| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-15页 |
| 1. 漆酶的性质、催化机理及功能 | 第9-13页 |
| ·漆酶的来源及分布 | 第9页 |
| ·漆酶的性质 | 第9-11页 |
| ·漆酶的结构与活性中心 | 第9页 |
| ·漆酶的理化性质 | 第9-10页 |
| ·漆酶的催化底物 | 第10页 |
| ·漆酶的催化机理 | 第10-11页 |
| ·漆酶的功能 | 第11-13页 |
| ·环境保护 | 第11-12页 |
| ·漆酶对木质素的降解 | 第11页 |
| ·漆酶对废水及有害物质的处理 | 第11-12页 |
| ·漆酶对染料的脱色处理 | 第12页 |
| ·医疗卫生 | 第12-13页 |
| ·化学合成 | 第13页 |
| ·灵芝漆酶 | 第13页 |
| 2. 本论文主要研究目的、内容及意义 | 第13-15页 |
| ·研究目的 | 第13页 |
| ·研究内容 | 第13页 |
| ·研究意义 | 第13-15页 |
| 第二章 GlLCCⅠ基因的合成、表达及纯化 | 第15-29页 |
| 1. 材料与方法 | 第15-25页 |
| ·实验材料 | 第15-16页 |
| ·引物设计及PCR | 第16-21页 |
| ·克隆与序列分析 | 第21页 |
| ·GlLCCⅠ基因异源表达和纯化 | 第21-25页 |
| ·GlLCCⅠ基因转化入毕赤酵母 | 第21-22页 |
| ·GlLCCⅠ基因胞外表达及纯化 | 第22-23页 |
| ·灵芝漆酶SDS-PAGE及蛋白定量 | 第23-25页 |
| ·灵芝漆酶SDS-PAGE电泳 | 第23-24页 |
| ·灵芝漆酶蛋白定量 | 第24-25页 |
| 2 结果与分析 | 第25-27页 |
| ·GlLCCⅠ基因的合成 | 第25-26页 |
| ·GlLCCⅠ基因的电击转化与表达 | 第26页 |
| ·灵芝漆酶蛋白的纯化与定量 | 第26-27页 |
| 3. 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 灵芝漆酶酶学性质的研究 | 第29-37页 |
| 1 材料与方法 | 第29-31页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·常用储备液及配法 | 第29页 |
| ·灵芝漆酶的最适pH和温度 | 第29页 |
| ·灵芝漆酶对两种不同底物特异性的研究 | 第29-30页 |
| ·灵芝漆酶对ABTS饱和曲线的绘制及米氏方程 | 第30页 |
| ·灵芝漆酶对愈疮木酚饱和曲线的绘制及米氏方程 | 第30页 |
| ·灵芝漆酶对pH与温度稳定性的测量 | 第30页 |
| ·金属离子对灵芝漆酶的影响 | 第30-31页 |
| ·不同有机、无机化合物对漆酶活性的影响 | 第31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-35页 |
| ·灵芝漆酶的最适pH和最适温度 | 第31页 |
| ·对两种底物特异性的研究及米氏方程 | 第31-33页 |
| ·以ABTS为底物的饱和曲线绘制及米氏方程 | 第31-32页 |
| ·愈疮木酚饱和曲线的绘制及米氏方程 | 第32-33页 |
| ·灵芝漆酶的温度稳定性与pH稳定性 | 第33页 |
| ·不同浓度金属离子对漆酶活性的影响 | 第33-34页 |
| ·有机、无机化合物对灵芝漆酶活性的影响 | 第34-35页 |
| 3 讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 灵芝漆酶对染料降解的研究 | 第37-50页 |
| 1. 灵芝漆酶对四种染料的降解 | 第37-47页 |
| ·实验材料与方法 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-47页 |
| ·甲基橙、孔雀石绿、结晶紫、亮绿化学结构、全波长扫描及吸光度特性分析 | 第38-40页 |
| ·漆酶对不同浓度染料降解的作用 | 第40-41页 |
| ·不同pH对漆酶降解染料的影响 | 第41-42页 |
| ·不同温度与不同作用时间对染料降解的影响 | 第42-43页 |
| ·不同金属离子对漆酶降解染料的影响 | 第43-44页 |
| ·灵芝漆酶对染料降解程度的HPLC检测 | 第44-47页 |
| 2. 讨论 | 第47-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |