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茶树遗传转化体系的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 文献综述第10-17页
   ·茶树组织培养与物种改良第10-16页
     ·茶树组织培养第10-12页
     ·基因工程研究进展第12-13页
     ·反义 RNA 技术的研究进展第13-14页
     ·茶树遗传转化的研究进展第14-16页
   ·野葛组织培养及其次生代谢产物第16-17页
     ·野葛组织培养第16页
     ·野葛次级代谢产物第16-17页
2 引言第17-20页
   ·研究目的与意义第17-18页
   ·研究内容第18页
   ·技术路线第18-20页
3 咖啡碱合成酶(TCS)基因 RNAI 载体构建第20-30页
   ·材料与方法第20-27页
     ·材料第20页
     ·菌株和载体第20页
     ·试剂第20页
     ·仪器设备第20页
     ·茶树咖啡碱合成酶(TCS)基因 RNAI 载体构建第20-26页
       ·培养基的配制第20-21页
       ·试剂的配制第21页
       ·茶树总RNA的提取第21-22页
       ·咖啡碱合成酶(TCS)基因的反转录第22页
       ·茶树咖啡碱合成酶(TCS)基因片段的 PCR 扩增第22-23页
       ·PCR 产物的回收、克隆与测序第23-24页
       ·构建干涉表达载体第24-26页
     ·茶树咖啡碱合成酶(TCS)基因 RNAI 载体转化农杆菌第26-27页
   ·结果分析第27-30页
     ·茶树咖啡碱合成酶(TCS)基因干涉片段和 YYT 片段的 PCR 扩增第27页
     ·茶树咖啡碱合成酶(TCS)基因干涉载体的构建第27-30页
4 茶树遗传转化体系研究第30-40页
   ·材料第30页
     ·试验材料第30页
     ·质粒与菌株第30页
     ·主要试剂第30页
     ·主要仪器第30页
   ·方法第30-31页
     ·茶树叶片对潮霉素的敏感性试验第30页
     ·农杆菌介导的转化第30-31页
     ·选择培养第31页
   ·结果与分析第31-40页
     ·潮霉素浓度对茶树叶片成活力的影响第31-32页
     ·预培养时间对 GUS 表达率的影响第32-33页
     ·菌液浓度和侵染时间对 GUS 表达率的影响第33-38页
     ·共培养时间对 GUS 表达率的影响第38-40页
5 野葛愈伤组织提取物体外清除自由基活性的研究第40-45页
   ·材料第40页
     ·试验材料第40页
     ·仪器与试剂第40页
   ·方法第40-42页
     ·野葛愈伤组织的培养和继代第40页
     ·野葛愈伤组织和野葛根样中总黄酮的提取第40页
     ·野葛愈伤组织提取物对 1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH·)自由基清除作用的测定第40页
     ·野葛愈伤组织提取物对羟自由基(·OH)清除作用的测定第40-41页
     ·野葛愈伤组织提取物对超氧阴离子自由基(O2-·)清除作用的测定第41页
     ·野葛愈伤组织和根提取物中异黄酮组分的 HPLC 分析第41-42页
   ·结果与分析第42-45页
     ·野葛愈伤组织提取物对 1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH·)自由基清除作用第42页
     ·野葛愈伤组织提取物对羟自由基(·OH)清除作用第42页
     ·野葛愈伤组织提取物对超氧阴离子自由基(O2-·)清除作用第42-43页
     ·野葛愈伤组织和根提取物中异黄酮组分的比较分析第43-45页
6 讨论第45-47页
   ·构建咖啡碱合成酶 RNAI 载体第45页
   ·优化茶树遗传转化体系第45-46页
     ·影响茶树叶片遗传转化的因素第45-46页
     ·叶片愈伤组织的形成以及植株的再生第46页
   ·葛根愈伤组织提取物的抗氧化性第46-47页
7 结论第47-48页
参考文献第48-54页
致谢第54-55页
作者简介第55页

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