| 原创性声明 | 第1页 |
| 关于学位论文使用授权的声明 | 第2-3页 |
| 摘要 | 第3-9页 |
| Abstract | 第9-16页 |
| 符号说明 | 第16-19页 |
| 第一部分:建立内皮素-1诱导的人脐动脉平滑肌细胞增殖模型 | 第19-34页 |
| 前言 | 第19-21页 |
| 材料与方法 | 第21-26页 |
| 1 实验材料 | 第21-23页 |
| ·主要试剂与配制 | 第21-23页 |
| ·主要仪器设备 | 第23页 |
| ·标本来源 | 第23页 |
| 2 实验方法 | 第23-26页 |
| ·人脐动脉平滑肌细胞的原代培养和纯化 | 第23-24页 |
| ·平滑肌细胞鉴定 | 第24-25页 |
| ·不同剂量的ET-1对平滑肌细胞生长的影响 | 第25页 |
| ·建立ET-1诱导的人脐动脉平滑肌细胞细胞增殖模型 | 第25-26页 |
| 3 统计学处理 | 第26页 |
| 结果 | 第26-27页 |
| 1.人脐动脉平滑肌细胞的倒置相差显微镜结果和鉴定 | 第26页 |
| 2.不同剂量的ET-1对人脐动脉平滑肌细胞生长曲线的影响 | 第26页 |
| 3.实验各组对人脐动脉平滑肌细胞细胞生长的影响 | 第26-27页 |
| 讨论 | 第27-28页 |
| 结论 | 第28-29页 |
| 附图表 | 第29-32页 |
| 参考文献 | 第32-34页 |
| 第二部分: 半天莲生物碱和山梗菜碱对内皮素-1诱导的人脐动脉平滑肌细胞增殖的影响 | 第34-59页 |
| 前言 | 第34-37页 |
| 材料与方法 | 第37-43页 |
| 1 实验材料 | 第37-38页 |
| ·实验原料与试剂 | 第37页 |
| ·主要试剂与配制 | 第37-38页 |
| ·主要仪器设备 | 第38页 |
| ·其他实验材料 | 第38页 |
| 2 实验方法 | 第38-43页 |
| ·半边莲生物碱的制备 | 第38-39页 |
| ·半边莲提取 | 第38-39页 |
| ·半边莲生物碱分离 | 第39页 |
| ·半边莲生物碱纯化与鉴定 | 第39页 |
| ·细胞培养药液的配制 | 第39-40页 |
| ·半边莲生物碱溶液 | 第39-40页 |
| ·山梗菜碱溶液 | 第40页 |
| ·不同浓度DMSO的毒性对照实验 | 第40页 |
| ·半边莲生物碱和山梗菜碱的细胞毒性分析 | 第40-41页 |
| ·台盼兰染色排斥实验 | 第40-41页 |
| ·乳酸脱氢酶(LDH)检测 | 第41页 |
| ·细胞计数试剂盒筛选半边莲生物碱和山梗菜碱的剂量 | 第41-42页 |
| ·~3HTdR掺入法反映VSMCs的DNA合成量 | 第42-43页 |
| ·免疫细胞化学染色检测HUASMCs增殖细胞核抗原素(PCNA)的表 达水平 | 第43页 |
| 3 统计学处理 | 第43页 |
| 结果 | 第43-45页 |
| 1 半边莲生物碱提取与分离 | 第43页 |
| 2 不同浓度DMSO的细胞毒性实验 | 第43页 |
| 3 半边莲生物碱和山梗菜碱的细胞毒性分析 | 第43-44页 |
| 4 细胞计数试剂盒筛选半边莲生物碱和山梗菜碱的剂量 | 第44页 |
| 5 ~3H-TdR掺入法反映HUASMCs的DNA合成量 | 第44页 |
| 6 免疫细胞化学染色检测HUASMCs增殖细胞核抗原素(PCNA)的表达 水平 | 第44-45页 |
| 讨论 | 第45-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 附图表 | 第49-56页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
| 第三部分: 半边莲生物碱、山梗菜碱对内皮素-1诱导的人脐动脉平滑肌细胞的细胞周期进程的影响 | 第59-81页 |
| 前言 | 第59-60页 |
| 材料与方法 | 第60-67页 |
| 1 实验材料 | 第60-62页 |
| ·主要试剂与配制 | 第60-62页 |
| ·实验仪器 | 第62页 |
| ·其余实验材科 | 第62页 |
| 2 实验方法 | 第62-67页 |
| ·流式细胞仪检测细胞周期 | 第62-64页 |
| ·RT-PCR方法测定HUASMCs中CyclinD_1 mRNA和p21~(WAF1/CIP1) mRNA的表达 | 第64-67页 |
| 3 统计学处理 | 第67页 |
| 结果 | 第67-68页 |
| 1. 实验各组药物对HUASMCs细胞周期的影响 | 第67页 |
| 2. RNA鉴定 | 第67页 |
| 3. 实验各组药物对HUASMCs中CyclinD_1表达的影响 | 第67页 |
| 4. 实验各组药物对HUASMCS中p21~(WAF1/CIP1)表达的影响 | 第67-68页 |
| 讨论 | 第68-72页 |
| 结论 | 第72-73页 |
| 附图表 | 第73-78页 |
| 参考文献 | 第78-81页 |
| 第四部分:半边莲生物碱、山梗菜碱对内皮素-1诱导的人脐动脉平滑肌细胞增殖调节通路的影响 | 第81-100页 |
| 前言 | 第81-82页 |
| 材料与方法 | 第82-85页 |
| 1 实验材料 | 第82-83页 |
| ·主要试剂与配制 | 第82-83页 |
| ·实验仪器 | 第83页 |
| ·其他实验材料 | 第83页 |
| 2 实验方法 | 第83-85页 |
| ·激光共聚焦显微镜检测细胞内游离Ca~(2+)浓度 | 第83-84页 |
| ·激光共聚焦显微镜动态观察细胞内Ca~(2+)浓度变化 | 第84页 |
| ·RT-PCR方法测定HUASMCs中ETAR mRNA、PKCα mRNA的表达 | 第84-85页 |
| 2 统计学处理 | 第85页 |
| 结果 | 第85-86页 |
| 1.实验各组药物对HUASMCs内钙荧光强度的影响 | 第85页 |
| 2.实验各组药物对HUASMCs内钙荧光强度的动态变化 | 第85-86页 |
| 3.实验各组药物对HUASMCs中ETAR mRNA表达的影响 | 第86页 |
| 4.实验各组药物对HUASMCs中PKCα mRNA表达的影响 | 第86页 |
| 讨论 | 第86-91页 |
| 结论 | 第91-92页 |
| 附图表 | 第92-97页 |
| 参考文献 | 第97-100页 |
| 总结 | 第100-102页 |
| 一、主要研究结论 | 第100页 |
| 二、主要创新点 | 第100-101页 |
| 三、课题局限性与展望 | 第101-102页 |
| 抗蛇毒中药防治高血压病的研究进展 | 第102-108页 |
| 1 理论依据 | 第102-103页 |
| 2 实验研究依据 | 第103-106页 |
| ·拮抗内皮素的升压作用 | 第103-104页 |
| ·拮抗内皮素受体 | 第104页 |
| ·保护血管内皮细胞 | 第104-105页 |
| ·抑制VSMC增殖功能 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-108页 |
| 致谢 | 第108-109页 |
| 在读期间科研成果目录 | 第109-110页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第110页 |
