陆地棉低酚种子干涉载体的构建与应用
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词 | 第8-9页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 1 前言 | 第12-32页 |
| ·棉酚色素腺体的研究 | 第12-13页 |
| ·棉花色素腺体 | 第12-13页 |
| ·棉酚的研究 | 第13页 |
| ·棉酚合成途径的研究 | 第13-15页 |
| ·棉酚合成途径的关键酶 | 第15-17页 |
| ·低酚棉育种的研究 | 第17-18页 |
| ·棉花遗传转化方法 | 第18-20页 |
| ·农杆菌介导法 | 第18-19页 |
| ·基因枪轰击法 | 第19页 |
| ·花粉管通道法 | 第19-20页 |
| ·植物启动子的研究 | 第20-22页 |
| ·植物启动子的基本结构 | 第20页 |
| ·植物启动子的分类 | 第20-22页 |
| ·基因沉默技术的研究 | 第22-30页 |
| ·反义 RNA | 第22页 |
| ·RNAi 的研究 | 第22-25页 |
| ·microRNA | 第25-27页 |
| ·tasiRNA | 第27-30页 |
| ·研究的目的和意义 | 第30-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-50页 |
| ·试验材料 | 第32-36页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·菌株及载体 | 第32-33页 |
| ·主要试剂及配置 | 第33-35页 |
| ·主要仪器 | 第35-36页 |
| ·拟南芥种子特异性启动子的克隆与功能验证 | 第36-41页 |
| ·拟南芥基因组 DNA 的提取 | 第36页 |
| ·PCR 产物的获得 | 第36-37页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第37页 |
| ·PCR 产物克隆 | 第37-38页 |
| ·阳性克隆检测 | 第38页 |
| ·中间载体的构建 | 第38-39页 |
| ·表达载体构建 | 第39页 |
| ·转基因拟南芥的获得 | 第39-40页 |
| ·转基因拟南芥的检测 | 第40-41页 |
| ·棉花的球蛋白启动子的获得 | 第41-42页 |
| ·棉花基因组 DNA 的提取 | 第41页 |
| ·棉花球蛋白启动子的克隆与检测 | 第41-42页 |
| ·干涉中间载体构建 | 第42-44页 |
| ·RNA 提取 | 第42-43页 |
| ·RNA 反转录得 cDNA | 第43页 |
| ·干涉片段的获得 | 第43页 |
| ·干涉中间载体的连接 | 第43-44页 |
| ·干涉表达载体的构建 | 第44-48页 |
| ·pCIAY/ pCIACD 载体构建 | 第44-45页 |
| ·完整干涉载体构建 | 第45-48页 |
| ·RNA 干涉载体的遗传转化 | 第48-50页 |
| ·无菌苗的种植 | 第48页 |
| ·农杆菌侵染下胚轴 | 第48页 |
| ·愈伤组织诱导 | 第48-50页 |
| 3 结果分析 | 第50-62页 |
| ·拟南芥种子特异性启动子的克隆与功能验证 | 第50-54页 |
| ·启动子的克隆 | 第50页 |
| ·表达载体的构建 | 第50-52页 |
| ·拟南芥转化及鉴定 | 第52-54页 |
| ·棉花启动子克隆 | 第54-55页 |
| ·RNA 干涉载体的构建 | 第55-59页 |
| ·棉花的遗传转化 | 第59-62页 |
| ·棉花转化过程 | 第59-60页 |
| ·棉花转化愈伤组织的检测 | 第60-62页 |
| 4 讨论 | 第62-64页 |
| ·低酚棉育种方法 | 第62页 |
| ·种子特异性启动子的克隆和分析 | 第62-63页 |
| ·RNA 干涉载体的构建 | 第63-64页 |
| ·RNAi 载体的设计 | 第63页 |
| ·干涉靶基因的选择 | 第63-64页 |
| 5 结论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
