| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-28页 |
| ·禽流感概述 | 第12-20页 |
| ·禽流感与高致病性禽流感 | 第12-15页 |
| ·禽流感的诊断与防制 | 第15-19页 |
| ·禽流感的流行动态 | 第19-20页 |
| ·禽流感病毒 | 第20-26页 |
| ·禽流感单克隆抗体的制备情况 | 第26-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-54页 |
| ·实验材料 | 第28-36页 |
| ·实验仪器 | 第28-29页 |
| ·主要试剂及其配制 | 第29-36页 |
| ·实验方法 | 第36-54页 |
| ·基因工程表达载体的构建 | 第36-44页 |
| ·重组工程菌 BL21/HA1 蛋白的表达和最佳条件摸索 | 第44-46页 |
| ·pET-28a(+)-HA1/BL21(DE3)可溶性His-Tag 融合蛋白的纯化 | 第46-50页 |
| ·目的蛋白的Western Blot 鉴定 | 第50-52页 |
| ·pET-28a(+)/HA1 融合蛋白的活性检测及其初步应用 | 第52-54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-64页 |
| ·目的基因PCR 扩增结果 | 第54-55页 |
| ·HA1 基因PCR 扩增产物 | 第54页 |
| ·HA1 基因PCR 扩增产物和pET-28a(+)双酶切产物的琼脂糖凝胶回收 | 第54-55页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第55-56页 |
| ·HA1 基因重组子的PCR 和双酶切鉴定 | 第55-56页 |
| ·pET-28a(+)/HA1 融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达鉴定结果 | 第56页 |
| ·重组质粒的测序鉴定 | 第56-57页 |
| ·PET-28A(+)/HA1 融合蛋白在大肠杆菌 BL21(DE3)中的最佳表达条件摸索 | 第57-58页 |
| ·pET-28a(+)/HA1 融合蛋白在不同IPTG 浓度下的诱导表达 | 第57页 |
| ·pET-28a(+)/HA1 融合蛋白经过不同诱导时间的表达 | 第57-58页 |
| ·pET-28a(+)/HA1 融合蛋白在不同诱导温度下的表达 | 第58页 |
| ·表达蛋白的鉴定 | 第58-59页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第59-64页 |
| ·亲和层析纯化 | 第59-60页 |
| ·包涵体纯化 | 第60-61页 |
| ·离子交换层析和分子筛纯化 | 第61-63页 |
| ·HA1 蛋白活性试验结果 | 第63-64页 |
| 4 讨论与结论 | 第64-70页 |
| ·讨论 | 第64-69页 |
| ·目的基因片段的的扩增 | 第64页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第64-65页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第65-66页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第66-68页 |
| ·融合蛋白活性的测定 | 第68-69页 |
| ·结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 附录 | 第76-77页 |
