文献综述 | 第1-30页 |
·脂蛋白酯酶概述 | 第8-9页 |
·脂蛋白酯酶的结构和功能 | 第9-10页 |
·脂蛋白酯酶的基因结构 | 第10-12页 |
·脂蛋白脂酶的生物学特点 | 第12-14页 |
·脂蛋白酯酶的酶反应动力学机制 | 第14-17页 |
·脂蛋白酯酶的调节 | 第17-18页 |
·脂蛋白酯酶的化学修饰 | 第18-19页 |
·脂蛋白酯酶与高TG血症 | 第19-23页 |
·脂蛋白酯酶致动脉粥样硬化作用 | 第23-25页 |
·脂蛋白酯酶与胰岛素抵抗 | 第25-26页 |
·参考文献 | 第26-30页 |
实验部分 | 第30-99页 |
一 产脂蛋白酯酶菌株的筛选及鉴定 | 第30-42页 |
中文摘要 | 第30页 |
英文摘要 | 第30页 |
前言 | 第30-31页 |
1 试验材料 | 第31-32页 |
·菌种 | 第31页 |
·培养基 | 第31-32页 |
·试剂 | 第32页 |
·主要仪器 | 第32页 |
2 试验方法 | 第32-36页 |
·菌体培养 | 第32页 |
·酶液提取 | 第32-33页 |
·脂蛋白脂酶活力的测定 | 第33页 |
·菌株鉴定 | 第33-36页 |
3 结果与分析 | 第36-39页 |
·产脂蛋白酯酶菌株的筛选 | 第36-37页 |
·菌株的鉴定 | 第37-39页 |
4 讨论 | 第39页 |
5 参考文献 | 第39-42页 |
二 产脂蛋白酯酶菌种的发酵培养条件优化 | 第42-61页 |
中文摘要 | 第42页 |
英文摘要 | 第42-43页 |
前言 | 第43页 |
1 试验材料 | 第43-44页 |
·菌种 | 第43页 |
·培养基 | 第43页 |
·试剂 | 第43-44页 |
·主要仪器 | 第44页 |
2 实验方法 | 第44-48页 |
·菌体培养 | 第44页 |
·无细胞粗酶液的提取 | 第44-45页 |
·脂蛋白酯酶活力的测定 | 第45页 |
·产脂蛋白酯酶菌株的诱导 | 第45页 |
·各种诱导底物对酶形成的影响 | 第45页 |
·最适诱导底物含量对酶形成的影响 | 第45-46页 |
·交实验碳源、单一氮源和单一金属离子对酶形成的影响 | 第46页 |
·正交实验适合碳源、单一氮源和单一金属离子含量对酶形成的影响 | 第46页 |
·正交实验复合氮源及含量对酶形成的影响 | 第46页 |
·产酶发酵曲线的确定 | 第46-47页 |
·温度对酶形成的影响 | 第47页 |
·发酵初始pH对酶形成的影响 | 第47页 |
·通气量对酶形成的影响 | 第47页 |
·接种量对酶形成的影响 | 第47页 |
·菌种种龄对产酶量的影响 | 第47页 |
·旋转摇床速度对酶形成的影响 | 第47-48页 |
·金属离子对酶形成的影响 | 第48页 |
·正交实验复合金属离子含量对酶形成的影响 | 第48页 |
·交叉实验表面活性剂及含量对酶形成的影响 | 第48页 |
3 结果与分析 | 第48-60页 |
·产脂蛋白酯酶菌种的诱导 | 第48-49页 |
·各种诱导底物对酶形成的影响 | 第49-50页 |
·最适诱导底物含量对酶形成的影响 | 第50页 |
·正交实验碳源、单一氮源和单一金属离子对酶形成的影响 | 第50-51页 |
·正交实验适合碳源、单一氮源和单一金属离子含量对酶形成的影响 | 第51-52页 |
·正交实验复合氮源及含量对酶形成的影响 | 第52-53页 |
·产酶发酵曲线的确定 | 第53-54页 |
·温度对酶形成的影响 | 第54-55页 |
·发酵初始pH对酶形成的影响 | 第55页 |
·通气量对酶形成的影响 | 第55-56页 |
·接种量对酶形成的影响 | 第56-57页 |
·菌种种龄对产酶量的影响 | 第57页 |
·旋转摇床速度对酶形成的影响 | 第57-58页 |
·金属离子对酶形成的影响 | 第58页 |
·正交实验复合金属离子含量对酶形成的影响 | 第58-59页 |
·交叉实验表面活性剂及含量对酶形成的影响 | 第59-60页 |
4 讨论 | 第60页 |
5 参考文献 | 第60-61页 |
三 酶的分离纯化和鉴定 | 第61-81页 |
中文摘要 | 第61页 |
英文摘要 | 第61页 |
前言 | 第61-62页 |
1 试验材料 | 第62-63页 |
·菌种 | 第62页 |
·试剂 | 第62页 |
·主要仪器 | 第62-63页 |
·培养基 | 第63页 |
2 实验方法 | 第63-73页 |
·脂蛋白酯酶活力的测定 | 第63-64页 |
·蛋白质浓度的测定 | 第64-66页 |
·缓冲液的配制 | 第66-67页 |
·菌体培养 | 第67页 |
·无细胞粗酶液的提取 | 第67页 |
·发酵粗酶液的浓缩 | 第67页 |
·粗酶制品的硫酸铵沉淀初级分离 | 第67-68页 |
·脱盐 | 第68页 |
·DEAE-Sepharose F.F.层析 | 第68-69页 |
·Phenyl Sepharose CL-4B层析 | 第69-70页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第70-72页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第72-73页 |
·HPLC鉴定纯度 | 第73页 |
3 结果与分析 | 第73-79页 |
·发酵粗酶液的浓缩 | 第73-74页 |
·粗酶制品的硫酸铵沉淀初级分离 | 第74页 |
·DEAE-Sepharose F.F.层析 | 第74-75页 |
·Phenyl Sepharose CL-4B层析 | 第75-76页 |
·电泳结果 | 第76-77页 |
·纯度鉴定 | 第77-79页 |
4 讨论 | 第79页 |
5 参考文献 | 第79-81页 |
四 脂蛋白酯酶的性质鉴定 | 第81-99页 |
中文摘要 | 第81页 |
英文摘要 | 第81页 |
前言 | 第81页 |
1 试验材料 | 第81-83页 |
·菌种 | 第81-82页 |
·试剂 | 第82页 |
·主要仪器 | 第82-83页 |
·培养基 | 第83页 |
2 实验方法 | 第83-89页 |
·脂蛋白酯酶活力的测定 | 第83-84页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第84页 |
·菌体培养 | 第84页 |
·无细胞粗酶液的提取 | 第84页 |
·发酵粗酶液的浓缩 | 第84页 |
·粗酶制品的硫酸铵沉淀初级分离 | 第84页 |
·酶的最适pH研究 | 第84-85页 |
·酶的最适反应温度研究 | 第85-86页 |
·酶的酸碱稳定性研究 | 第86页 |
·酶的热稳定性研究 | 第86-87页 |
·液体状态保藏放置稳定性研究 | 第87页 |
·脂蛋白酯酶米氏常数Km的测定 | 第87-88页 |
·脂蛋白酯酶在不同pH条件下的米氏常数Km的测定 | 第88页 |
·脂蛋白酯酶在不同温度条件下的米氏常数Km的测定 | 第88页 |
·分子量测定 | 第88页 |
·等电点测定 | 第88-89页 |
·部分试剂对酶活性的影响 | 第89页 |
3 结果与分析 | 第89-97页 |
·酶的最适pn | 第89页 |
·酶的最适反应温度 | 第89-90页 |
·酶的酸碱稳定性 | 第90-91页 |
·酶的热稳定性 | 第91-92页 |
·液体状态保藏放置稳定性 | 第92页 |
·脂蛋白酯酶米氏常数Km | 第92-93页 |
·脂蛋白酯酶在不同pH条件下的米氏常数Km | 第93-94页 |
·脂蛋白酯酶在不同温度条件下的米氏常数Km | 第94页 |
·分子量测定 | 第94-95页 |
·脂蛋白酯酶的等电点 | 第95-96页 |
·部分试剂对酶活性的影响 | 第96-97页 |
4 讨论 | 第97-98页 |
5 参考文献 | 第98-99页 |
结论 | 第99-100页 |
致谢 | 第100-101页 |
发表文章目录 | 第101-102页 |