摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-26页 |
·猪瘟与猪瘟病毒 | 第14-16页 |
·猪瘟 | 第14页 |
·猪瘟病毒 | 第14-16页 |
·猪瘟病毒反向遗传技术的发展和应用 | 第16-20页 |
·CSFV 反向遗传学技术的发展 | 第16页 |
·在研究病毒毒力基因中的应用 | 第16-17页 |
·在研究病毒复制机制中的应用 | 第17-18页 |
·在猪瘟病毒标记活疫苗株构建中的应用 | 第18-19页 |
·在诊断和病毒定量等中的应用 | 第19-20页 |
·染色技术的发展和应用 | 第20-21页 |
·病毒抵抗宿主抗病毒反应的策略 | 第21-24页 |
·病毒逃逸宿主的天然免疫 | 第21-22页 |
·病毒改变细胞内正常的细胞质与细胞核间的运输 | 第22-23页 |
·病毒劫持核仁 | 第23-24页 |
·本研究的目的与意义 | 第24-26页 |
第二章 猪瘟病毒 N~(pro)蛋白核仁穿梭及其对病毒复制的影响 | 第26-61页 |
·材料和方法 | 第26-36页 |
·细胞、病毒、质粒、抗体和试剂 | 第26页 |
·主要仪器设备 | 第26-27页 |
·质粒构建 | 第27-28页 |
·感染性克隆的构建和验证 | 第28-31页 |
·转染试验 | 第31页 |
·重组病毒的体内拯救 | 第31页 |
·重组病毒的鉴定 | 第31-34页 |
·病毒一步生长曲线的测定 | 第34页 |
·TC 标记在重组猪瘟病毒基因组中的稳定性试验 | 第34页 |
·FLAsH-EDT2 活细胞染色和免疫染色 | 第34-35页 |
·共聚焦显微镜实时活细胞成像 | 第35页 |
·细胞核蛋白和细胞浆蛋白分离试验 | 第35页 |
·Western blot | 第35-36页 |
·双荧光素酶报告系统 | 第36页 |
·结果 | 第36-56页 |
·全长感染性克隆的验证 | 第36-37页 |
·TC 标记猪瘟病毒的验证 | 第37-42页 |
·TC 标记猪瘟病毒的一步生长曲线 | 第42-43页 |
·N~(pro)蛋白的活细胞成像 | 第43-44页 |
·N~(pro)蛋白核仁穿梭过程的实时追踪 | 第44-45页 |
·N~(pro)蛋白定位于核仁 | 第45-46页 |
·截短表达的 N~(pro)蛋白突变体定位于细胞核不定位于核仁 | 第46-47页 |
·IRF3 阻碍 N~(pro)蛋白进入细胞核和核仁 | 第47-49页 |
·N~(pro)蛋白核仁定位功能独立于其抑制干扰素产生的功能 | 第49-50页 |
·IRF3 与 N~(pro)的融合不影响 N~(pro)蛋白的切割活性 | 第50-51页 |
·突变体病毒 vSM-IRF3 和 vSM-D136N 的验证 | 第51-54页 |
·突变体病毒 vSM-IRF3 表达的 IRF3-N~(pro)融合蛋白的定位 | 第54页 |
·突变体病毒 vSM-IRF3 的滴度 | 第54-55页 |
·突变体病毒 vSM-IRF3 的多步生长曲线 | 第55-56页 |
·突变体病毒 vSM-IRF3 诱导较低的干扰素活性 | 第56页 |
·讨论 | 第56-61页 |
第三章 全文结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
作者简历 | 第73页 |