烟草抗病相关基因EREBP-4的克隆、表达和功能研究
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-20页 |
| ·我国烟草病虫害概况 | 第9-12页 |
| ·近年我国烟草病虫害发生概况及其特点 | 第9-10页 |
| ·烟草病害类型 | 第10页 |
| ·烟草花叶病、黑颈病及赤星病的特点和防治 | 第10-12页 |
| ·植物转录因子概述 | 第12-13页 |
| ·参与植物抗病反应的转录因子家族 | 第13-18页 |
| ·AP2/ERF 转录因子家族 | 第13-14页 |
| ·NAC 转录因子家族 | 第14-15页 |
| ·WRKY 转录因子家族 | 第15-17页 |
| ·BZIP 转录因子家族 | 第17页 |
| ·MYB 转录因子家族 | 第17-18页 |
| ·烟草 ERF/AP2 家族基因研究概况 | 第18-20页 |
| 2 引言 | 第20-22页 |
| ·研究目的及意义 | 第20页 |
| ·主要研究内容 | 第20-21页 |
| ·研究技术路线 | 第21-22页 |
| 3 烟草 EREBP-4 基因的克隆与分析 | 第22-32页 |
| ·实验材料与试剂 | 第22页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·实验试剂 | 第22页 |
| ·实验方法与步骤 | 第22-26页 |
| ·EREBP-4 基因的电子克隆 | 第22页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第22-23页 |
| ·RNA 的消化 | 第23页 |
| ·反转录反应 | 第23-24页 |
| ·CDNA 检测 | 第24页 |
| ·EREBP-4 基因的 PCR 扩增 | 第24页 |
| ·EREBP-4 基因目的片段的回收 | 第24-25页 |
| ·连接反应 | 第25页 |
| ·连接产物的转化 | 第25页 |
| ·重组质粒的 PCR 鉴定与测序 | 第25-26页 |
| ·阳性克隆质粒的鉴定 | 第26页 |
| ·实验结果与分析 | 第26-30页 |
| ·烟草叶片总 RNA 的提取及检测 | 第26-28页 |
| ·烟草 EREBP-4 基因的克隆与序列分析 | 第28页 |
| ·EREBP-4 基因的同源性分析 | 第28-30页 |
| ·讨论 | 第30-32页 |
| 4 烟草 EREBP-4 基因的表达模式分析 | 第32-37页 |
| ·实验材料与试剂 | 第32页 |
| ·实验方法与步骤 | 第32-33页 |
| ·实验材料的处理和取材方法 | 第32页 |
| ·总 RNA 的提取和 CDNA 的制备 | 第32页 |
| ·半定量 RT-PCR 分析 | 第32-33页 |
| ·实验结果与分析 | 第33-35页 |
| ·总 RNA 的提取和 CDNA 的制备 | 第33页 |
| ·荧光定量 RT-PCR 分析 | 第33-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 5 烟草 EREBP-4 超表达转基因及功能验证 | 第37-47页 |
| ·实验材料与试剂 | 第37页 |
| ·实验方法与步骤 | 第37-41页 |
| ·EREBP-4 超表达载体的构建 | 第37-38页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第38-39页 |
| ·表达载体转化农杆菌 | 第39页 |
| ·转基因的操作流程 | 第39-40页 |
| ·转基因植株的半定量 RT-PCR 分析 | 第40页 |
| ·T1 代转基因烟草的赤星病抗性检测 | 第40页 |
| ·T1 代转基因烟草的烟草花叶病抗性检测 | 第40-41页 |
| ·实验结果与分析 | 第41-46页 |
| ·EREBP-4 超表达载体的构建 | 第41页 |
| ·转基因植株的筛选 | 第41-43页 |
| ·T1 代转基因烟草的赤星病抗性检测 | 第43-45页 |
| ·T1 代转基因烟草的烟草花叶病抗性检测 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| 6 总结与展望 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-62页 |
| 附录 | 第62页 |
