| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 中英文缩略词 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-28页 |
| 1 水稻锯齿叶矮缩病研究进展 | 第13-16页 |
| ·水稻锯齿叶矮缩病的发生和危害 | 第13页 |
| ·水稻锯齿叶矮缩病毒的寄主及其发病症状 | 第13-14页 |
| ·水稻锯齿叶矮缩病的防治措施 | 第14-15页 |
| ·RRSV的分类地位和特征 | 第15页 |
| ·RRSV与介体、寄主之间的互作 | 第15-16页 |
| 2 细胞分裂素的研究进展 | 第16-19页 |
| ·细胞分裂素的发现、作用及种类 | 第16-17页 |
| ·细胞分裂素的合成、降解和修饰 | 第17-19页 |
| 3 细胞分裂素糖基转移酶的研究进展 | 第19-25页 |
| ·植物的糖基转移酶多基因家族 | 第20-22页 |
| ·顺式-玉米素-O-葡萄糖基转移酶(cZOGTs) | 第22-25页 |
| 4 叶型态发育研究进展 | 第25-26页 |
| 5 本研究的立题依据和意义 | 第26-28页 |
| ·立题依据 | 第26-27页 |
| ·立题意义 | 第27-28页 |
| 第二章 细胞分裂素的测定 | 第28-32页 |
| 1 材料、试剂和仪器 | 第28页 |
| ·供实材料 | 第28页 |
| ·试剂和仪器 | 第28页 |
| 2 方法 | 第28-31页 |
| ·细胞分裂素的提取 | 第28-29页 |
| ·细胞分裂素的酶联免疫分析 | 第29-31页 |
| ·实验原理 | 第29页 |
| ·测定 | 第29-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31页 |
| ·水稻细胞分裂素的测定结果分析 | 第31页 |
| 4 小结与讨论 | 第31-32页 |
| 第三章 OscZOGTs基因的表达量分析 | 第32-51页 |
| 1 材料 | 第32页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·仪器和试剂 | 第32页 |
| 2 方法 | 第32-39页 |
| ·设计引物及合成 | 第32-33页 |
| ·水稻叶片总RAN提取 | 第33-34页 |
| ·反转录 | 第34页 |
| ·PCR和qRT-PCR鉴定RRSV | 第34-39页 |
| ·PCR鉴定RRSV | 第34-35页 |
| ·qRT-PCR鉴定锯齿叶矮缩病 | 第35-39页 |
| 3 OscZOGT1、OscZOGT2和OscZOGT3表达量分析 | 第39-40页 |
| ·OscZOGT1、OscZOGT2和OscZOGT3引物特异性检测 | 第39页 |
| ·OscZOGT1、OscZOGT2和OscZOGT3及内参的扩增效率检测 | 第39页 |
| ·OscZOGT1、OscZOGT2和OscZOGT3基因的相对定量 | 第39-40页 |
| 4 结果与分析 | 第40-50页 |
| ·RRSV的检测 | 第40-43页 |
| ·PCR检测RRSV | 第40页 |
| ·目的基因RRSV-P8的扩增 | 第40-41页 |
| ·检测RRSV-P8引物特异性 | 第41页 |
| ·检测目的片段大小及单一性 | 第41-42页 |
| ·RRSV-P8引物扩增效率的检测 | 第42页 |
| ·RRSV-P8基因绝对定量 | 第42-43页 |
| ·OscZOGT1、OscZOGT2和OscZOGT3表达量分析 | 第43-50页 |
| ·OscZOGT1、OscZOGT2和OscZOGT3引物特异性检测 | 第43-45页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测目的条带大小和单一性 | 第45-46页 |
| ·OscZOGT1、OscZOGT2和OscZOGT3的扩增效率检测 | 第46-48页 |
| ·OscZOGT1、OscZOGT2和OscZOGT3的表达量分析 | 第48-50页 |
| 5 小结与讨论 | 第50-51页 |
| 第四章 OscZOGTs基因植物表达载体构建 | 第51-68页 |
| 1 材料 | 第51页 |
| ·菌种和载体 | 第51页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第51页 |
| 2 方法 | 第51-61页 |
| ·OscZOGT1过表达和干扰植物表达载体的构建 | 第51-55页 |
| ·引物设计 | 第51-52页 |
| ·克隆载体的构建 | 第52-55页 |
| ·OscZOGTl及OscZOGTlRNAi酵切产物与植物表达载体pXQact的连接 | 第55页 |
| ·OscZOGT2过表达载体的构建 | 第55-58页 |
| ·OscZOGT2扩增引物设计 | 第55页 |
| ·OscZOGT2克隆载体的构建 | 第55-57页 |
| ·OscZOGT2酶切产物与植物表达载体pXQact的连接 | 第57-58页 |
| ·OscZOGT3过表达和干扰植物表达载体的构建 | 第58-60页 |
| ·引物设计 | 第58页 |
| ·克隆载体的构建 | 第58-60页 |
| ·OscZOGT3及OscZOGT3RNAi酶切产物与植物表达载体pXQact的连接 | 第60页 |
| ·OscZOGT1和OscZOGT3过表达和干扰植物表达载体,OscZOGT2植物过表达载体转化农杆菌 | 第60-61页 |
| ·农杆菌EHA105感受态细胞的制备 | 第60-61页 |
| ·农杆菌转化 | 第61页 |
| ·阳性菌落的PCR鉴定 | 第61页 |
| 3 结果与分析 | 第61-67页 |
| ·OscZOGT1、OscZOGT2和OscZOGT3基因的PCR扩增 | 第61-63页 |
| ·OscZOGT1、OscZOGT2和OscZOGT3重组质粒的PCR鉴定和酶切鉴定 | 第63-66页 |
| ·OscZOGT1、OscZOGT2和OscZOGT3重组质粒转化农杆菌结果分析 | 第66-67页 |
| 4 小结与讨论 | 第67-68页 |
| 第五章 OscZOGTs转基因水稻表达量及表型分析 | 第68-77页 |
| 1 材料 | 第68页 |
| ·供实材料 | 第68页 |
| ·主要试剂 | 第68页 |
| 2 方法 | 第68-72页 |
| ·转基因植株鉴定引物的设计 | 第68页 |
| ·水稻成熟胚愈伤组织的诱导 | 第68-69页 |
| ·水稻愈伤组织的侵染和共培养 | 第69页 |
| ·洗菌和筛选 | 第69-71页 |
| ·分化 | 第71页 |
| ·生根和炼苗 | 第71页 |
| ·转基因植株的检测 | 第71-72页 |
| ·转基因植株总DNA的提取 | 第71-72页 |
| ·PCR检测转基因植株 | 第72页 |
| 3 结果与分析 | 第72-76页 |
| ·转基因水稻PCR检测结果 | 第72-74页 |
| ·转基因水稻表型分析 | 第74-75页 |
| ·OscZOGT1和OscZOGT2在转基因水稻中的表达量分析 | 第75-76页 |
| 4 小结与讨论 | 第76-77页 |
| 第六章 总结与展望 | 第77-78页 |
| 1 总结 | 第77页 |
| 2 展望 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-83页 |
| 附录1 常用培养基和试剂的配制 | 第83-85页 |
| 附录2 转基因培养基的配制 | 第85-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
