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苏云金芽胞杆菌资源多样性分析与杀虫基因发掘

CONTENTS第1-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-32页
   ·苏云金芽胞杆菌及其多样性第12-17页
     ·苏云金芽胞杆菌第12页
     ·抗原蛋白多样性第12-14页
     ·质粒图谱多样性第14页
     ·Bc-Rep-PCR 图谱多样性第14-15页
     ·gyrB 基因序列分析第15-17页
   ·Bt 主要杀虫活性物质第17-25页
     ·Cry 蛋白及其命名与分类第17-19页
     ·Cry 蛋白结构与功能的关系第19-21页
     ·Cry 蛋白结构域交换与杀虫特异性进化第21-22页
     ·Vip 蛋白第22-23页
     ·其它活性物质第23-25页
   ·新杀虫基因鉴定克隆技术第25-27页
   ·苏云金芽胞杆菌的应用第27-29页
     ·Bt 杀虫剂研究与应用第27-29页
     ·转 Bt 基因植物的研究及应用第29页
   ·立题依据与目的意义第29-32页
     ·立题依据第29-31页
     ·研究目的与意义第31-32页
2 实验材料、仪器与方法第32-45页
   ·实验材料第32-36页
     ·菌株和质粒第32-34页
     ·培养基与抗生素第34页
     ·酶类与生化试剂第34-35页
     ·溶液与缓冲液第35-36页
   ·实验仪器第36-37页
   ·实验方法第37-45页
     ·样品采集与菌株分离第37页
     ·菌株晶体的形态观察第37页
     ·分离菌株杀虫活性的初步测定第37-38页
     ·SDS-PAGE 电泳第38页
     ·分离菌株蛋白多样性分析第38-39页
     ·Bt 菌株质粒多样性分析第39页
     ·Bt 基因组提取方法 1第39-40页
     ·Bt 基因组提取方法 2第40页
     ·Bt 基因组提取方法 3第40页
     ·多样性分析引物的设计第40-41页
     ·PCR 扩增反应(多样性分析)第41页
     ·酶切反应第41-42页
     ·LabChip 电泳第42-43页
     ·DNA 片段连接第43页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化第43-44页
     ·高通量测序序列拼接与基因预测流程第44-45页
3 结果与分析第45-70页
   ·样品采集与菌株分离第45-47页
     ·菌株晶体形态多样性第45-46页
     ·分离菌株杀虫活性初步测定第46页
     ·分离菌株蛋白多样性第46-47页
     ·Bt 质粒多样性第47页
   ·Bt 基因组提取技术改良第47-49页
   ·PCR-RFLP 体系优化第49-55页
     ·引物设计与优化第49-51页
     ·引物浓度与退火温度优化第51页
     ·PCR 体系评估第51-55页
   ·Bt 菌株进行多样性分析第55-64页
     ·LabChip 电泳分析 PCR-RFLP 图谱第55页
     ·PCR-RFLP 图谱数字化第55-56页
     ·PCR-RFLP 图谱相似分析第56-59页
     ·PCR-RFLP 图谱的的系统发生树第59-61页
     ·菌株资源多样性统计第61-64页
   ·杀虫基因发掘第64-68页
   ·Bt 菌株多样性分析平台建立第68-70页
4 讨论第70-72页
5 结论第72-73页
致谢第73-74页
参考文献第74-85页
攻读学位期间发表的学术论文第85页

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