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冰城链霉菌基因组及戊二酰亚胺类化合物的功能基因簇研究

目录第1-10页
CONTENTS第10-16页
摘要第16-26页
Abstract第26-38页
英文缩略语(Abbreviation)第38-40页
1 前言第40-51页
   ·链霉菌基因组研究概况第40-41页
     ·链霉菌简介第40-41页
     ·链霉菌基因组研究概况第41页
   ·天然产物对新药研发的重要性第41-43页
   ·戊二酰亚胺聚酮类化合物第43-44页
   ·聚酮类化合物的生物合成第44-47页
   ·AT-less I 类聚酮合酶第47-48页
   ·放线菌酮类化合物的作用机制及最新应用第48-49页
   ·课题来源和研究内容及意义第49-51页
     ·课题来源第49页
     ·研究内容及意义第49-51页
2 材料和方法第51-86页
   ·冰城链霉菌基因组结构研究第51-54页
     ·实验材料第51-52页
     ·实验方法第52-54页
   ·Cycloheximide 和 Actiphenol 的生物合成机制研究第54-64页
     ·实验材料第54-57页
     ·实验方法第57-64页
   ·Cycloheximide H 脱氢酶的研究第64-73页
     ·实验材料第64-67页
     ·实验方法第67-73页
   ·Cycloheximide 和 Actiphenol 生物合成基因簇异源表达体系的构建第73-78页
     ·实验材料第73-74页
     ·实验方法第74-78页
   ·chxA 和 mgsA 调控基因在异源表达宿主及本体中的作用第78-86页
     ·实验材料第78-80页
     ·实验方法第80-86页
3 结果与分析第86-130页
   ·冰城链霉菌基因组结构研究第86-96页
     ·前言第86-87页
     ·冰城链霉菌基因组整体结构第87-90页
     ·冰城链霉菌基因组内容与 S.avermitilis, S.coelicolor(A3) and S.griseus 的比较第90-92页
     ·冰城链霉菌基因组次级代谢基因簇的预测第92-96页
   ·Cycloheximide 和 Actiphenol 的生物合成机制研究第96-107页
     ·前言第96-98页
     ·ΔchxI,ΔchxJ,ΔchxG,ΔchxH 基因阻断突变株的筛选鉴定第98-101页
     ·ΔchxI,ΔchxJ,ΔchxG,ΔchxH 基因阻断变株的回复第101-102页
     ·发酵产物的分析鉴定第102-104页
     ·Phenatic acid A 在ΔchxG 突变株发酵过程中的跟踪第104-105页
     ·Cycloheximide 和 Actiphenol 的生物合成途径推测第105-107页
   ·Cycloheximide H 脱氢还原酶的功能鉴定第107-119页
     ·前言第107-108页
     ·底物的合成与鉴定第108-109页
     ·ChxH 蛋白的表达及纯化第109-111页
     ·确定酶反应所需的条件及辅助因子第111-114页
     ·ChxH 的底物选择性第114-115页
     ·酶活动力学分析第115-117页
     ·ChxH 蛋白同源建模及作用机制预测第117-119页
   ·Cycloheximide 和 Actiphenol 生物合成基因簇异源表达体系的构建第119-123页
     ·前言第119-120页
     ·pCHX5-152f 异源表达质粒的构建和验证第120页
     ·异源表达菌株的筛选鉴定第120-121页
     ·异源表达菌株发酵产物的分析鉴定第121-123页
   ·chxA 和 mgsA 调控基因在异源表达宿主及本体中的作用第123-130页
     ·前言第123页
     ·chxA 和 mgsA 基因的分析和获取第123-124页
     ·载体的选择及构建第124-125页
     ·原生质体转化和结合转移及阳性菌株的筛选第125-126页
     ·阳性菌株发酵产物的 HPLC 分析第126-130页
4 结论与建议第130-132页
致谢第132-133页
参考文献第133-140页
附图表第140-149页
攻读博士学位期间发表的学术论文第149-150页

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