CONTENTS | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-32页 |
·苏云金芽胞杆菌及其多样性 | 第12-17页 |
·苏云金芽胞杆菌 | 第12页 |
·抗原蛋白多样性 | 第12-14页 |
·质粒图谱多样性 | 第14页 |
·Bc-Rep-PCR 图谱多样性 | 第14-15页 |
·gyrB 基因序列分析 | 第15-17页 |
·Bt 主要杀虫活性物质 | 第17-25页 |
·Cry 蛋白及其命名与分类 | 第17-19页 |
·Cry 蛋白结构与功能的关系 | 第19-21页 |
·Cry 蛋白结构域交换与杀虫特异性进化 | 第21-22页 |
·Vip 蛋白 | 第22-23页 |
·其它活性物质 | 第23-25页 |
·新杀虫基因鉴定克隆技术 | 第25-27页 |
·苏云金芽胞杆菌的应用 | 第27-29页 |
·Bt 杀虫剂研究与应用 | 第27-29页 |
·转 Bt 基因植物的研究及应用 | 第29页 |
·立题依据与目的意义 | 第29-32页 |
·立题依据 | 第29-31页 |
·研究目的与意义 | 第31-32页 |
2 实验材料、仪器与方法 | 第32-45页 |
·实验材料 | 第32-36页 |
·菌株和质粒 | 第32-34页 |
·培养基与抗生素 | 第34页 |
·酶类与生化试剂 | 第34-35页 |
·溶液与缓冲液 | 第35-36页 |
·实验仪器 | 第36-37页 |
·实验方法 | 第37-45页 |
·样品采集与菌株分离 | 第37页 |
·菌株晶体的形态观察 | 第37页 |
·分离菌株杀虫活性的初步测定 | 第37-38页 |
·SDS-PAGE 电泳 | 第38页 |
·分离菌株蛋白多样性分析 | 第38-39页 |
·Bt 菌株质粒多样性分析 | 第39页 |
·Bt 基因组提取方法 1 | 第39-40页 |
·Bt 基因组提取方法 2 | 第40页 |
·Bt 基因组提取方法 3 | 第40页 |
·多样性分析引物的设计 | 第40-41页 |
·PCR 扩增反应(多样性分析) | 第41页 |
·酶切反应 | 第41-42页 |
·LabChip 电泳 | 第42-43页 |
·DNA 片段连接 | 第43页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第43-44页 |
·高通量测序序列拼接与基因预测流程 | 第44-45页 |
3 结果与分析 | 第45-70页 |
·样品采集与菌株分离 | 第45-47页 |
·菌株晶体形态多样性 | 第45-46页 |
·分离菌株杀虫活性初步测定 | 第46页 |
·分离菌株蛋白多样性 | 第46-47页 |
·Bt 质粒多样性 | 第47页 |
·Bt 基因组提取技术改良 | 第47-49页 |
·PCR-RFLP 体系优化 | 第49-55页 |
·引物设计与优化 | 第49-51页 |
·引物浓度与退火温度优化 | 第51页 |
·PCR 体系评估 | 第51-55页 |
·Bt 菌株进行多样性分析 | 第55-64页 |
·LabChip 电泳分析 PCR-RFLP 图谱 | 第55页 |
·PCR-RFLP 图谱数字化 | 第55-56页 |
·PCR-RFLP 图谱相似分析 | 第56-59页 |
·PCR-RFLP 图谱的的系统发生树 | 第59-61页 |
·菌株资源多样性统计 | 第61-64页 |
·杀虫基因发掘 | 第64-68页 |
·Bt 菌株多样性分析平台建立 | 第68-70页 |
4 讨论 | 第70-72页 |
5 结论 | 第72-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-85页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第85页 |