| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-17页 |
| ·阿魏酸概述 | 第8-9页 |
| ·阿魏酸在植物细胞壁中的存在形式 | 第8页 |
| ·阿魏酸的生理活性作用 | 第8-9页 |
| ·阿魏酸酯酶简介 | 第9页 |
| ·阿魏酸酯酶的研究进展 | 第9-14页 |
| ·阿魏酸酯酶的来源及理化性质研究 | 第9-10页 |
| ·阿魏酸酯酶的分类 | 第10-11页 |
| ·阿魏酸酯酶的基本结构特征 | 第11-12页 |
| ·阿魏酸酯酶的基因工程进展 | 第12-13页 |
| ·阿魏酸酯酶的应用 | 第13-14页 |
| ·阿魏酸酯酶与木聚糖酶协同作用的研究 | 第14-15页 |
| ·木聚糖酶简介 | 第14-15页 |
| ·双酶法协同作用的研究 | 第15页 |
| ·研究内容和意义 | 第15-17页 |
| ·研究基础 | 第15-16页 |
| ·研究内容 | 第16页 |
| ·研究意义 | 第16-17页 |
| 第二章 阿魏酸酯酶基因（AufaeA）的克隆表达及酶学性质研究 | 第17-37页 |
| ·引言 | 第17页 |
| ·实验材料 | 第17-19页 |
| ·菌株与质粒 | 第17页 |
| ·工具酶与试剂 | 第17页 |
| ·主要仪器设备 | 第17-18页 |
| ·培养基 | 第18-19页 |
| ·主要溶液配制 | 第19页 |
| ·常用储存液配制 | 第19页 |
| ·质粒提取溶液的配制 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-29页 |
| ·宇佐美曲霉总 RNA 的提取 | 第19-20页 |
| ·引物的设计与合成 | 第20页 |
| ·阿魏酸酯酶成熟肽基因（AufaeA）的扩增 | 第20-22页 |
| ·E. coli JM109 感受态细胞的制备 | 第22页 |
| ·重组克隆质粒的构建 | 第22-23页 |
| ·重组子的鉴定与筛选 | 第23页 |
| ·重组子的测序与保种 | 第23页 |
| ·碱法提取质粒 | 第23-24页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第24页 |
| ·重组表达质粒的转化与筛选鉴定 | 第24-25页 |
| ·重组表达质粒的线性化 | 第25-26页 |
| ·酵母感受态的制备 | 第26页 |
| ·pPIC9K-AufaeA 的电击转化 | 第26页 |
| ·高拷贝重组酵母的筛选与鉴定 | 第26页 |
| ·重组酵母的诱导表达 | 第26-27页 |
| ·表达产物 SDS-PAGE 分析 | 第27页 |
| ·发酵液蛋白含量测定 | 第27页 |
| ·重组阿魏酸酯酶（reAuFaeA）的分离纯化 | 第27页 |
| ·reAuFaeA 酶活的测定 | 第27-28页 |
| ·酶学性质分析 | 第28-29页 |
| ·结果与讨论 | 第29-37页 |
| ·宇佐美曲霉总 RNA 的提取 | 第29页 |
| ·AufaeA 的 PCR 扩增 | 第29-30页 |
| ·重组克隆质粒 pUCm-T-AufaeA 的构建 | 第30-31页 |
| ·AuFaeA 一级结构分析 | 第31页 |
| ·重组表达质粒 pPIC9K-AufaeA 的构建 | 第31-32页 |
| ·重组毕赤酵母的鉴定 | 第32页 |
| ·表达产物的纯化及 SDS-PAGE 分析 | 第32-33页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第33页 |
| ·酶活性测定 | 第33-34页 |
| ·酶学性质分析 | 第34-37页 |
| 第三章 阿魏酸的制备及体外抗氧化活性研究 | 第37-50页 |
| ·引言 | 第37页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·菌株 | 第37页 |
| ·材料与试剂 | 第37页 |
| ·主要仪器设备 | 第37页 |
| ·培养基 | 第37页 |
| ·主要溶液配制 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-42页 |
| ·酶解原料的制备 | 第38页 |
| ·重组阿魏酸酯酶及木聚糖酶的制备 | 第38页 |
| ·酶活的测定 | 第38-39页 |
| ·阿魏酸的分析测定 | 第39页 |
| ·总阿魏酸的提取 | 第39-40页 |
| ·阿魏酸酯酶与木聚糖酶协同作用的研究 | 第40页 |
| ·双酶法协同降解小麦麸皮（DSWB）的工艺研究 | 第40-41页 |
| ·水解条件的正交实验 | 第41页 |
| ·大孔树脂分离纯化阿魏酸 | 第41-42页 |
| ·阿魏酸体外抗氧化活性研究 | 第42页 |
| ·结果与讨论 | 第42-50页 |
| ·酶活性测定 | 第42页 |
| ·总阿魏酸含量的测定 | 第42-43页 |
| ·阿魏酸酯酶与木聚糖酶协同作用的研究 | 第43-44页 |
| ·双酶法协同降解 DSWB 的工艺研究 | 第44-47页 |
| ·水解条件的正交实验 | 第47页 |
| ·大孔树脂分离纯化阿魏酸 | 第47页 |
| ·酶解产物阿魏酸的体外抗氧化活性研究 | 第47-50页 |
| 主要结论与展望 | 第50-52页 |
| 主要结论 | 第50-51页 |
| 展望 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第59页 |
