| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-27页 |
| ·哺乳动物细胞培养技术在生物医药上开发和工业生产中的应用 | 第11-12页 |
| ·动物细胞培养发展史 | 第11页 |
| ·利用动物细胞技术在生物医药中的发展优势 | 第11-12页 |
| ·动物细胞高密度悬浮培养的关键技术 | 第12-23页 |
| ·高表达细胞胞株的获得 | 第12-14页 |
| ·细胞培养基的个性化和优化 | 第14-15页 |
| ·细胞培养工艺技术研究 | 第15-23页 |
| ·GS-CHO细胞生产TNFR-Fc融合蛋白概述 | 第23-26页 |
| ·GS-CHO细胞 | 第23-25页 |
| ·TNFR-Fc融合蛋白 | 第25-26页 |
| ·本文的研究内容、目的及意义 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-32页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·细胞株 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·细胞培养系统和培养方法 | 第27-28页 |
| ·种子细胞培养 | 第27页 |
| ·反应器中的葡萄糖和谷氨酰胺两阶段培养 | 第27-28页 |
| ·平行摇瓶培养 | 第28页 |
| ·反应器中的两阶段流加补料培养 | 第28页 |
| ·测定和分析方法 | 第28-32页 |
| ·细胞计数 | 第28-29页 |
| ·营养物和代谢副产物浓度测定 | 第29页 |
| ·融合蛋白浓度测定 | 第29页 |
| ·融合蛋白糖基化及活性鉴定 | 第29-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-51页 |
| ·流加培养中葡萄糖、谷氨酰胺浓度的确定 | 第32-35页 |
| ·葡萄糖浓度限制实验 | 第32-33页 |
| ·谷氨酰胺浓度限制实验 | 第33-35页 |
| ·葡萄糖和谷氨酰胺两阶段培养营养物消耗和副产物与融合蛋白表达 | 第35-36页 |
| ·平行摇瓶结果 | 第36-43页 |
| ·维生素对细胞生长和蛋白表达的影响 | 第37-38页 |
| ·脂类对细胞生长和蛋白表达的影响 | 第38页 |
| ·GS对细胞生长和蛋白表达的影响 | 第38-39页 |
| ·腐胺对细胞生长和蛋白表达的影响 | 第39-40页 |
| ·乙醇胺对细胞生长和蛋白表达的影响 | 第40-41页 |
| ·柠檬酸铁与丁酸钠对细胞生长和蛋白表达的影响 | 第41-43页 |
| ·两阶段动态流加培养结果 | 第43-50页 |
| ·流加培养基设计——理性设计方法 | 第43-46页 |
| ·两阶段动态流加培养细胞生长和融合蛋白表达 | 第46-48页 |
| ·两阶段动态流加培养过程中营养物质消耗情况 | 第48-50页 |
| ·融合蛋白糖基化及活性鉴定结果 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| ·关于葡萄糖和谷氨酰胺两阶段培养 | 第51页 |
| ·关于平行摇瓶培养 | 第51页 |
| ·关于葡萄糖和谷氨酰胺两阶段动态流加培养 | 第51-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第62页 |