猪细小病毒VP2蛋白亲和肽的筛选与鉴定
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-20页 |
| ·猪细小病毒病的历史背景 | 第11页 |
| ·猪细小病毒病的流行病学特点 | 第11-12页 |
| ·猪细小病毒病原学研究 | 第12-13页 |
| ·形态和理化特性 | 第12页 |
| ·PPV的血凝性 | 第12页 |
| ·PPV的细胞培养特性 | 第12-13页 |
| ·猪细小病毒毒株分型 | 第13页 |
| ·PPV分子生物学研究 | 第13-14页 |
| ·PPV结构蛋白 | 第14页 |
| ·PPV的非结构蛋白 | 第14页 |
| ·猪细小病毒病疫苗研究进展 | 第14-16页 |
| ·灭活疫苗 | 第15页 |
| ·弱毒疫苗 | 第15页 |
| ·基因工程疫苗 | 第15-16页 |
| ·噬菌体展示技术的研究进展 | 第16-19页 |
| ·噬菌体展示技术基本原理 | 第16-18页 |
| ·噬菌体展示技术的应用 | 第18-19页 |
| ·研究目的与意义 | 第19-20页 |
| 2 试验材料与方法 | 第20-36页 |
| ·试验材料 | 第20-22页 |
| ·实验动物与细胞 | 第20页 |
| ·菌种与载体 | 第20页 |
| ·工具酶、试剂盒和抗体试剂 | 第20页 |
| ·试验试剂配制 | 第20-21页 |
| ·主要药品及试剂 | 第21页 |
| ·仪器设备 | 第21-22页 |
| ·试验方法 | 第22-36页 |
| ·VP2原核表达载体的构建 | 第22-24页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第24-26页 |
| ·重组质粒VP2-pET-32a的诱导表达 | 第26-28页 |
| ·VP2多克隆抗体的制备 | 第28页 |
| ·多克隆抗体的效价及生物活性的检测 | 第28-30页 |
| ·噬菌体随机十二肽库对靶分子亲和配体的生物淘选 | 第30-32页 |
| ·结合克隆的特征鉴定 | 第32-34页 |
| ·所选多肽配体共有氨基酸序列的推导及合成 | 第34页 |
| ·淘选多肽的生物活性鉴定 | 第34-36页 |
| 3 试验结果 | 第36-50页 |
| ·猪细小病毒VP2原核表达载体的构建 | 第36-37页 |
| ·VP2基因的亚克隆 | 第36页 |
| ·重组质粒VP2-pET32a的鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组蛋白的表达及活性鉴定 | 第37-39页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第37-38页 |
| ·Western Blot检测重组蛋白 | 第38-39页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第39-40页 |
| ·VP2多克隆抗体生物活性的检测 | 第40-42页 |
| ·VP2多克隆抗体效价的测定 | 第40页 |
| ·VP2多克隆血清特异性检测 | 第40-42页 |
| ·噬菌体十二肽库对VP2重组蛋白的生物淘选 | 第42-50页 |
| ·噬菌体十二肽库对靶分子的淘选结果 | 第42-46页 |
| ·合成肽的生物活性检测结果 | 第46-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| ·VP2原核表达载体及宿主表达菌的选择 | 第50-51页 |
| ·重组蛋白表达条件及蛋白纯化与复性 | 第51页 |
| ·VP2蛋白亲和肽的筛选与鉴定 | 第51-52页 |
| ·VP2蛋白亲和肽的鉴定与功能分析 | 第52-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第60页 |
