| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 符号说明 | 第8-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-18页 |
| 1. α-淀粉酶概述 | 第9-14页 |
| ·α-淀粉酶 | 第9页 |
| ·α-淀粉酶的催化机理 | 第9-10页 |
| ·α-淀粉酶的测定方法 | 第10-11页 |
| ·α-淀粉酶的应用 | 第11-12页 |
| ·α-淀粉酶的耐受性研究 | 第12-13页 |
| ·海洋新型α-淀粉酶AmyP | 第13-14页 |
| 2 碳水化合物结合结构域 | 第14页 |
| 3 淀粉结合结构域 | 第14-16页 |
| 4 选题依据、意义及主要研究内容 | 第16-18页 |
| ·研究目的 | 第16页 |
| ·研究意义 | 第16-17页 |
| ·研究内容 | 第17-18页 |
| 第二章 α-淀粉酶AmyP的耐受性研究 | 第18-34页 |
| 1 实验材料 | 第18-22页 |
| ·菌株和质粒 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·培养基和各种试剂的配制 | 第19-21页 |
| ·仪器 | 第21-22页 |
| 2 实验方法 | 第22-28页 |
| ·重组质粒的电转化 | 第22-23页 |
| ·重组蛋白的IPTG诱导表达 | 第23页 |
| ·重组蛋白纯化 | 第23-25页 |
| ·AmyP耐受性的测定 | 第25-28页 |
| 3 结果与讨论 | 第28-34页 |
| ·金属离子和EDTA对AmyP酶活的影响 | 第28-29页 |
| ·NaCl对AmyP酶活的影响 | 第29-30页 |
| ·有机溶剂对AmyP稳定性的影响 | 第30-31页 |
| ·氧化剂和还原剂对AmyP稳定性的影响 | 第31-32页 |
| ·表面活性剂对AmyP稳定性的影响 | 第32-33页 |
| ·结论 | 第33-34页 |
| 第三章 AmyP淀粉结合结构域(SBD)的功能鉴定 | 第34-44页 |
| 1 实验材料 | 第34-35页 |
| ·菌株和质粒 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·试剂的配制 | 第34-35页 |
| 2 实验方法 | 第35-37页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第35-36页 |
| ·SBD的克隆、表达和纯化 | 第36页 |
| ·SBD的序列比对 | 第36页 |
| ·SBD的吸附实验 | 第36页 |
| ·AmyP与AmyP_(△sBD)酶动力学参数比较 | 第36-37页 |
| ·蛋白的亲和凝胶电泳 | 第37页 |
| 3 结果 | 第37-44页 |
| ·序列分析 | 第37-39页 |
| ·假定SBD的克隆与表达 | 第39页 |
| ·SBD的亲和凝胶电泳 | 第39-40页 |
| ·SBD与生淀粉的吸附率测定 | 第40-41页 |
| ·AmyP与AmyP_(△SBD)酶动力学参数比较 | 第41-42页 |
| ·AmyP、AmyP_(△SBD)、SBD亲和电泳 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 在读期间发表论文情况 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
