摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-10页 |
第1章 引言 | 第10-13页 |
第2章 材料与方法 | 第13-26页 |
·实验材料 | 第13-15页 |
·实验细胞、重组慢病毒 | 第13页 |
·主要实验试剂 | 第13-14页 |
·主要实验仪器 | 第14-15页 |
·实验方法 | 第15-26页 |
·器材的消毒、灭菌 | 第15页 |
·器材的去 RNA 酶处理 | 第15页 |
·相关实验液体的配制 | 第15-19页 |
·SD 大鼠乳鼠的原代心肌细胞的培养 | 第19页 |
·慢病毒的转染 | 第19-20页 |
·Annexin V-FITC/PI 双染检测细胞凋亡 | 第20页 |
·心肌细胞肌钙蛋白 I 免疫荧光鉴定 | 第20-21页 |
·qRT-PCR 检测各基因 mRNA 的表达 | 第21-23页 |
·Western blot 检测各基因蛋白的表达(ANP32A,BAX,BCL-2) | 第23-24页 |
·MTT 检测心肌细胞的活力 | 第24-25页 |
·统计学处理 | 第25-26页 |
第3章 结果 | 第26-38页 |
·原代心肌细胞的生长特点 | 第26页 |
·心肌细胞的鉴定 | 第26-27页 |
·ANP32A 在心肌细胞中表达 | 第27-28页 |
·ANP32A 基因敲减慢病毒表达载体转染心肌细胞的结果 | 第28-29页 |
·ANP32A 基因敲减慢病毒表达载体转染心肌细胞后 ANP32A 蛋白的表达变化及鉴定结果 | 第29-30页 |
·体外 DOX 诱导心肌细胞凋亡的影响 | 第30-31页 |
·ANP32A 对心肌细胞活力的影响 | 第31-32页 |
·ANP32A 对体外 DOX 诱导心肌细胞凋亡的影响 | 第32-33页 |
·ANP32A 对 BCL-2 及 BAX 蛋白表达的影响 | 第33-34页 |
·MiR-21 基因过表达慢病毒表达载体转染心肌细胞的结果 | 第34-35页 |
·MiR-21 基因过表达慢病毒表达载体转染心肌细胞后 miR-21 的达变化及鉴定结果 | 第35-36页 |
·MiR-21 对 ANP32AmRNA 表达的影响 | 第36-37页 |
·MiR-21 对 ANP32A 蛋白表达的影响 | 第37-38页 |
第4章 讨论 | 第38-43页 |
·ANP32A 在心肌细胞中表达 | 第39页 |
·ANP32A 基因敲减慢病毒表达载体及 miR-21 过表达慢病毒表达载体的鉴定结果及其转染 | 第39页 |
·体外 DOX 诱导的心肌细胞凋亡的影响 | 第39-40页 |
·ANP32A 对体外 DOX 诱导心肌细胞凋亡的影响 | 第40-41页 |
·miR-21 对 ANP32A 表达的影响 | 第41-42页 |
·关于本实验研究的不足和改进 | 第42-43页 |
第5章 结论与展望 | 第43-45页 |
·结论 | 第43页 |
·展望 | 第43-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-49页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第49-50页 |
综述 | 第50-56页 |
参考文献 | 第55-56页 |