PB转座子研究进展 | 第16-19页 |
| ·PB转座子结构及转座机制 | 第16-17页 |
| ·PB转座子的应用 | 第17-19页 |
| 4 Tol2转座子研究进展 | 第19-20页 |
| ·Tol2转座子结构与转座机制 | 第19页 |
| ·Tol2的应用 | 第19-20页 |
| 5 细胞质注射法制备转基因动物 | 第20-21页 |
| 参考文献 | 第21-26页 |
| 第二篇 实验研究 | 第26-60页 |
| 前言 | 第26-28页 |
| 第一章 多转座子载体pT3-PST的构建 | 第28-37页 |
| 摘要 | 第28页 |
| 前言 | 第28-29页 |
| 1 材料与方法 | 第29-31页 |
| ·菌株及试剂 | 第29页 |
| ·载体构建所用引物的设计与合成 | 第29-30页 |
| ·多转座子载体pT3-PST的构建 | 第30-31页 |
| ·SB、PB、Tol2转座元件的克隆 | 第30页 |
| ·pT3-SB载体构建 | 第30页 |
| ·pT3-SB/PB5载体构建 | 第30页 |
| ·pT3-SB/PB5/Tol2 5载体构建 | 第30页 |
| ·pT3-SB/PB5/Tol2载体构建 | 第30-31页 |
| ·pT3-PB/SB/Tol2(pT3-PST)载体构建 | 第31页 |
| 2 结果 | 第31-36页 |
| ·SB转座元件的克隆与鉴定 | 第31-32页 |
| ·PB转座元件的克隆与鉴定 | 第32页 |
| ·Tol2转座元件克隆与鉴定 | 第32-33页 |
| ·PT3-SB载体的构建与鉴定 | 第33页 |
| ·pT3-PST载体的构建与鉴定 | 第33-36页 |
| ·pT3/SB/PB5载体的构建与鉴定 | 第33-34页 |
| ·PT3-SB/PB5/5Tol2载体构建与鉴定 | 第34-35页 |
| ·PT3-SB/PB5/Tol2载体构建与鉴定 | 第35页 |
| ·pT3-PB/SB/Tol2(pT3-PST)载体构建 | 第35-36页 |
| 3 讨论 | 第36-37页 |
| 第二章 三种转座子在哺乳动物细胞的转座效率比较 | 第37-47页 |
| 摘要 | 第37页 |
| 前言 | 第37-38页 |
| 1 材料与方法 | 第38-41页 |
| ·菌株及试剂 | 第38页 |
| ·pT3-PST-CAG-GFP载体构建 | 第38-39页 |
| ·pT3-PST-CAG-GFP转染3T3细胞 | 第39页 |
| ·三种转座子转座表达活性比较 | 第39-40页 |
| ·细胞基因组提取 | 第40页 |
| ·实时荧光定量PCR检测GFP插入拷贝数及转座酶剪切效率 | 第40页 |
| ·数据统计分析 | 第40-41页 |
| 2 结果 | 第41-45页 |
| ·pT3-PST-CAG-GFP载体构建与鉴定 | 第41页 |
| ·pT3-PST-CAG-GFP表达验证 | 第41-42页 |
| ·三种转座子转座表达活性比较 | 第42-43页 |
| ·三种转座子介导GFP在3T3细胞中插入拷贝数比较 | 第43-44页 |
| ·三种转座酶剪切效率比较 | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| 第三章 三种转座子在哺乳动物体细胞的转座活性比较 | 第47-53页 |
| 摘要 | 第47页 |
| 前言 | 第47页 |
| 1 材料与方法 | 第47-49页 |
| ·菌株及试剂 | 第47-48页 |
| ·pT3-PKG-NEO载体构建 | 第48页 |
| ·G418抗性筛选比较转座子的稳定整合 | 第48-49页 |
| 2 结果 | 第49-51页 |
| ·NEO基因的克隆与鉴定 | 第49页 |
| ·pT3-PKG-NEO载体的构建与鉴定 | 第49-50页 |
| ·G418抗性筛选比较转座子的稳定整合 | 第50-51页 |
| 3 讨论 | 第51-53页 |
| 第四章 三种转座子介导制备转基因动物效率比较 | 第53-60页 |
| 摘要 | 第53页 |
| 前言 | 第53页 |
| 1 材料与方法 | 第53-55页 |
| ·实验试剂 | 第53-54页 |
| ·受精卵的收集 | 第54页 |
| ·细胞质注射小鼠受精卵 | 第54-55页 |
| ·注射方案 | 第55页 |
| 2 结果 | 第55-57页 |
| ·SB转座子细胞质注射小鼠受精卵 | 第55-56页 |
| ·PB转座子细胞质注射小鼠受精卵 | 第56-57页 |
| ·Tol2转座子细胞质注射小鼠受精卵 | 第57页 |
| 3 讨论 | 第57-60页 |
| 全文结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63-65页 |
