摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
目录 | 第7-10页 |
前言 | 第10-12页 |
第一章 绪论 | 第12-25页 |
·药物基因组学研究概述 | 第12-14页 |
·药物基因组学 | 第12页 |
·基因多态性与药物效应 | 第12-13页 |
·药物基因组学的研究方法 | 第13页 |
·药物基因组学的应用 | 第13-14页 |
·CYP2A6基因多态性代谢替加氟的研究进展 | 第14-20页 |
·细胞色素P450酶 | 第14-15页 |
·CYP2A6的基因结构 | 第15页 |
·CYP2A6代谢底物 | 第15-17页 |
·CYP2A6基因多态性 | 第17-19页 |
·CYP2A6基因多态性与替加氟的代谢 | 第19-20页 |
·TYMS基因表达检测与替加氟的研究进展 | 第20-23页 |
·TYMS基因表达与替加氟的研究进展 | 第20-22页 |
·TYMS表达检测方法的进展 | 第22-23页 |
·立题背景与意义 | 第23-25页 |
第二章 体外CYP2A6多态性对替加氟代谢影响的研究 | 第25-42页 |
·材料 | 第25-28页 |
·菌株和质粒 | 第25-26页 |
·主要试剂 | 第26页 |
·培养基 | 第26-27页 |
·主要溶剂 | 第27-28页 |
·主要仪器 | 第28页 |
·实验方法 | 第28-35页 |
·pYES2/CT-CYP2A6克隆菌株的构建 | 第28-32页 |
·pYES2/CT-CYP2A6表达菌株的构建 | 第32页 |
·目的蛋白的诱导表达和鉴定 | 第32-34页 |
·替加氟在CYP2A6重组酶中代谢速率的测定 | 第34-35页 |
·实验结果 | 第35-40页 |
·CYP2A6克隆菌株的构建 | 第35-37页 |
·CYP2A6微粒体的鉴定 | 第37-40页 |
·讨论 | 第40-42页 |
第三章 TYMS mRNA表达检测方法摸索及优化 | 第42-56页 |
·材料 | 第42-44页 |
·材料 | 第42页 |
·主要试剂 | 第42-43页 |
·主要溶液与培养基 | 第43-44页 |
·主要仪器 | 第44页 |
·实验方法 | 第44-49页 |
·Taqman探针定量PCR原理 | 第44-45页 |
·探针的设计、溶解与保存 | 第45-46页 |
·Trizol法提取总RNA及鉴定 | 第46-47页 |
·用DNase Ⅰ处理提取的总RNA | 第47页 |
·反转录 | 第47-48页 |
·Real-time PCR | 第48页 |
·数据分析 | 第48-49页 |
·TYMS mRNA检测标准曲线的构建 | 第49-53页 |
·设计引物 | 第49页 |
·克隆片段的扩增 | 第49-50页 |
·加A反应 | 第50页 |
·连接与转化 | 第50页 |
·阳性克隆的鉴定 | 第50-51页 |
·TYMS mRNA检测标准曲线条件优化 | 第51-53页 |
·TYMS mRNA表达检测方法的确定及临床病人样本检测 | 第53-55页 |
·精密度检测 | 第53-54页 |
·临床病人样本检测 | 第54-55页 |
·讨论 | 第55-56页 |
全文小结 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
攻读硕士学位期间取得的学术成果 | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |