| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-16页 |
| 第一章 引言 | 第16-26页 |
| 第一节 肾癌转移概述 | 第16-19页 |
| ·肿瘤干细胞 | 第17-18页 |
| ·上皮细胞间质化 | 第18-19页 |
| 第二节 FOXO3a基因概述 | 第19-24页 |
| ·FOXO3基因结构和功能 | 第19-21页 |
| ·FOXO3a与恶性肿瘤的关系 | 第21-24页 |
| 第三节 本研究内容、目的、创新点 | 第24-26页 |
| ·本研究的立项依据 | 第24页 |
| ·本研究的内容、目的、意义 | 第24-26页 |
| 第二章 表达谱芯片结果及生物信息学分析 | 第26-49页 |
| 第一节 实验材料 | 第26-28页 |
| ·组织样本 | 第26页 |
| ·实验仪器及设备 | 第26-27页 |
| ·主要试剂 | 第27-28页 |
| 第二节 实验方法 | 第28-39页 |
| ·样品总RNA抽提 | 第28页 |
| ·Total RNA质检 | 第28-29页 |
| ·RNA反转录和体外转录 | 第29-31页 |
| ·样品片段化和杂交 | 第31-33页 |
| ·统计分析 | 第33-39页 |
| 第三节 实验结果 | 第39-48页 |
| ·差异表达的基因 | 第39-40页 |
| ·GO分析结果 | 第40-42页 |
| ·Pathway分析结果 | 第42-44页 |
| ·signal-net分析结果 | 第44-48页 |
| 第四节 讨论 | 第48-49页 |
| 第三章 FOXO3a在转移性肾透明细胞癌中的表达及预后 | 第49-64页 |
| 第一节 实验材料 | 第49-53页 |
| ·组织样本和患者随访 | 第49-50页 |
| ·所用引物 | 第50页 |
| ·主要试剂和配方 | 第50-51页 |
| ·实验耗材和设备仪器 | 第51-53页 |
| 第二节 实验方法 | 第53-57页 |
| ·样品总RNA抽提 | 第53页 |
| ·样品总RNA逆转为cDNA | 第53-54页 |
| ·实时定量PCR检测 | 第54-55页 |
| ·免疫组织化学染色以及结果统计 | 第55-56页 |
| ·统计分析 | 第56-57页 |
| 第三节 实验结果 | 第57-62页 |
| ·FOXO3a在原发转移性肾透明细胞癌中的表达 | 第57-58页 |
| ·FOXO3a下调是肾透明细胞癌转移复发独立的危险因素 | 第58-60页 |
| ·FOXO3a低表达组术后无病生存率降低 | 第60-62页 |
| 第四节 讨论 | 第62-64页 |
| 第四章 FOXO3a对肾癌细胞生物学功能的影响 | 第64-95页 |
| 第一节 实验材料 | 第64-73页 |
| ·主要材料 | 第64-68页 |
| ·主要试剂和配方 | 第68-71页 |
| ·实验耗材和仪器设备 | 第71-73页 |
| 第二节 实验方法 | 第73-85页 |
| ·FOXO3a过表达质粒的构建 | 第73-78页 |
| ·细胞培养 | 第78-79页 |
| ·细胞转染 | 第79-80页 |
| ·提取细胞蛋白 | 第80-81页 |
| ·western-blot检测 | 第81-82页 |
| ·流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第82-83页 |
| ·Transwell试验检测细胞侵袭迁移能力 | 第83-84页 |
| ·划痕实验 | 第84页 |
| ·统计分析 | 第84-85页 |
| 第三节 实验结果 | 第85-93页 |
| ·FOXO3a过表达质粒的鉴定 | 第85-86页 |
| ·FOXO3a在不同株肾癌细胞系中的基础表达 | 第86页 |
| ·FOXO3a促进肾癌细胞凋亡 | 第86-88页 |
| ·FOXO3a抑制肾癌细胞的侵袭和迁移能力 | 第88-93页 |
| 第四节 讨论 | 第93-95页 |
| 第五章 FOXO3a对裸鼠原位肾癌模型肺转移的影响 | 第95-105页 |
| 第一节 实验材料 | 第95-98页 |
| ·主要材料 | 第95页 |
| ·主要试剂和配方 | 第95-96页 |
| ·实验耗材和仪器设备 | 第96-98页 |
| 第二节 实验方法 | 第98-100页 |
| ·细胞准备 | 第98页 |
| ·建立裸鼠原位肾癌模型 | 第98-99页 |
| ·分子成像系统检测肺转移灶 | 第99页 |
| ·石蜡包埋,组织切片HE染色 | 第99-100页 |
| 第三节 实验结果 | 第100-103页 |
| ·裸鼠成瘤和肺转移灶判定 | 第100页 |
| ·裸鼠原位肾癌模型的成瘤率和转移率 | 第100-101页 |
| ·分子成像系统定量检测肿瘤肺转移灶 | 第101-103页 |
| 第四节 讨论 | 第103-105页 |
| 第六章 FOXO3a促肿瘤转移的分子机制探索 | 第105-121页 |
| 第一节 实验材料 | 第105-110页 |
| ·主要材料 | 第105-106页 |
| ·主要试剂和配方 | 第106-108页 |
| ·实验耗材和仪器设备 | 第108-110页 |
| 第二节 实验方法 | 第110-115页 |
| ·细胞总RNA抽提 | 第110页 |
| ·样品总RNA逆转为cDNA | 第110-111页 |
| ·实时定量PCR检测 | 第111页 |
| ·细胞转染 | 第111页 |
| ·提取细胞蛋白 | 第111-112页 |
| ·western-blot检测 | 第112-113页 |
| ·Transwell试验检测细胞侵袭迁移能力 | 第113-115页 |
| 第三节 实验结果 | 第115-119页 |
| ·FOXO3a下调能促进SNAIL基因表达 | 第115页 |
| ·FOXO3a和SNAIL1基因在组织样本中的表达呈负相关 | 第115-116页 |
| ·沉默SNAIL1能够抵消FOXO3a沉默引起的细胞侵袭转移能力增加 | 第116页 |
| ·沉默SNAIL1能够抵消沉默FOXO3a诱导的EMT转化 | 第116-119页 |
| 第四节 讨论 | 第119-121页 |
| 第七章 建立手术训练模型 | 第121-130页 |
| 第八章 结论 | 第130-133页 |
| 参考文献 | 第133-139页 |
| 致谢 | 第139-140页 |
| 个人简历和在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第140页 |
