| 项目支持 | 第1页 |
| ACKNOWLEDGEMENTS | 第5-6页 |
| 致谢 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略词 | 第12-13页 |
| 目录 | 第13-15页 |
| 1 文献综述 | 第15-42页 |
| ·耐辐射球菌 | 第15-29页 |
| ·耐辐射球菌属概况 | 第15-16页 |
| ·耐辐射球菌的细菌形态、结构 | 第16-17页 |
| ·耐辐射球菌的基因组分析 | 第17-18页 |
| ·耐辐射球菌的极端抗性 | 第18-21页 |
| ·耐辐射球菌的耐受机制 | 第21-28页 |
| ·被动的耐受机制 | 第21-24页 |
| ·主动的修复机制 | 第24-28页 |
| ·耐辐射球菌的生物学应用 | 第28页 |
| ·小结 | 第28-29页 |
| ·蛋白磷酸化/去磷酸化概述 | 第29-42页 |
| ·蛋白磷酸化 | 第30-31页 |
| ·蛋白磷酸化位点组学研究 | 第31-32页 |
| ·蛋白激酶和蛋白磷酸酶的研究 | 第32-39页 |
| ·STK PknB/Stk和STP的Stp拥有一个典型的结构域 | 第33-34页 |
| ·PknB和Stp的生化特性 | 第34页 |
| ·PknB的底物 | 第34-36页 |
| ·PknB和Stp在细胞壁代谢中的作用 | 第36-38页 |
| ·PknB和Stp在致毒性中的作用 | 第38-39页 |
| ·磷酸酶 | 第39页 |
| ·耐辐射球菌中的磷酸化研究概况 | 第39-42页 |
| 2 耐辐射球菌丝氨酸/苏氨酸磷酸激酶家族相关基因突变株的构建 | 第42-64页 |
| ·实验材料与仪器 | 第43页 |
| ·菌株 | 第43页 |
| ·实验试剂、仪器与设备 | 第43页 |
| ·菌株培养 | 第43-44页 |
| ·基因缺失突变菌株的构建 | 第44-49页 |
| ·突变菌株的构建原理 | 第44页 |
| ·突变菌株的构建引物设计 | 第44-45页 |
| ·耐辐射球菌R1基因组的提取 | 第45页 |
| ·PCR法获取三段连接 | 第45-48页 |
| ·三段连接产物转化耐辐射球菌 | 第48-49页 |
| ·突变株的鉴定 | 第49页 |
| ·突变株的电离辐射处理 | 第49页 |
| ·结果和分析 | 第49-62页 |
| ·耐辐射球菌中丝氨酸/苏氨酸磷酸激酶基因 | 第49-50页 |
| ·突变菌株构建的引物列表 | 第50-51页 |
| ·10种丝氨酸/苏氨酸磷酸激酶基因缺失突变株的构建 | 第51-60页 |
| ·~Δdr1243、~Δdr2518、~Δdr2546突变菌株对电离辐射很敏感 | 第60-62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| 3 耐辐射球菌丝氨酸/苏氨酸磷酸激酶家族基因突变株特性分析 | 第64-71页 |
| ·实验材料与设备 | 第64页 |
| ·菌株、材料和试剂 | 第64页 |
| ·仪器与设备 | 第64页 |
| ·实验方法 | 第64-66页 |
| ·生长曲线测定 | 第64-65页 |
| ·菌株UV抗性生存曲线测定 | 第65页 |
| ·菌株H_2O_2抗性生存曲线测定 | 第65页 |
| ·菌株辐照抗性生存曲线测定 | 第65-66页 |
| ·结果与分析 | 第66-70页 |
| ·突变株~Δdr1243,较野生株R1的生长出现了延滞 | 第66页 |
| ·突变株~Δdr2518,较野生株R1的生长出现了延滞 | 第66页 |
| ·突变株~Δdr2546,较野生株R1的生长无显著区别 | 第66-67页 |
| ·突变株~Δdrl243、~Δdr2518和Δdr2546对各种逆境都更为敏感 | 第67-70页 |
| ·讨论 | 第70-71页 |
| 4 耐辐射球菌丝氨酸/苏氨酸磷酸激酶dr1243突变株转录谱分析 | 第71-85页 |
| ·材料与试剂 | 第71-73页 |
| ·耐辐射球菌R1的全基因芯片制备 | 第71-72页 |
| ·RNA抽提、逆转录、芯片杂交及Q-RT-PCR所用试剂 | 第72-73页 |
| ·实验方法 | 第73-76页 |
| ·耐辐射球菌总RNA的分离 | 第73-74页 |
| ·芯片探针的制备 | 第74-75页 |
| ·芯片预杂交和杂交 | 第75-76页 |
| ·芯片扫描及数据分析 | 第76页 |
| ·实时定量PCR | 第76页 |
| ·结果与分析 | 第76-85页 |
| ·在自然生长状态下基因dr1243的缺失导致了众多基因转录水平的下调 | 第76-82页 |
| ·在自然生长状态下基因dr1243的缺失导致RNA连接酶DRB0094表达下调 | 第82页 |
| ·在自然生长状态下基因dr1243的缺失导致Fur蛋白DR0865表达下调 | 第82-85页 |
| 5 总结与展望 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-96页 |
| 已发表论文 | 第96页 |
