目录 | 第1-10页 |
CONTENTS | 第10-16页 |
摘要 | 第16-26页 |
Abstract | 第26-38页 |
英文缩略语(Abbreviation) | 第38-40页 |
1 前言 | 第40-51页 |
·链霉菌基因组研究概况 | 第40-41页 |
·链霉菌简介 | 第40-41页 |
·链霉菌基因组研究概况 | 第41页 |
·天然产物对新药研发的重要性 | 第41-43页 |
·戊二酰亚胺聚酮类化合物 | 第43-44页 |
·聚酮类化合物的生物合成 | 第44-47页 |
·AT-less I 类聚酮合酶 | 第47-48页 |
·放线菌酮类化合物的作用机制及最新应用 | 第48-49页 |
·课题来源和研究内容及意义 | 第49-51页 |
·课题来源 | 第49页 |
·研究内容及意义 | 第49-51页 |
2 材料和方法 | 第51-86页 |
·冰城链霉菌基因组结构研究 | 第51-54页 |
·实验材料 | 第51-52页 |
·实验方法 | 第52-54页 |
·Cycloheximide 和 Actiphenol 的生物合成机制研究 | 第54-64页 |
·实验材料 | 第54-57页 |
·实验方法 | 第57-64页 |
·Cycloheximide H 脱氢酶的研究 | 第64-73页 |
·实验材料 | 第64-67页 |
·实验方法 | 第67-73页 |
·Cycloheximide 和 Actiphenol 生物合成基因簇异源表达体系的构建 | 第73-78页 |
·实验材料 | 第73-74页 |
·实验方法 | 第74-78页 |
·chxA 和 mgsA 调控基因在异源表达宿主及本体中的作用 | 第78-86页 |
·实验材料 | 第78-80页 |
·实验方法 | 第80-86页 |
3 结果与分析 | 第86-130页 |
·冰城链霉菌基因组结构研究 | 第86-96页 |
·前言 | 第86-87页 |
·冰城链霉菌基因组整体结构 | 第87-90页 |
·冰城链霉菌基因组内容与 S.avermitilis, S.coelicolor(A3) and S.griseus 的比较 | 第90-92页 |
·冰城链霉菌基因组次级代谢基因簇的预测 | 第92-96页 |
·Cycloheximide 和 Actiphenol 的生物合成机制研究 | 第96-107页 |
·前言 | 第96-98页 |
·ΔchxI,ΔchxJ,ΔchxG,ΔchxH 基因阻断突变株的筛选鉴定 | 第98-101页 |
·ΔchxI,ΔchxJ,ΔchxG,ΔchxH 基因阻断变株的回复 | 第101-102页 |
·发酵产物的分析鉴定 | 第102-104页 |
·Phenatic acid A 在ΔchxG 突变株发酵过程中的跟踪 | 第104-105页 |
·Cycloheximide 和 Actiphenol 的生物合成途径推测 | 第105-107页 |
·Cycloheximide H 脱氢还原酶的功能鉴定 | 第107-119页 |
·前言 | 第107-108页 |
·底物的合成与鉴定 | 第108-109页 |
·ChxH 蛋白的表达及纯化 | 第109-111页 |
·确定酶反应所需的条件及辅助因子 | 第111-114页 |
·ChxH 的底物选择性 | 第114-115页 |
·酶活动力学分析 | 第115-117页 |
·ChxH 蛋白同源建模及作用机制预测 | 第117-119页 |
·Cycloheximide 和 Actiphenol 生物合成基因簇异源表达体系的构建 | 第119-123页 |
·前言 | 第119-120页 |
·pCHX5-152f 异源表达质粒的构建和验证 | 第120页 |
·异源表达菌株的筛选鉴定 | 第120-121页 |
·异源表达菌株发酵产物的分析鉴定 | 第121-123页 |
·chxA 和 mgsA 调控基因在异源表达宿主及本体中的作用 | 第123-130页 |
·前言 | 第123页 |
·chxA 和 mgsA 基因的分析和获取 | 第123-124页 |
·载体的选择及构建 | 第124-125页 |
·原生质体转化和结合转移及阳性菌株的筛选 | 第125-126页 |
·阳性菌株发酵产物的 HPLC 分析 | 第126-130页 |
4 结论与建议 | 第130-132页 |
致谢 | 第132-133页 |
参考文献 | 第133-140页 |
附图表 | 第140-149页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第149-150页 |