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番茄斑萎病毒和番茄环纹斑点病毒细胞病理学及其运动蛋白的研究

致谢第1-7页
目录第7-10页
摘要第10-11页
Summary第11-13页
第一章 文献综述第13-26页
   ·番茄斑萎病毒属病毒分子生物学研究进展第13-17页
     ·番茄斑萎病毒属病毒的分类第13-15页
     ·番茄斑萎病毒属病毒的基因组结构第15-16页
     ·生物学特征第16-17页
   ·病毒细胞间运动模式第17-24页
     ·运动蛋白/核酸(MP/RNA)复合体模式第19-20页
     ·管状结构模式第20-21页
     ·三基因盒模式第21-22页
     ·双生病毒模式第22-24页
   ·选题的意义、研究内容和目标第24-26页
     ·选题的意义第24-25页
     ·研究内容和目标第25-26页
第二章 番茄斑萎病毒和番茄环纹斑点病毒的细胞病理变化比较观察第26-37页
   ·材料和方法第27-29页
     ·材料第27页
       ·病株材料第27页
       ·试剂第27页
       ·仪器第27页
     ·方法第27-29页
       ·常规化学固定和包埋第27-28页
       ·高压冷冻固定和冷冻替代第28页
       ·样品的超薄切片第28页
       ·超薄切片的染色第28-29页
       ·超薄切片的电镜观察第29页
   ·结果与分析第29-35页
     ·化学固定感染TSWV的植物叶细胞病理变化第29-31页
     ·化学固定感染TZSV的植物叶细胞病理变化第31-32页
     ·高压冷冻固定感染TSWV的植物叶细胞病理变化第32-35页
   ·小结与讨论第35-37页
第三章 TSWV和TZSV运动蛋白在植物细胞内的定位第37-49页
   ·材料和方法第37-44页
     ·材料第37-38页
     ·方法第38-44页
       ·病毒的接种第38页
       ·病毒基因组的抽提第38-39页
       ·cDNA第一链合成第39页
       ·TSWV和TZSV NSm目的片段的获得第39-40页
       ·DNA克隆技术第40-41页
       ·重组质粒的提取和鉴定第41-42页
       ·重组表达载体导入农杆菌C58C1第42-43页
       ·农杆菌培养和浸润第43页
       ·激光共聚焦显微镜观察第43-44页
   ·结果与分析第44-47页
     ·重组质粒构建的鉴定结果第44页
     ·NSm在本氏烟表皮细胞内的定位第44-47页
   ·小结与讨论第47-49页
第四章 TSWV和TZSV运动蛋白在昆虫细胞内的表达第49-59页
   ·材料和方法第50-52页
     ·材料第50页
     ·方法第50-52页
       ·PCR扩增目的基因第50页
       ·重组病毒的构建第50-52页
       ·Lipofectin介导重组病毒转染昆虫细胞第52页
       ·感染昆虫细胞第52页
       ·激光共聚焦显微镜观察第52页
   ·结果与分析第52-57页
     ·Bacmid-NSm的构建第52-53页
     ·NSm在昆虫Tn细胞内的表达第53-56页
     ·TSWV和TZSV序列比对结果第56-57页
   ·小结与讨论第57-59页
第五章 TSWV和TZSV运动蛋白的原核表达及抗体制备第59-71页
   ·材料与方法第59-65页
     ·材料第59页
     ·方法第59-65页
       ·常规PCR反应第59-60页
       ·原核表达载体的构建第60页
       ·目的基因在大肠杆菌中的表达第60-61页
       ·表达产物在变性条件下的纯化第61-62页
       ·重组蛋白的SDS-PAGE分析第62-63页
       ·多克隆抗体的制备第63-64页
       ·Western印迹分析第64-65页
   ·结果与分析第65-70页
     ·TSWV、TZSV NSm基因的克隆和原核表达载体的构建第65页
     ·TSWV、TZSV运动蛋白的原核表达第65-67页
     ·TSWV、TZSV运动蛋白的大量表达及纯化第67-70页
   ·小结与讨论第70-71页
全文小结第71-73页
参考文献第73-78页
附录A 本论文中所用缩写与中英文对照第78-81页
附录B:常用试剂的配制第81-86页
附录C:常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器第86-87页

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