HIV-1整合酶随机突变库的构建
| 致谢 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 缩略词表 | 第10-14页 |
| 1 引言 | 第14-16页 |
| 2 转座酶的表达与纯化 | 第16-30页 |
| ·引言 | 第16页 |
| ·实验仪器与材料 | 第16-19页 |
| ·实验仪器 | 第16-17页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·实验试剂与耗材 | 第17-18页 |
| ·实验溶液 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-27页 |
| ·包含转座酶基因质粒的转化 | 第19-20页 |
| ·转座酶的表达 | 第20-21页 |
| ·转座酶的纯化 | 第21-25页 |
| ·蛋白透析 | 第25-27页 |
| ·结果 | 第27-30页 |
| ·转座酶纯化 | 第27-28页 |
| ·转座酶浓度测定 | 第28-30页 |
| 3 MI片段的获取 | 第30-42页 |
| ·引言 | 第30-31页 |
| ·实验仪器与材料 | 第31-32页 |
| ·实验仪器 | 第31页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·实验试剂与耗材 | 第31-32页 |
| ·实验方法 | 第32-37页 |
| ·MI-Cys质粒全序列信息的获取 | 第32-33页 |
| ·定点突变PCR引物的设计与合成 | 第33页 |
| ·MI-Ala质粒的构建 | 第33-36页 |
| ·MI片段的获得 | 第36-37页 |
| ·结果 | 第37-42页 |
| ·MI-Cys质粒图谱的绘制 | 第37-38页 |
| ·不同MI质粒的构建 | 第38-40页 |
| ·MI片段的获得 | 第40-42页 |
| 4 突变库的构建 | 第42-62页 |
| ·引言 | 第42-43页 |
| ·实验仪器与材料 | 第43-45页 |
| ·实验仪器 | 第43-44页 |
| ·实验材料 | 第44页 |
| ·实验试剂与耗材 | 第44-45页 |
| ·实验溶液 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-55页 |
| ·转座反应 | 第45-50页 |
| ·MI对转座子的替换 | 第50-51页 |
| ·BsgI与BpmI对质粒的消化 | 第51-53页 |
| ·对移码突变或终止密码的筛选 | 第53-55页 |
| ·结果 | 第55-62页 |
| ·转座反应及其效率的检测 | 第55页 |
| ·转座反应质粒的筛选 | 第55-57页 |
| ·BsgI与BpmI对质粒的消化 | 第57-59页 |
| ·FrameCheck | 第59-62页 |
| 5 讨论与总结 | 第62-65页 |
| 6 文献综述 | 第65-79页 |
| ·引言 | 第65-66页 |
| ·HIV-1整合酶的结构 | 第66-68页 |
| ·催化核心域(CCD) | 第66-67页 |
| ·N端结构域(NTD) | 第67-68页 |
| ·C端结构域(CTD) | 第68页 |
| ·HIV-1整合酶的功能 | 第68-71页 |
| ·3'端加工 | 第68-69页 |
| ·链转移反应 | 第69-70页 |
| ·在HIV病毒脱壳中的作用 | 第70页 |
| ·在HIV病毒逆转录过程中的作用 | 第70-71页 |
| ·HIV-1整合酶抑制剂研究进展 | 第71-77页 |
| ·酮酸类抑制剂 | 第73-74页 |
| ·核苷类抑制剂 | 第74-75页 |
| ·天然来源的抑制剂 | 第75页 |
| ·多羟基化的芳香族化合物 | 第75-76页 |
| ·磺化物类抑制剂 | 第76-77页 |
| ·多肽类抑制剂 | 第77页 |
| ·讨论与总结 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-97页 |
| 附录：实验中所用引物序列 | 第97-99页 |
| 作者简介 | 第99页 |
