| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-30页 |
| ·植物与植食性昆虫的相互作用 | 第18-24页 |
| ·植物防御害虫的策略 | 第18-21页 |
| ·植食性昆虫诱发的植物诱导型防御响应 | 第21-24页 |
| ·蚜虫与植物的相互作用 | 第24-29页 |
| ·蚜虫的分类地位与经济重要性 | 第24页 |
| ·蚜虫的取食和寄主的特异性 | 第24-25页 |
| ·蚜虫的唾液 | 第25页 |
| ·植物的抗蚜基因 | 第25-28页 |
| ·植物抗蚜基因的持久性 | 第28页 |
| ·植物对蚜虫的诱导防御响应途径 | 第28-29页 |
| ·立题的依据和意义 | 第29-30页 |
| 第二章 棉蚜诱导棉花叶片的抑制差减杂交cDNA文库的分析 | 第30-43页 |
| 引言 | 第30-31页 |
| ·实验材料 | 第31-32页 |
| ·供试材料 | 第31页 |
| ·菌种和质粒 | 第31页 |
| ·工具酶 | 第31页 |
| ·化学试剂 | 第31页 |
| ·常用培养基 | 第31-32页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR)扩增引物及试剂 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-35页 |
| ·植物和棉蚜的培养 | 第32页 |
| ·棉叶接蚜处理 | 第32页 |
| ·RNA的提取和纯化 | 第32-33页 |
| ·RNA的消化 | 第33页 |
| ·抑制差减杂交文库的构建 | 第33-34页 |
| ·测序和数据分析 | 第34页 |
| ·相关基因的qRT-PCR分析 | 第34-35页 |
| ·结果分析 | 第35-41页 |
| ·棉蚜诱导棉花叶片的抑制差减杂交cDNA文库的检测 | 第35-36页 |
| ·棉蚜诱导棉花叶片的抑制差减杂交cDNA文库的初步分析 | 第36-37页 |
| ·抑制差减杂交cDNA文库中与植食性昆虫胁迫相关的部分克隆分析 | 第37-40页 |
| ·棉蚜危害下相关基因qRT-PCR分析 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 GhTCTP1的克隆鉴定与表达分析 | 第43-51页 |
| 引言 | 第43页 |
| ·实验材料 | 第43-44页 |
| ·供试材料 | 第43-44页 |
| ·菌种和载体 | 第44页 |
| ·工具酶 | 第44页 |
| ·常用试剂 | 第44页 |
| ·实验器材 | 第44页 |
| ·试验方法 | 第44-45页 |
| ·棉花叶片RNA的提取 | 第44页 |
| ·棉花叶片RNA的消化(30 uL体系) | 第44页 |
| ·棉花cDNA的合成(25 μL体系) | 第44-45页 |
| ·GhTCTP1的克隆与序列分析 | 第45页 |
| ·实时定量RT-PCR分析棉花GhTCTP1的表达水平 | 第45页 |
| ·结果 | 第45-49页 |
| ·GhTCTP1基因的分离鉴定 | 第45-46页 |
| ·GhTCTP1蛋白序列分析 | 第46-48页 |
| ·GhTCTP1在棉花各组织中的表达分析 | 第48-49页 |
| ·GhTCTP1表达受棉蚜和伤害的诱导 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 GhTCTP1转基因拟南芥的抗蚜性分析 | 第51-60页 |
| 引言 | 第51-52页 |
| ·实验材料 | 第52页 |
| ·供试材料 | 第52页 |
| ·供试载体和菌种 | 第52页 |
| ·试剂与仪器 | 第52页 |
| ·试剂 | 第52页 |
| ·仪器 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-55页 |
| ·GhTCTP1-GFP载体的构建 | 第52-53页 |
| ·拟南芥的遗传转化 | 第53页 |
| ·转基因拟南芥阳性苗的鉴定 | 第53-54页 |
| ·转基因拟南芥RNA的提取及cDNA的合成 | 第54页 |
| ·GhTCTP1蛋白的亚细胞定位 | 第54页 |
| ·转基因拟南芥株系中GhTCTP1的表达量分析 | 第54页 |
| ·转基因拟南芥对桃蚜的选择性分析 | 第54-55页 |
| ·转基因拟南芥对桃蚜的非选择性分析 | 第55页 |
| ·结果分析 | 第55-59页 |
| ·转基因拟南芥阳性苗的鉴定 | 第55页 |
| ·GhTCTP1蛋白的亚细胞定位 | 第55-56页 |
| ·GhTCTP1在转基因拟南芥中的表达分析 | 第56-58页 |
| ·转基因拟南芥对桃蚜的选择性分析 | 第58页 |
| ·转基因拟南芥对桃蚜的非选择性分析 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| ·GhTCTP1蛋白的亚细胞定位 | 第59页 |
| ·转基因拟南芥对桃蚜的选择性分析 | 第59页 |
| ·转基因拟南芥的对桃蚜的非选择性分析 | 第59-60页 |
| 第五章 GhTCTP1转基因拟南芥的抗蚜机理研究 | 第60-71页 |
| 引言 | 第60-61页 |
| ·实验材料 | 第61页 |
| ·试剂与仪器 | 第61页 |
| ·实验方法 | 第61-63页 |
| ·可溶性糖含量的测定 | 第61页 |
| ·游离氨基酸含量的测定 | 第61-62页 |
| ·苯丙氨酸解氨酶活性的测定 | 第62页 |
| ·过氧化物酶活性的测定 | 第62页 |
| ·超氧化物歧化酶活性的测定 | 第62页 |
| ·叶片胼胝质含量的变化 | 第62页 |
| ·防御途径响应基因的表达分析 | 第62-63页 |
| ·实验结果 | 第63-69页 |
| ·GhTCTP1在拟南芥中过量表达对可溶性糖含量的影响 | 第63页 |
| ·GhTCTP1在拟南芥中过量表达对游离氨基酸含量的影响 | 第63-64页 |
| ·GhTCTP1在拟南芥中过量表达对苯丙氨酸解氨酶的活性的影响 | 第64-65页 |
| ·GhTCTP1在拟南芥中过量表达对过氧化物酶活性的影响 | 第65页 |
| ·GhTCTP1在拟南芥中过量表达对超氧化物歧化酶活性的影响 | 第65-66页 |
| ·GhTCTP1在拟南芥中过量表达对胼胝质沉积的影响 | 第66-67页 |
| ·GhTCTP1转基因拟南芥防御响应相关基因的表达分析 | 第67-69页 |
| ·讨论 | 第69-71页 |
| ·转基因拟南芥中可溶性糖的含量对桃蚜抗性的影响 | 第69页 |
| ·转基因拟南芥中游离氨基酸的含量对桃蚜抗性的影响 | 第69页 |
| ·转基因拟南芥中三种酶活性对桃蚜抗性的影响 | 第69页 |
| ·转基因拟南芥中胼胝质沉积对桃蚜抗性的影响 | 第69-70页 |
| ·转基因拟南芥防御响应相关基因的表达分析 | 第70-71页 |
| 第六章 GhTCTP1转基因棉花的抗虫性分析 | 第71-79页 |
| 引言 | 第71页 |
| ·实验材料 | 第71页 |
| ·试剂与仪器 | 第71页 |
| ·实验方法 | 第71-74页 |
| ·过量表达载体pMD-GhTCTP1的构建 | 第71页 |
| ·pMD-GhTCTP1转化农杆菌 | 第71-72页 |
| ·棉花的遗传转化 | 第72-73页 |
| ·转基因棉花的鉴定 | 第73页 |
| ·转基因棉花的表达量分析 | 第73页 |
| ·转基因棉花的抗虫性分析 | 第73-74页 |
| ·结果 | 第74-77页 |
| ·GhTCTP1过量表达转基因棉花的遗传转化 | 第74页 |
| ·GhTCTP1过量表达转基因棉花T_1代植株的鉴定 | 第74-75页 |
| ·转基因棉花T_1代植株中GhTCTP1表达量分析 | 第75页 |
| ·GhTCTP1过量表达转基因棉花T_1代植株对棉蚜的选择性分析 | 第75-76页 |
| ·GhTCTP1过量表达转基因棉花T_1代植株对棉蚜的非选择性试验 | 第76-77页 |
| ·讨论 | 第77-79页 |
| 第七章 GhPSAK1在植物对蚜虫响应中的作用 | 第79-92页 |
| 引言 | 第79-80页 |
| ·实验材料 | 第80页 |
| ·仪器和器材 | 第80页 |
| ·实验方法 | 第80页 |
| ·结果 | 第80-90页 |
| ·GhPSAK1的克隆和特征 | 第80-83页 |
| ·棉蚜诱导下GhPSAK1的表达水平出现上调 | 第83-84页 |
| ·拟南芥中GhPSAK1的过量表达分析 | 第84-85页 |
| ·桃蚜对转基因拟南芥的选择性分析 | 第85页 |
| ·桃蚜对转基因拟南芥的非选择性 | 第85页 |
| ·GhPSAK1在拟南芥中的过量表达影响胼胝质的沉积 | 第85-86页 |
| ·GhPSAK1过量表达对拟南芥营养条件的的影响 | 第86-87页 |
| ·GhPSAK1过量表达提高了拟南芥的POD和SOD的活性 | 第87-89页 |
| ·GhPSAK1过量表达对拟南芥的防御响应基因表达量的影响 | 第89-90页 |
| ·讨论 | 第90-92页 |
| 结论 | 第92-94页 |
| 本论文的主要创新点 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-111页 |
| 博士期间发表论文 | 第111-112页 |
| 致谢 | 第112页 |
