| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-27页 |
| ·细胞色素P450研究现状 | 第10-18页 |
| ·细胞色素P450 | 第10-11页 |
| ·细胞色素P450的结构功能研究 | 第11-13页 |
| ·细胞色素P450酶系与除草剂代谢 | 第13-18页 |
| ·cyp51基因研究进展 | 第18-20页 |
| ·简述cyp51基因 | 第18页 |
| ·CYP51蛋白的结构与功能研究 | 第18-20页 |
| ·启动子功能研究概况 | 第20-25页 |
| ·启动子特点 | 第21页 |
| ·上游启动子元件 | 第21页 |
| ·启动子克隆 | 第21-23页 |
| ·启动子功能鉴定 | 第23-25页 |
| ·本研究的目的意义 | 第25-27页 |
| 第二章 玉米黑粉菌上游启动子克隆及功能分析鉴定 | 第27-47页 |
| ·实验材料 | 第27-28页 |
| ·菌株和质粒 | 第27页 |
| ·化学试剂,工具酶与试剂盒 | 第27页 |
| ·主要缓冲液 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-36页 |
| ·基因组DNA的提取、纯化和质量鉴定 | 第28-29页 |
| ·cyp51基因的扩增 | 第29-30页 |
| ·染色体步移技术获得玉米黑粉菌cyp51基因上游调控序列区 | 第30-32页 |
| ·生物信息学软件分析上游调控序列 | 第32页 |
| ·重组质粒pET-Um-GFP的构建 | 第32-33页 |
| ·重组质粒pET-Um-GFP的表白优化与检测 | 第33-34页 |
| ·重组质粒pGL-Um的构建 | 第34-35页 |
| ·细胞培养与重组质粒pGL-Um的转染 | 第35页 |
| ·细胞抽提物的制备和荧光素酶的活性检测 | 第35-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-44页 |
| ·玉米黑粉菌基因组DNA分离与鉴定 | 第36-38页 |
| ·细胞色素P450基因(cyp51)5′-上游调控区序列的获得 | 第38-39页 |
| ·P450基因cyp515′上游调控区序列的分析 | 第39-40页 |
| ·玉米黑粉菌cyp51基因启动子报告基因的构建 | 第40-41页 |
| ·启动子功能检测 | 第41-44页 |
| ·讨论 | 第44-47页 |
| 第三章 重组真菌细胞色素P450nor2表达条件的优化 | 第47-51页 |
| ·实验材料 | 第47-48页 |
| ·菌种和质粒 | 第47页 |
| ·化学试剂,工具酶与试剂盒 | 第47页 |
| ·主要缓冲液 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48页 |
| ·重组蛋白pET-P450nor2的表达条件优化 | 第48页 |
| ·重组蛋白pET-P450nor2的分离纯化 | 第48页 |
| ·结果与讨论 | 第48-51页 |
| ·重组蛋白pET-P450nor2的表达及条件优化 | 第48-50页 |
| ·Ni-NTA亲和层析柱分离纯化重组蛋白pET-P450nor2 | 第50页 |
| ·同源模建及功能分析 | 第50-51页 |
| 小结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 硕士期间发表论文 | 第58页 |
| 衷心感谢以下基金资助 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
