| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-25页 |
| 1 生物学特性与病毒蛋白 | 第11-13页 |
| ·病毒生物学特性 | 第12页 |
| ·病毒主要蛋白 | 第12-13页 |
| 2 流行病学 | 第13-14页 |
| 3 临床特征和病理变化 | 第14页 |
| 4 诊断技术 | 第14-18页 |
| ·电镜观察 | 第14页 |
| ·酶联免疫吸附试验 | 第14-15页 |
| ·间接免疫荧光试验 | 第15-16页 |
| ·免疫组织化学技术 | 第16页 |
| ·分子诊断 | 第16-18页 |
| ·PCR | 第16-17页 |
| ·原位杂交技术 | 第17-18页 |
| 5 预防与控制 | 第18-19页 |
| 参考文献 | 第19-25页 |
| 第二篇 研究内容 | 第25-73页 |
| 第一章 猪巨细胞病毒gB基因原核表达与鉴定 | 第25-39页 |
| 摘要 | 第25页 |
| 1 材料与方法 | 第25-32页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-32页 |
| ·PCMV gB基因的PCR扩增 | 第26页 |
| ·PCR产物回收纯化 | 第26-27页 |
| ·重组质粒的构建及鉴定 | 第27-29页 |
| ·重组gB蛋白的表达 | 第29-31页 |
| ·表达gB蛋白的Western-blotting鉴定 | 第31-32页 |
| 2 结果 | 第32-34页 |
| ·gB基因扩增 | 第32页 |
| ·重组质粒pET32a-gB双酶切鉴定 | 第32-33页 |
| ·gB基因序列测定 | 第33页 |
| ·重组gB蛋白的SDS-PAGE电泳结果 | 第33页 |
| ·表达产物的Western-blotting鉴定结果 | 第33-34页 |
| 3 讨论 | 第34-36页 |
| 参考文献 | 第36-37页 |
| ABSTRACT | 第37-39页 |
| 第二章 猪巨细胞病毒间接ELISA检测方法的建立与初步应用 | 第39-59页 |
| 摘要 | 第39-40页 |
| 1 材料与方法 | 第40-44页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-44页 |
| ·重组gB蛋白表达条件的优化 | 第40页 |
| ·重组gB蛋白的可溶性鉴定 | 第40-41页 |
| ·重组gB蛋白的纯化 | 第41-42页 |
| ·间接ELISA方法的建立及条件优化 | 第42-43页 |
| ·间接ELISA阴阳性判定标准的建立 | 第43页 |
| ·特异性试验 | 第43页 |
| ·敏感性试验 | 第43-44页 |
| ·重复性试验 | 第44页 |
| ·临床血清样品检测 | 第44页 |
| 2 结果 | 第44-53页 |
| ·ELISA抗原制备 | 第44-47页 |
| ·重组gB蛋白表达条件优化 | 第44-45页 |
| ·重组gB蛋白可溶性检测 | 第45-46页 |
| ·重组gB蛋白的纯化 | 第46-47页 |
| ·间接ELISA方法反应条件优化 | 第47-50页 |
| ·间接ELISA方法阴阳性判定标准的建立 | 第50页 |
| ·特异性试验 | 第50-51页 |
| ·敏感性试验 | 第51页 |
| ·重复性试验 | 第51-52页 |
| ·临床血清样品的检测 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| ABSTRACT | 第57-59页 |
| 第三章 抗猪巨细胞病毒gB蛋白单克隆抗体研制 | 第59-73页 |
| 摘要 | 第59页 |
| 1 材料和方法 | 第59-66页 |
| ·主要材料与试剂 | 第59-60页 |
| ·抗原蛋白和检测蛋白的制备 | 第60页 |
| ·动物免疫 | 第60页 |
| ·间接ELISA方法检测免疫后鼠血清效价 | 第60-61页 |
| ·单抗的制备 | 第61-63页 |
| ·SP2/0骨髓瘤细胞的准备 | 第61页 |
| ·饲养细胞的准备 | 第61-62页 |
| ·脾淋巴细胞的准备 | 第62页 |
| ·细胞融合 | 第62页 |
| ·杂交瘤细胞的选择性培养 | 第62页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第62-63页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的亚克隆 | 第63页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第63页 |
| ·腹水的制备 | 第63页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第63-66页 |
| ·单克隆抗体效价的测定 | 第63-64页 |
| ·单克隆抗体Ig类的鉴定 | 第64页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定 | 第64-66页 |
| ·杂交瘤细胞分泌抗体稳定性的鉴定 | 第66页 |
| 2 结果 | 第66-70页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立和抗体效价的测定 | 第66页 |
| ·单克隆抗体的Ig类鉴定 | 第66-67页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定 | 第67-69页 |
| ·单克隆抗体与原核表达的蛋白的反应 | 第67页 |
| ·单克隆抗体与真核表达的蛋白的反应 | 第67-69页 |
| ·分泌抗体稳定性的鉴定 | 第69-70页 |
| 3 讨论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-72页 |
| ABSTRACT | 第72-73页 |
| 全文总结 | 第73-75页 |
| 附录 | 第75-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
