表达1型鸭肝炎病毒VP1基因重组鸭肠炎病毒的构建及其生物学特性初步研究
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-17页 |
| ·鸭肝炎病毒概述 | 第11-13页 |
| ·DVH-1流行特点 | 第11页 |
| ·DHV-1病原学特点 | 第11-12页 |
| ·DHV VP1基因研究进展 | 第12页 |
| ·DHV-1疫苗的研究进展 | 第12-13页 |
| ·鸭病毒性肠炎概述 | 第13-16页 |
| ·DEV分子生物学研究 | 第13-14页 |
| ·US4基因研究进展 | 第14页 |
| ·疱疹病毒载体研究进展 | 第14-16页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-27页 |
| ·材料 | 第17-18页 |
| ·试验动物 | 第17页 |
| ·质粒、载体、菌株、和毒株 | 第17页 |
| ·主要试剂及抗体 | 第17页 |
| ·主要仪器设备 | 第17-18页 |
| ·引物设计与合成 | 第18页 |
| ·方法 | 第18-27页 |
| ·DHV VP1基因的克隆及原核表达 | 第18-21页 |
| ·兔抗DHV VP1多克隆抗体的制备 | 第21页 |
| ·兔抗DHV VP1多克隆抗体的反应性鉴定 | 第21页 |
| ·兔抗DHV VP1多克隆抗体效价的测定 | 第21页 |
| ·重组病毒转移载体的构建 | 第21-24页 |
| ·重组病毒的筛选 | 第24-25页 |
| ·重组病毒的鉴定 | 第25-26页 |
| ·重组病毒生物学性状初步研究 | 第26-27页 |
| 3 结果 | 第27-46页 |
| ·DHV VP1基因的克隆及原核表达 | 第27-29页 |
| ·DHV VP1基因表达载体的构建 | 第27-28页 |
| ·原核表达产物的分析与鉴定 | 第28-29页 |
| ·多克隆抗体的反应原性鉴定 | 第29页 |
| ·重组病毒转移载体的构建 | 第29-37页 |
| ·VP1表达盒的构建 | 第29-31页 |
| ·EGFP表达盒的构建 | 第31-32页 |
| ·GPT表达盒的构建 | 第32-33页 |
| ·同源臂的克隆 | 第33-35页 |
| ·重组病毒转移载体的构建 | 第35-37页 |
| ·重组病毒的构建与筛选 | 第37页 |
| ·重组病毒的鉴定 | 第37-46页 |
| ·重组病毒的PCR鉴定 | 第37-38页 |
| ·重组病毒的western blot鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组病毒的间接免疫荧光鉴定 | 第39页 |
| ·重组病毒生物学特性的初步研究 | 第39-46页 |
| 4 讨论 | 第46-49页 |
| ·病毒载体的选择 | 第46页 |
| ·外源基因的选择 | 第46-47页 |
| ·DHV VP1基因的克隆及原核表达 | 第47页 |
| ·外源基因插入位点的选择 | 第47页 |
| ·重组病毒的筛选 | 第47页 |
| ·重组病毒生物学特性初步研究 | 第47-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第56页 |
